ELISA analizė - nuo HbsAg atrankos iki sudėtingos diagnostikos

Įvedus šiuolaikines medicinos technologijas, didėja imunocheminių diagnostikos metodų galimybės, galinčios greitai ir tiksliai atpažinti ligą, kai kiti metodai yra bejėgiai. Suprasdami, kad hepatito B virusas gali būti organizme labai mažoje koncentracijoje, kur jis negali būti aptiktas net tokiu patikimu metodu kaip PCR, būtina iš naujo išnagrinėti šios ligos diagnozavimo problemą ir įvertinti imuninės analizės galimybes.

Šioje medžiagoje mes išsamiai analizuosime visus, susijusius su šio tipo laboratoriniais tyrimais. Jūs sužinosite, kas yra fermento imunologinė analizė ir kaip ji atliekama, koks yra Australijos antigenas ir kaip tai nustatoma, ką nesuprantamos santrumpos Hbs ag, Hbcor, vidutiniškai ir jų vaidmuo analizuojant analizę, taip pat gausite daug naudingos ir įdomios informacijos.

Straipsnio turinys:

Bendra informacija apie ELISA

ELISA (sutrumpintas ELISA) yra laboratorinis diagnostikos metodas, kuris gali aptikti tiek antigenus, tiek antikūnus iš įvairių infekcijų, įskaitant hepatitą B. Dabartinės žinios apie viruso savybes ir organizmo imuninio atsako savybes leidžia ne tik aptikti infekciją, bet ir ją identifikuoti. vakcinacijos veiksmingumas ir gydymo veiksmingumas.

Fermento imunologinės analizės esmė

ELISA yra pagrįsta „antigenų-antikūnų“ reakcija arba greičiau jo savybėmis.

Reaguodamas į svetimos medžiagos (antigeno), kuris visų pirma yra viruso baltymai, invaziją organizmas gamina apsauginius baltymus - antikūnus. Antikūnai susiduria su sudėtinga reakcija su antigenu, blokuodami jo aktyvumą.

Daugiau kalbėsime apie žemiau esančius antigenus ir antikūnus, bet dabar pastebėsime, kad kiekvienam antigenui yra griežtai individualūs arba kaip gydytojai sako, homologiniai antikūnai. Taigi, jei norime nustatyti konkretų antigeną kraujyje, mes naudosime diagnostinę tabletę su antikūnais. Jei yra kraujo antigenas, jis reaguoja su antikūnais, kuriuos galima aptikti įvairiais būdais. Ir atvirkščiai. Jei norime rasti antikūnų, mums reikia tabletės su atitinkamu antigenu.

Dažniausiai krūtinės diagnostinė vertė yra tik tie antikūnai, su kuriais galite diagnozuoti beveik bet kokią infekciją. Tačiau hepatito B viruso ypatumas yra tas, kad pagrindinį vaidmenį diagnozėje atlieka vienas iš antigenų - Australijos antigenas.

Kaip yra IFA

Apsvarstykite tipinį ELISA metodą konkrečiam pavyzdžiui, kai norite nustatyti antikūnus prieš patogeną.

Diagnostikai naudojama tabletė su 96 šulinėlių, kurie yra prisotinti atitinkamu antigenu. Be to, procedūra yra tokia:

serumas taikomas visoms ląstelėms;

homologiniai antikūnai reaguoja su antigenu ir prijungiami prie plokštelės;

išplaunama tabletė, pašalinant nesusijusius antikūnus;

tada į ląsteles patenka fermentinė etiketė - medžiaga, kuri reaguoja su antikūnais ir sukelia ląstelės turinio dažymą.

Tai yra standartinė ELISA procedūra su dažymu, kuri naudojama, pavyzdžiui, imunochromatografinėse bandymo juostose.

ELISA neapsiriboja kokybiniu antikūnų arba patogeno antigenų nustatymu. Kuo daugiau antikūnų yra tabletės ląstelėse, tuo intensyvesnis dažų tirpalas. Lyginant jos optinį tankį su valdymu, šiuolaikinė įranga gali gana tiksliai apskaičiuoti antikūnų koncentraciją vieneto tūriui. Taigi atliekama kiekybinė ELISA, matavimo matas, kuriuo dažniausiai yra optinio tankio vienetai (EOP).

Imunochemiluminescencinė analizė

Šiandien yra keletas dešimčių ELISA tipų, kurių kiekviena turi pirmenybę. Populiariausia hepatito B diagnozė yra imunochemiluminescencinė analizė.

Šios analizės fermentinė etiketė nėra chromatinai, kaip ir standartinėje ELISA, bet specialios medžiagos - fosforai, dėl kurių kompleksas šviečia ultravioletinėje šviesoje.

Naudojant specialų prietaisą - luminometrą, galite tiksliai nustatyti emisijos lygį ir, atitinkamai, norimos medžiagos koncentraciją.

Naudojant ELISA metodus, nustatomi beveik visi esami hepatito B viruso antigenai ir jų antikūnai.

Hepatito B viruso antigenai: Hbs, Hbe ir Hbc

Terminas antigenas (antigenas) yra kilęs iš dviejų angliškų žodžių: antikūno - antikūno ir generatoriaus gamintojo. Taigi, pagal antigeną suprasti bet kokią medžiagą, kuri sukelia antikūnų susidarymą organizme. Dažniausi antigenai yra baltymų junginiai.

Šiandien yra žinomi trys hepatito B viruso antigenai: hbsag, hbc ir hbe.

Australijos antigenas

Baltymų, kurie yra patogeno hepatito B išorinio apvalkalo dalis, buvo aptikta jau seniai prieš pat viruso atradimą. Šis antigenas gavo savo pavadinimą, nes jis pirmą kartą buvo identifikuotas iš vietinių Australijos gyventojų. Tačiau, iš pradžių, baltymas buvo laikomas ne antigenu, bet visiškai paplitęs vietinių gyventojų kraujo elementas, o jo sąsajos su kepenų ligomis sąmoningumas šiek tiek vėliau.

Ilgalaikis antigeno išsaugojimas kraujyje ir antikūnų nebuvimas rodo HBeAg teigiamo lėtinio hepatito B susidarymo galimybę.

Šiandien profesinėje literatūroje praktiškai nerandamas pavadinimas „Australijos antigenas“ ir jį pakeitė tarptautinė santrumpa „HbsAg“ (hepatito b paviršiaus antigenas - hepatito B paviršiaus antigenas). Be to, galite rasti santrumpų hbs antigenas arba tiesiog hbs. Bet kuri iš šių santrumpų yra priimtina ir gali būti papildyta įrašant HBV arba HBV - hepatito B virusą (hepatito b virusą).

B hepatito viruso paviršiaus antigenas turi vieną puikų bruožą, dėl kurio jis yra nepakeičiamas diagnostinis žymuo - jo koncentracija kraujyje gali pasiekti labai aukštą kiekį, iki pusės miligramo kraujo mililitre. Taip yra todėl, kad tik nedidelė dalis naujų HBsAg, susidariusių reprodukuojant hepatito B virusą, vyksta į naujų virusinių dalelių membranų statybą, o likusi dalis laisvai cirkuliuoja kraujyje. Kaip rezultatas, hbs dalelių kiekis kraujyje gali viršyti šimtų tūkstančių kartų virionų skaičių.

Ši savybė daro Australijos antigeną pagrindiniu hepatito B atrankos diagnozės ženklu, kuris kraujyje aptinkamas jau 4-6 savaites po infekcijos. Kaip antikūnai, paviršiaus antigenas juos palaipsniui pakeičia. Jei po 6 mėnesių HBsAg išlieka, tai rodo infekcijos perėjimą prie lėtinės formos.

Pastaruoju metu, kai tapo įmanoma nustatyti hbs hbv koncentraciją, jos vaidmuo diagnozėje išaugo dar labiau, nes, remdamasis antigeno lygiu, gali išskirti lėtinį hepatitą B (HBV) nuo sveikos nešiklio būklės bei stebėti gydymo veiksmingumą.

Pagrindiniai antigenai

Viruso branduolyje - nukleokapsidas - yra baltymai, kurie kontroliuoja HBcoreAg ir HBeAg viruso dauginimąsi.

HBcoreAg, kuris taip pat gali būti vadinamas HBCore antigenu, hbc arba branduolio antigenu, gali būti randamas tik kepenų audiniuose, tiesiogiai hepatocitų branduoliuose. Šis antigenas nėra aptinkamas kraujyje ir neturi diagnostinės vertės.

Hepatito viruso struktūra

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - priešingai, atlieka svarbų vaidmenį diagnozuojant. HBeAg ir HBcoreAg yra artimi giminaičiai. Jie yra labai panašūs į struktūrą ir daugiausia skiriasi molekulių erdvinėje padėtyje. Kitaip nei HBcore, HBe nėra nukleokapsido sienos dalis ir laisvai cirkuliuoja kraujyje.

HBe vaidmuo infekciniame procese nėra pakankamai aiškus, tačiau jo elgesio ypatumai ir jų ryšys su infekcinio proceso eiga jau buvo pakankamai ištirti. HBeAg rodo aktyvų viruso reprodukciją ir leidžia patikimai nustatyti lėtinės CHB - HBeAg-teigiamos arba HBeAg-neigiamos fazės fazę.

HBe gali būti aptinkamas kraujyje jau ūminio hepatito B viruso (HBV) inkubacijos laikotarpiu, o didelė HBeAg koncentracija 3 savaites greičiausiai rodo lėtinio proceso grėsmę. HBe koncentracija yra tiesiogiai susijusi su Dane dalelių (vadinamųjų hepatito B viruso dalelių) kiekiu - kuo didesnis HBe kiekis, tuo didesnė HBV DNR koncentracija kraujyje.

HBeAg yra pagrindinis infekcinio ligos žymuo. HBeAg teigiamų pacientų kraujas yra daug užkrečiamas nei HBeAg-neigiamas. Pavyzdžiui, nėščioms moterims, turinčioms teigiamą poveikį HBe ir Hbs, infekcijos perdavimo vaikui tikimybė pasiekia 50%, o tokio įvykio tikimybė HBe-neigiama, bet teigiamų motinų Hbs - 10-30%.

Hbe lemia lėtinio hepatito eigą. HBeAg teigiamas lėtinis hepatitas B turi daug nepalankesnę prognozę dėl cirozės išsivystymo.

Tai turbūt viskas, ką reikia žinoti apie HBV antigenus, ir mes pereiname prie antrosios hepatito B žymenų grupės - antikūnų.

ELISA metodas hepatito nustatymui

Šiuolaikinė medicina yra žinoma dėl daugelio kepenų ligų. HCV (virusinis hepatitas C) yra vienas iš labiausiai paplitusių ir pavojingų, nes ši infekcija dažnai vystosi asimptomatiškai ir sukelia kritines komplikacijas, net mirtį. Todėl labai svarbu laiku diagnozuoti ligą, kuri atliekama naudojant įvairius metodus, įskaitant su fermentais susijusią imunosorbentinę analizę (ELISA), siekiant nustatyti viruso antikūnus kraujyje.

HCV infekcijos už hepatito diagnozę pareiškimas

Laboratorinėje diagnostikoje, skirtoje hepatito C (HCV infekcijai) aptikti, naudojami dviejų tipų metodai:

1. Serologinis, pagrįstas hepatito C viruso antikūnų (anti-HCV) nustatymu, taip pat vadinamu ELISA (su fermentu susijęs imunosorbento tyrimas). Juo siekiama nustatyti anti-HCV (IgM ir IgG žymenis), naudojamus atrankai ir diagnozuojant C hepatitą. Abu šie žymenys gali būti nustatyti kraujyje (plazmoje) skirtingais deriniais, kuriems reikalingas tinkamas klinikinis aiškinimas. Siekiant patvirtinti anti-HCV buvimą, atliekamas RIBA (rekombinantinis imunoblotas) testas.
2. Molekulinė biologinė, skirta RNR viruso aptikimui. HCV RNR tyrimas skirtas šioms pacientų kategorijoms:
   • su nustatytu anti-HCV;
   • be aptiktų anti-HCV, bet su nustatytais epidemiologiniais ir klinikiniais duomenimis, dėl kurių reikia pašalinti ūminę HCV formą.

Viruso RNR gali būti aptiktas kraujyje jau praėjus 14 dienų po infekcijos, ty prieš pasirodant anti-HCV, kuris pasireiškia per pirmuosius 2-3 mėnesius.

Norint galutinai patvirtinti diagnozę (ypač kai nustatomas tik vienas iš dviejų HCV infekcijos žymenų), ekspertai rekomenduoja, kad po tam tikro laiko būtų atliekami pakartotiniai anti-HCV ir HCV RNR tyrimai.

Hepatito nustatymas ELISA metodu

Nustatomas ankstyvas virusinio hepatito, ypač asimptominių, anicterinių formų, serume nustatymas, virusinių baltymų (antigenų) arba jų antikūnų (gaminamų imuninės sistemos, kai virusai patenka į organizmą) buvimas, naudojant imunoskopinį tyrimą (ELISA). Tai yra visuotinis imunologinės diagnozės metodas, jo esmė - „antigeno-antikūno“ sąveikos tyrimas. Jis plačiai naudojamas daugelyje pasaulio šalių.

Hepatito nustatymas ELISA metodu leidžia nustatyti ne tik tikslią diagnozę, bet ir įvertinti ligos pobūdį, taip pat pasirinkti kompetentingą ir veiksmingą gydymą naudojant tradicinius vaistus (interferoną, ribaviriną), tiesioginio poveikio vaistus (Sofosbuvir, Daclatasvir) ir jų generinius Indijos ir Kinijos produktus.

Kai tik įmanoma, viruso hepatito diagnozę ELISA metodu papildo PCR (polimerazės grandininė reakcija), kuri leidžia nustatyti hepatito virusų buvimą RNR.

Kiek tiksli yra imuninės analizės metodas

Remiantis ekspertų vertinimais, ELISA metodo tikslumas yra 95%, ty 95 iš 100 pacientų, vartojančių fermentinį imunologinį tyrimą, HCV antikūnų - IgM ir IgG - buvimas ir kiekis gali būti aptinkamas kraujyje. Jei rezultatas yra teigiamas, galima diagnozuoti HCV sąlytį su organizmu (ne pats virusas, ty antikūnų buvimas kraujyje, kuris gali būti jau perduotos ligos rezultatas).

Tačiau, nepaisant didelio jautrumo imunosorbentų tyrimui (ELISA), 40% pacientų, kurių rezultatas buvo teigiamas, virusas negali būti aptiktas, o tai rodo abejotiną arba klaidingą teigiamą rezultatą.

Siekiant patvirtinti ELISA rezultatų teisingumą, RIBA metodas (rekombinantinis imunoblotingas) naudojamas tiksliau tirti antikūnų prieš HCV aptikimą.

Anti NCV pagrindinis bandymas

Efektyvūs tyrimai, skirti nustatyti antikūnų prieš hepatito virusus buvimą, apima anti-HCV branduolį, kuris naudojamas kaip patvirtinimo testas, kai gaunami „neaiškūs“ rezultatai.

Jei anti-HCV branduolys serume nustatomas esant 1: 1000 praskiedimui, tikėtina, kad bus diagnozuotas teigiamas rezultatas, ty yra liga.

Jei 1: 1000 skiedimo mėginiai yra neigiami, skiedžiant 1: 200 yra teigiami, reikia atlikti viruso RNR tyrimą. Šiuo atveju greičiausiai nėra HCV infekcijos.

Svarbu suprasti, kad lėtinėmis HCV formomis antikūnai nuolat aptinkami, o pašalinant (pašalinant iš organizmo ląstelių) virusas išlieka 4–8 metus ar ilgiau. Todėl anti-HCV buvimas ne visada rodo kūno užsikrėtimą ir neleidžia daryti objektyvių išvadų apie proceso aktyvumą.Siekiant gauti tikslius duomenis apie viruso kiekį, kepenų pažeidimo laipsnį, infekcijos trukmę ir skirtumą tarp ūminių ir lėtinių ligos formų, rekomenduojama naudoti skirtingų HCV antikūnų spektrą peptidai. Taip pat svarbu stebėti jų kiekybinę ir kokybinę dinamiką.

ELISA hepatito C atveju

PAV hepatitas C veiksmingai nustato, jis yra vienas iš ligos diagnozavimo metodų, pagrįstas antigenų ir antikūnų sąveika. Imunocheminė reakcija ELISA metodu (imunosorbentinis tyrimas su fermentu) leidžia nustatyti kūno anti-HCV antikūnus. Šis metodas leidžia diferencijuoti hepatito C diagnozę žmonėms, nustatyti ligos išsivystymo etapą, prognozuoti jo eigą. Konkrečių serologinių žymenų identifikavimas taip pat leidžia pasirinkti efektyvų antivirusinį patologijos gydymą.

Metodo savybės

C tipo hepatito viruso antikūnų aptikimo žmogaus kraujyje analizė atliekama prijungiant svetimkūnį (antigeną) prie imunoglobulino molekulės. Pridedamas fermentų fermentas atlieka tam tikros etiketės vaidmenį. Tai leidžia jums sekti imunocheminę reakciją ir vieną iš jos komponentų.

Kaip fermento komponentai gali būti:

• antikūnų;
• antikūnai, pažymėti specialiu fermentu;
• antigenus;
• fermentų substratai;
• indikatorių dažikliai.

Kai kenksmingi svetimi mikroorganizmai patenka į žmogaus kūną, apsauginės jėgos pradeda gaminti imunoglobulinus (antikūnus). Vėliau jie veikia antigenus ir neutralizuoja juos. Dėl šios sąveikos susidaro antikūnų antigenas, kuris turi savo kiekio ir kokybės rodiklius. Jie rodo HCV infekcijos buvimą arba nebuvimą. Jei fermento imuninis tyrimas yra teigiamas, yra C tipo hepatito virusas.

Šiuolaikinės medicinos technologijos gali žymiai sumažinti hepatito viruso aptikimo laiką, kuris pasireiškia ūmaus pavidalo. Dėl trečiosios kartos diagnostikos sistemų taip pat galima padidinti imunocheminės reakcijos specifiškumą ir jautrumą.

Pagrindinė ELISA tyrimo metu tiriama medžiaga yra veninis kraujas (įskaitant donoro kraują). Pagal liudijimą gali susidaryti stuburo skysčio mėginių ėmimo skystis arba amniono skystis.

Teigiamas C tipo hepatito ELISA metodo rezultatas ne visada rodo virusinės infekcijos buvimą organizme. Daugiau nei 35% atvejų viruso antigenai kraujyje nenustatomi, o tai sukelia klaidingą teigiamą rezultatą.

Šis metodas leidžia jums stebėti kiekybinius ir kokybinius pokyčius, skirtumą tarp ūminių ir lėtinių hepatito C formų. Tačiau jis yra neveiksmingas patologinio proceso aktyvumui nustatyti. Siekiant tiksliau patvirtinti HCV infekcijos buvimą, taip pat turėtų būti naudojami kiti patologinės diagnostikos metodai.

ELISA indikacijos

Užsienio mikroorganizmų (antigenų) specifinės ir kiekybinės koncentracijos nustatymo metodas imunoglobulinų ir fermentų pagalba atliekamas keliais etapais. Atsižvelgiant į spalvos pokyčius ir fermentų kiekybinį matą, gydytojas gali diagnozuoti C tipo hepatitą žmonėms.

Šios žmonių grupės yra labiau linkusios į ligą:

1. Pacientai, kuriems buvo atlikta chirurginė intervencija, taip pat vidaus organų ir sistemų ligos.
2. ŽIV užsikrėtę (užsikrėtę žmogaus imunodeficito virusu). Didelė dalis šios grupės žmonių yra narkomanai.
3. Medicinos specialistai.
4. Teisėsaugos pareigūnai.
5. Nėščios moterys.

Hepatito virusinė kilmė dažnai sukelia vėžį (pvz., Kepenų vėžį). Štai kodėl kraujo donorystė fermento imunologiniam tyrimui pirmiausia turėtų būti skirta pagrindinės rizikos grupės žmonėms, taip pat pacientams, sergantiems ūminiu ar lėtiniu hepatitu.

Remiantis indikacijomis, gydytojas gali nustatyti ELISA metodą pacientams, kuriems diagnozuota:

• STI (lytiniu keliu plintančios infekcijos);
• virusinės kilmės ligos (papilomos virusas, herpesinė infekcija, hepatitas ir tt);
• alerginis patologijos pobūdis;
• imunodeficitas;
• onkologija

Privalumai ir trūkumai

ELISA hepatitas C gali būti aptiktas ankstyvoje stadijoje, taip pat simptomiškai ir anikteriškai. Kaip ir bet kuris kitas diagnostikos metodas, jis turi keletą privalumų ir trūkumų.

Tarp teigiamų ELISA savybių ekspertai nurodo:

1. Kokybinių ir kiekybinių rodiklių tikslumas. Metodo jautrumas viršija kitus tyrimus, susijusius su dešimčių kartų hepatito nustatymu.
2. Reikšmingas virusinių infekcijų aptikimo laiko sumažėjimas dėl šiuolaikinių diagnostikos sistemų.
3. Žema kaina, palyginti su kitais hepatito nustatymo žmonėmis tyrimais.
4. Galimybė diagnozuoti kepenų ligą ankstyvame etape, jei nėra ryškių simptomų.
5. Faziniai tyrimai naudojant automatizuotus procesus.

Nepaisant didelio ELISA tikslumo, daugiau nei 35% atvejų, teigiamu rezultatu, pacientas hepatito viruso neaptinka. Dažnai testas nepatvirtina patologijos, kuri rodo abejotiną ar neigiamą rezultatą.

Vieno laipsnio ar kito tyrimo patikimumas turi įtakos:

1. Vaistai.
2. Metabolizmo procesų pažeidimai organizme.
3. Tam tikrų lėtinių ligų, kurios prisideda prie aktyvios imunoglobulinų gamybos, buvimas.

Atsižvelgiant į in vitro ELISA rezultatų trūkumus, pacientui skiriamas papildomas tyrimas. Siekiant patikimai nustatyti hepatito C viruso infekcijos antikūnus, naudojamas PCR (polimerazės grandinės reakcija) arba RIBA (rekombinantinis imunoblotavimas).

Kas identifikuoja ir kaip atliekamas tyrimas

ELISA analizė gali aptikti daugybę žmonių ligų.

Be visų hepatito B antikūnų nustatymo, teigiamas tyrimo rezultatas gali rodyti, kad organizme yra šių patologijų:

• žmogaus imunodeficito virusas;
• herpeso infekcija;
• sifilisas;
• STI (ureaplasmosis, chlamidijos ir kt.);
• papilomos virusas;
• citomegalovirusas.

Tyrimas taip pat yra tam tikras ženklas piktybinių navikų, genetinių patologijų, hormoninių sutrikimų, taip pat endokrininės sistemos veikimo sutrikimų nustatymui.

Pasirengimas tiekti biologinę medžiagą hepatito C virusui aptikti apima maisto ir vaistų atmetimą 12 valandų prieš tyrimą. Be to, būtina sąlyga - susilaikyti nuo alkoholio, riebalų, kepti ir sūrūs maisto produktai.

Tiesioginė ELISA

Pagrindiniai tiesioginio bandymo etapai yra šie:

1. Pirma, laboratorijos technikas paima kraują iš venų (ar kitos biologinės medžiagos), o po to jį įdeda į specialius konteinerius.
2. Užsieniečių mikroorganizmai (antigenai) per 20 min.
3. Specialistas imunoglobulinus (antikūnus) prideda prie antigenų, kurie, kaip nustatyta, sudaro imuninį atsaką. Tokiu atveju komponentai paliekami kelias valandas.
4. Nepritvirtinti antigenai pašalinami pilant turinį iš konteinerių.
5. Medžiaga nuplaunama tirpalu ir apdorojama fermentais ir paliekama vieną valandą.
6. Turinio spalva ir koncentracija analizuojama naudojant kolorimetriją.

Jei kiekybinis turinio rodiklis viršija leistinas ribas, tai rodo hepatito C viruso buvimą žmogaus organizme.

Netiesioginė ELISA

Tai reiškia, kad nenustatyti imunoglobulinai sąveikauja su antigenais, prie kurių pridedami vėliau pažymėti antikūnai.

Paciento pradžioje kraujas paimamas iš venų. Tada biologinė medžiaga maždaug pusvalandį dedama į specialius konteinerius. Tokiu atveju ant konteinerių sienelių pritvirtinami nepažymėti antikūnai. Tada pridedami žymėti antikūnai. Dėl jų sąveikos susidaro antikūnų-antigenų imuninis kompleksas.

Po keturių valandų indų turinys išpilamas, o laisvi mikroelementai pašalinami. Laboratorijos technikas priskiria žymėtus antikūnus prie jau suformuoto komplekso ir atsiranda imuninis atsakas-antikūnas-antigenas.

Po pakartotinio palaidų mikroelementų pašalinimo į konteinerį pridedamas specialus fermentas, kuris keičia spalvą ir kiekybinius turinio rodiklius. Remiantis gautu rezultatu, specialistas patikrina duomenis ir daro išvadą.

Dekodavimo rezultatai

Vykdant ELISA, atkreipiamas dėmesys į IgA, IgG ir IgM klasių antikūnų buvimą arba nebuvimą. Šių antikūnų kiekybiniai rodikliai lyginami su specialios lentelės duomenimis.

Pasak jos, rezultatų aiškinimas yra toks:

1. Jei visi trys rodiklių tipai nėra apibrėžti, asmuo turi visišką atkūrimą.
2. Kartu teigiamas rezultatas visuose trijuose rodikliuose yra ūminė virusinės infekcijos forma.
3. Jei nustatomi IgG klasės antikūnai, o kitos klasės nenustatytos, asmuo sukėlė po infekcinio imuniteto.
4. Teigiami IgG ir IgA klasės antikūnų rodikliai rodo lėtinį ligos pobūdį. Tačiau, net ir po gydymo, jie lieka nepakitę.
5. Gavus teigiamą visų trijų tipų antikūnų nustatymą, galima pastebėti lėtinio hepatito pobūdžio atkrytį.

Pagal statistiką, IgM lygis pradeda didėti keletą dienų po infekcijos organizme, o tai rodo ankstyvą patologijos stadiją. IgG antikūnai paprastai pasireiškia praėjus 2 savaitėms po ligos pradžios ir išlieka kraujyje ilgą laiką (net ir po regeneracijos). IgA antikūnai aptinkami po 2 savaičių, o jų koncentracija organizme mažėja po vaisto vartojimo.

Atminkite, kad hepatito C ELISA teigiamas ne visada rodo infekcijos buvimą. Dažnai bandymas laikomas klaidingu teigiamu, o tam reikia pakartotinio kraujo donorystės. Kai kuriais atvejais pacientui skiriami papildomi tyrimai, siekiant tiksliau nustatyti kraujo parametrus.

Pagrindinis bandymo kriterijus yra tiksliai nustatyti kiekybinius ir tipinius rodiklius. Jie leidžia nustatyti ne tik viruso buvimą, bet ir ligos formą. C hepatito diagnostika, naudojant šiuolaikinius metodus, leis Jums laiku pradėti gydymą vaistais ir sumažinti neigiamas pasekmes.

Ką reiškia teigiamas ar neigiamas hepatito C PAV rezultatas?

Siekiant tiksliai nustatyti hepatito tipą po preliminarios diagnozės, numatyti ligos eigą, nustatyti jo vystymosi etapą, naudojant įvairius serologinius tyrimus. Tikslesni duomenys gaunami po fermento imunologinio tyrimo. Naudojant ELISA hepatitą C, diagnozuotą 95% atvejų. Būtent ši analizė leidžia nustatyti hepatito C antivirusinės (HCV antivirusinės) antikūnus ir įvertinti ne tik patologinio proceso aktyvumo laipsnį, bet ir gydančio gydytojo paskirtą antivirusinį gydymą ir jo kontrolę.

Kai reikia mokslinių tyrimų ir jo ypatybių

Hepatitas C yra pavojingiausias šios ligos tipas, nes jis turi ilgą latentinį (latentinį) laikotarpį ir pavojingas pasekmes. Siekiant išvengti teisingos ir savalaikės diagnozės atsiradimo ir išsivystymo, vienas iš informatyviausių metodų yra pripažintas imunologinis tyrimas.

Serologinių žymenų pagalba galima patvirtinti HCV infekcijos buvimą paciento kraujyje, o analizė, pagrįsta struktūrinių ir nestruktūrinių virusinių peptidų kompleksu, leidžia gauti išsamiausius ir patikimus duomenis apie antikūnų buvimą. Sveikiems žmonėms nėra hepatito C viruso antikūnų paciento kraujyje, o jų aptikimas rodo, kad yra patogeno ir atsiranda patologinis procesas.

Tyrimo metu ekspertai nustato visus IgM ir IgG klasės antikūnus, kurie yra tiesiogiai susiję su HCV struktūriniais ir nestruktūriniais proteinais. Atliekant šį tyrimą, mes galime identifikuoti hepatito C virusu užsikrėtusius pacientus ankstyvoje ligos stadijoje, o bendras antikūnų kiekis paciento kraujyje rodo ligos ar ankstesnės infekcijos pradžią.

Ligos pradžią rodo IgM klasės antikūnų buvimas, o C tipo hepatitas gali būti vertinamas pagal aptiktus IgG klasės antikūnus. Jie tampa atgaivinimo patvirtinimu (galutinis ligos etapas), kuriam būdingas anatominis ir funkcinis pažeistų organų atsigavimas.

Laiku atlikta ELISA (ELISA) programa leidžia nustatyti patologinį procesą ankstyvame vystymosi etape, diagnozuoti ligą labai tiksliai ir padidinti greitos atsigavimo galimybes. ELISA testas leidžia nustatyti ne tik viruso buvimą, bet ir specifinių antivirusinių antikūnų skaičių.

1. Moterys, esančios nėštumo būsenoje registruodamos prieš gimdymą klinikoje.
2. Pacientai, kuriems yra ūminio ar lėtinio hepatito simptomai.
3. Medicinos specialistai, kurie nuolat bendrauja su biologinėmis medžiagomis.
4. Pacientai, kuriems diagnozuota AIDS.
5. Narkotikų piliečiai.
6. Pacientai, turintys alkoholizmą, ir tie, kurie vadovauja asocialiam gyvenimo būdui.

Persiuntimas į ELISA testą (fermento imunologinį tyrimą) ir gauti teisėsaugos pareigūnus ar viešųjų paslaugų darbuotojus. ELISA poreikis atsiranda, jei įtariate kepenų funkcionalumo pažeidimą arba gavus abejotinus duomenis apie organo būklę po ultragarso. Jei gydytojas turi atlikti sudėtingą chirurginę intervenciją, gydytojas gali suteikti pacientui ELISA kraujo tyrimą. Jei moteris (ypač vyresnė nei 30 metų) planuoja nėštumą, o kraujo tyrime nustatyta padidėjusi bilirubino arba transferazės (ALT, AST) reikšmė.

Konkretūs anti-virusiniai IgG antikūnai aptikti jau keletą metų. Jų koncentracija palaipsniui mažėja, o tai patvirtina teigiamą dinamiką. Kaip ir lėtiniu C hepatitu, šiuo atveju bendras anti-HCV antikūnų skaičius nesikeičia. Tiksli diagnozė grindžiama IgM antikūnų kiekio nustatymu.

C hepatito eiga priklauso nuo viruso, dėl kurio atsirado liga, genotipo. Yra žinomos 11 modernių vaistų rūšių. Sunkiausiose situacijose galima užsikrėsti keliais viruso genotipais, o vienas iš jų visada yra dominuojantis. Tik tiksli diagnozė padės pasirinkti efektyviausius vaistus efektyviam gydymui, pasirinkti jų dozę ir nustatyti terapinių intervencijų trukmę.

Tyrimo rezultatų vertinimas

Norint diagnozuoti įtariamą C hepatitą ir gauti orientacinę informaciją apie patogeno kiekį ir kokybę, atliekamas su fermentu susijęs imunosorbento tyrimas (ELISA), kurio metu specialistai patvirtina viruso buvimą organizme ir gali įvertinti jo veiklą.

Šiame tyrime galime padaryti išvadas apie:

• virusinė apkrova;
• lėtinio proceso vystymosi rizika;
• HCV RNR molekulės reprodukcijos (replikacijos) aktyvumas;
• patologinio proceso trukmė;
• kepenų pažeidimo laipsnis.

Taip pat įvertinamas ligos pavojaus rizika. Nustatyti naudojant ELISA antivirusinę HCV antikūnus, virusas replikuojamas. Galutiniai rezultatai reikalauja patvirtinimo, atliekant tikslesnius tyrimus.

Fermentinio imunologinio tyrimo rezultatų kokybinis įvertinimas išreiškiamas teigiamu arba neigiamu rezultatu. ELISA leidžia aptikti hepatitą C ankstyvoje ligos raidos stadijoje, taip pat ligos eikviumo metu.

Analizė turi tam tikrų privalumų, įskaitant:

1. Kokybinių ir kiekybinių rodiklių tikslumas.
2. Minimalus studijų laikas.
3. Fazinis bandymas.

Fermento imunologinis tyrimas yra vienas iš tyrimų, kurie pasižymi dideliu tikslumu, tačiau, nepaisant visų pranašumų, kai kuriais atvejais jis neleidžia nustatyti žmogaus organizme esančio patogeno.

Mokslinių tyrimų tikslais laboratorijos asistentas paima paciento venų kraują ir patalpina jį į specialius konteinerius. Po tam tikro laiko antigenai (užsienio mikroorganizmai) yra pritvirtinti prie indo sienelių. Specialistas imunoglobulinus (antikūnus) įterpia į indą ir siekia imuninio atsako.

Gauti rezultatai palyginami su specialiai parengtos lentelės duomenimis. Rezultatas įvertinamas kaip:

Teigiamas, nurodant ūmios ligos formos buvimą, jei kraujo tyrimo metu nustatomi IgA, IgG, IgM klasių antikūnai.

Neigiamas - nebuvo aptikti visi trys antikūnų tipai.

Neteisingas teigiamas - ELISA rezultatas yra teigiamas, bet po PGR (patvirtinta polimerazės grandine) nėra patvirtintas.

Abejotini - žymenys kraujyje nėra aptikti esant hepatitui C. Tai įmanoma, jei diagnozuojama per anksti. Reikalinga pakartotinė analizė po 2-3 savaičių. Siekiant tikslios diagnozės, atlikite PCR analizę.

Pacientams, vartojantiems vaistus, turinčius slopinamąjį poveikį organizmo gynybinei sistemai, galima gauti klaidingą neigiamą analizės rezultatą.

Tiek klaidingi teigiami, tiek klaidingi neigiami analizės rezultatai galimi dėl kelių priežasčių. Visų pirma tai yra minimali virusinė apkrova pačioje ankstyvoje ligos vystymosi stadijoje. Taip pat svarbu paciento imuninės sistemos būklė ir individualios jo kūno savybės. Tyrimo rezultatai reikšmingai įtakoja vaistų vartojimą tarp imunosupresantų.

Neįmanoma visiškai pasitikėti fermento imunologinio tyrimo rezultato tikslumu, jei pacientas yra nėščia. Gali būti klaidingi rezultatai tais atvejais, kai analizė atliekama pacientams, sergantiems autoimuninėmis ligomis, onkologinėmis ligomis su gerybiniais navikais.

Papildomas tyrimas atliekamas, jei pacientas neseniai patyrė sunkią infekcinę ligą, jam buvo diagnozuotas medžiagų apykaitos sutrikimas arba endokrininės sistemos sutrikimas. Jei kraujo sudėtis padidino heparino kiekį arba žymiai sumažino mikroelementų kiekį.

Analizės tikslumas gali būti padidintas laikantis galiojančių pasirengimo jos pristatymui taisyklių:

1. Kraujas dovanojamas tik tuščiu skrandžiu. Paskutinis patiekalas leidžiamas ne mažiau kaip 8-10 valandų iki medžiagos surinkimo.
2. Vakare prieš analizę reikia atsisakyti valgyti riebalų, kepti, aštrūs, rūkyti produktai ir patiekalai.
3. Negalima kalbėti apie alkoholio vartojimą.
4. Geriau mesti rūkyti dieną prieš kraujo donorystę.

Su fermentu susijęs imunosorbentinis tyrimas gali būti atliekamas tik tiems pacientams, kurie šiuo metu neturi ligų dėl katarrinių, uždegiminių ar infekcinių ligų, ir nesiskundžia dėl netikėjimo.

Nurodytų taisyklių ir reikalavimų pažeidimas lemia tai, kad analizės rezultatas vertinamas kaip klaidingas teigiamas. Ši situacija išsivysto 15-20% atvejų. Tačiau, siekiant visiško pasitikėjimo, gydytojai nukreipia pacientus į papildomą tyrimą, kurio metu jie turi paaukoti kraują PCR.

Polimerazės grandinės reakcija

Diagnozė neįmanoma tik remiantis ELISA analizės rezultatais. Antikūnų buvimas tyrimo metu neparodo patogeninio viruso buvimo organizme. Klaidingas tyrimas gali sukelti nervų sutrikimą arba dar aktualesnę paciento reakciją. Diagnostika, pagrįsta ELISA rezultatais, nėra tiksli. Reikia papildomų tyrimų, kurių rezultatai suteiks galutinį gydytojų sprendimą.

Svarbu prisiminti, kad klaidingi teigiami bandymų rezultatai galimi žmonėms, kurie šiuo metu kenčia nuo kitų infekcinių ligų, tačiau jų imuninė sistema tinkamai neatsakė į patogenų ar virusų įsiskverbimą į organizmą.

Diagnozuojant C hepatitą galima atlikti keletą laboratorinių tyrimų, tai yra ypatinga vieta, kurioje yra imunosorbento fermento tyrimas (ELISA). Kokybinis rodiklių vertinimas apibrėžiamas kaip teigiamas arba neigiamas rezultatas. B hepatito viruso nebuvimas paciento kraujyje yra norma, tačiau kai kuriais atvejais, atlikus tyrimą, ekspertai teigia, kad biologinėje medžiagoje nustatyta, kad kai kurių RNR fragmentų (ribonukleino rūgšties) koncentracijos yra nereikšmingos. Nustatykite juos naudojant PCR (polimerazės grandininė reakcija).

Šis kraujo tyrimas leidžia nustatyti hepatito C sukėlėjus ankstyvuoju ligos vystymosi etapu ir nustatyti tiksliai diagnozę. Tyrimas grindžiamas tuo, kad jų struktūroje virusai turi DNR molekules (hepatitą B) arba RNR (C hepatitą).

Analizuojant PCR, naudojant specialų gydymą pacientų kraujo mėginiais:

• padidinti nukleorūgšties molekulių koncentraciją;
• nustatyti jų tipą;
• nustatyti patogeno tipą.

Jei žmogaus kraujyje yra nedidelis patogeno RNR fragmentų kiekis, visi jie bus aptikti PCR. Tai leidžia tiksliai diagnozuoti. Pagrindinis šios analizės skirtumas tarp visų kitų tyrimų metodų yra 100% tiksli diagnozė.

Ši analizė atliekama tiriant nėščių moterų, kurios kreipėsi į priešgimdyminę kliniką registracijai, kraują, su įtariamu hepatitu C su ilgu latentiniu (latentiniu) laikotarpiu, sunku tiksliai diagnozuoti naudojant ELISA. PCR yra būtinas tais atvejais, kai po fermento imunologinio tyrimo buvo gautas abejotinas rezultatas.

Hepatito C virusas tokioje situacijoje yra paciento organizme, tačiau jis dar nesukėlė greitos ligos raidos. Tai yra latentinė ligos eiga. Analizė atliekama gana greitai, nes nereikia auginti patogeno naudojant maistinę terpę, kad gautumėte rezultatą. Pagrindinis skirtumas tarp PCR ir su fermentu susieto imunosorbento tyrimo (ELISA) yra tas, kad šiame tyrime nėra tokio, kaip klaidingo teigiamo ar abejotino rezultato.

Virusinio hepatito tyrimas pagal IFE metodą

ELISA diagnozuojant virusinį hepatitą. Fermentų imuninės analizės galimybės

Specifinė virusinės hepatito laboratorinė diagnostika pagrįsta imunocheminių ir molekulinių biologinių tyrimų metodų taikymu. Pagrindiniai imunocheminiai metodai yra radioizotopai arba radioimunai (RIA) ir imunologiniai tyrimai (ELISA). Imunocheminiai diagnostikos metodai yra pagrįsti specifine antigeno sąveika - antikūnu, vėliau identifikavus kompleksą naudojant specialias etiketes. Dažniausias fermento imunologinis tyrimas.

Pirmieji pranešimai apie fermento imunologinio tyrimo naudojimą. kaip cheminių medžiagų nustatymo metodą 1971 m. vienu metu paskelbė dvi tyrimų grupės - B. Van Weemen, A. Schuurs ir E. Engvall, P. Perlmann. Fermento imunologinis tyrimas grindžiamas šiuo principu: kietoje fazėje, kuri daugiausia naudoja polistireno tabletės šulinių paviršių, yra užkrečiamas infekcinio agento arba antikūno (dažnai antikūnų mišinys) antigenas, kuris bus aptinkamas. Šis antigenas arba antikūnai, pritvirtinti prie kietos fazės, vadinami imunosorbentu.

Inkubavus imunosorbentą ir tiriamąjį serumą, kai aptinkamas agentas, jie yra prijungti prie antigeno-antikūno komplekso. Po plovimo procedūros, kurios metu pašalinami nesurišti antigenai ir antikūnai, atliekamas inkubavimas su konjugatu. Kaip konjugatas, skirtas HBsAg aptikti, naudojami anti-HBs, nustatant hepatito C viruso antikūnus - antikūnus prieš žmogaus imunoglobulinus (antivirusinę konjugatą), pažymėtą krienų peroksidaze. Dėl šio inkubavimo atsiranda prisijungimas prie jau egzistuojančių antigenų kompleksų - papildomai įvestos konjugato antikūnas. Pašalinus nesusietą konjugatą (plovimą), substratas patenka į šulinius. Naudojant peroksidazės konjugatą, vandenilio peroksidas naudojamas kaip substratas kartu su indikatoriumi, kuris dažniausiai naudojamas kaip ortofenilendiaminas (OPD) arba tetrametilbenzidinas (TMB). Rezultatas apskaičiuojamas fotometriškai.

Fermento imunologinio tyrimo metodo analitinių pajėgumų kokybei ir patikimumui būdingi keli kriterijai, įskaitant jautrumą, specifiškumą, tikslumą ir atkuriamumą.

Jautrumas yra minimalus medžiagos kiekis, kurį galima nustatyti fermento imunologiniu tyrimu. Šiuo atveju šio metodo jautrumo apatinė riba yra bandomosios medžiagos koncentracija mėginyje, kuris atitinka mažiausią teigiamą nustatymo rezultatą, kuris statistiškai reikšmingai skiriasi nuo sąmoningai neigiamų mėginių rodiklių. IFTS jautrumas priklauso nuo daugelio aplinkybių, susijusių tiek su bandymų sistemos konstrukcija (imunosorbento afinitetu, ekstrahavimo ir buferinių sistemų kokybe), tiek registracijos metodo skiriamuoju ir tikslumu.

Specifiškumas - gebėjimas tiksliai nustatyti komponentus, kurių nustatymui šis fermento imunologinis tyrimas yra skirtas. ELISA specifiškumą daugiausia lemia antikūnų arba antigenų (ty kompozicijos, naudojamos kaip imunosorbentas) kryžminė reakcija su glaudžiai susijusiais junginiais, taip pat inkubacinės terpės sudėtis (matricos efektas).

Teisingumas - to paties kontrolinio mėginio pakartotinių nustatymų rezultatų vidutinės vertės ir išmatuoto parametro tikrosios vertės atitiktis. ELISA nustatymo tikslumas priklauso nuo bandymo sistemos ir kontrolinio mėginio kokybės. Geros imuninės analizės sistemų teisingumo rodikliai yra 90-110%. Biomedicininių tyrimų ypatumas ELISA tyrime yra tai, kad neįmanoma nustatyti tikslios vertės, todėl tikroji vertė yra kelių ekspertų laboratorijų vidurkis. Statistinis teisingumo kriterijus yra aritmetinis vidurkis ir jo nuokrypio nuo tikrosios vertės laipsnis, išreikštas procentais.

Atkuriamumas - bandymo sistemos gebėjimas rodyti tas pačias vertes, pakartotinai tiriant tą patį mėginį. Atkuriamumas priklauso nuo atsitiktinių klaidų (klaidų) reakcijos procedūros metu ir nuo bandymų sistemų kokybės bei rezultatų registravimo metodo tikslumo. Manoma, kad tos pačios bendrovės tų pačių kontrolinių mėginių atkuriamumas skirtingose ​​laboratorijose neturėtų viršyti 15% variacijos koeficiento vertės.

Yra keletas specifinių ELISA schemų virusinių hepatito žymenų nustatymui: a) tiesioginis fermento imunologinis tyrimas; b) netiesioginis fermento imunologinis tyrimas; c) konkurencinis slopinimas; c) „spąstai“ arba „surinkimo“ metodas.

Iš molekulinių biologinių metodų virusiniam hepatitui diagnozuoti dažniau naudojamos polimerazės grandinės reakcijos ir hibridizacijos. Šie metodai, ypač PCR, leidžia nustatyti labai mažus kiekius specifinės virusinės DNR arba RNR, taigi ir teisėjų replikaciją, o kai kuriais atvejais - replikacijos aktyvumą.

C hepatito kraujo tyrimas

Hepatitas C yra viena iš labiausiai paplitusių kepenų ligų, atsiradusių užsikrėtus hepatito C virusu (HCV), kuris patenka į organizmą pirmiausia, kai jis liečiasi su infekuoto asmens krauju. Pastebimas lėtinis ir ūminis C hepatitas: 70–80 proc. Pacientų, sergančių ūminiu hepatitu C, ligos simptomų nėra, tik kai kuriais atvejais po tam tikro laiko po infekcijos pasireiškia ligos požymiai, išreikšti nuovargiu, pilvo skausmu, apetito praradimu, tamsėjimu šlapimas, vėmimas, pykinimas, išmatos, gelta, sąnarių skausmas. Paprastai simptomai pasireiškia 6-7 savaites po infekcijos, tačiau ligos požymių trukmė svyruoja nuo 2 savaičių iki šešių mėnesių. Jei pasireiškia pirmiau minėti simptomai, reikia pasikonsultuoti su infekcinių ligų gydytoju ir atlikti kraujo tyrimą hepatitui C. Laiku atliktas hepatito diagnozavimas gali aptikti ligą ankstyvosiose stadijose ir gerokai padidinti atsigavimo galimybes.

Kai planuojamas hepatito C tyrimas

Situacijos, kai reikia atlikti hepatito C tyrimą:

• nėštumo ir šeimos planavimo metu;
• pacientams, sergantiems lėtiniu ar ūminiu hepatitu;
• asmeniui gresia pavojus. Tai yra medicinos darbuotojai, kalėjime esantys asmenys, teisėsaugos pareigūnai, žmonės, vartojantys narkotikus, turi daug seksualinių partnerių, turi AIDS, yra hemodializuojami ir kiti.

Pasirengimas C hepatito analizei

Specialaus pasirengimo hepatito C analizei nereikia. Analizei kraujas paimtas iš venų tuščiu skrandžiu, tuo pačiu metu praėjus ne mažiau kaip aštuonias valandas po paskutinio valgio.

C hepatito ELISA tyrimai

Pirmoji analizė, paprastai nustatyta hepatito C - ELISA testo diagnozei (imunosorbentinis tyrimas). C hepatito ELISA tyrimai leidžia nustatyti hepatito C viruso (anti-HCVAb) antikūnų buvimą kraujyje. Jei ELISA testo rezultatas yra teigiamas, tai rodo, kad organizmas yra kontaktas su hepatito C virusu, tačiau 40% žmonių, turinčių teigiamą ELISA, viruso neaptinka kraujyje. Šis reiškinys vadinamas klaidingu teigiamu rezultatu. Be to, ELISA pagalba tikrinamas donoro kraujas.

C hepatito RIBA

C hepatito RIBA analizė naudojama teigiamam ELISA rezultatui patvirtinti. Rekombinantinis imunoblotinis metodas (RIBA) yra tikslesnis antikūnų prieš hepatito C virusą tyrimas, o hepatito C viruso buvimas organizme taip pat nenustato teigiamo rezultato, bet tik patvirtina antikūnų buvimą.

C hepatito PCR tyrimai

Siekiant nustatyti hepatito C virusų buvimą kraujyje (HCV RNR) ir diagnozuoti, jie dažniausiai naudoja polimerazės grandinės reakcijos (PCR) metodą. Šiame tyrime galima tiksliai nustatyti net mažo viruso kiekio kraujyje buvimą. C hepatito PCR analizė gali atskleisti viruso buvimą jau praėjus 5 dienoms po infekcijos, ilgai prieš antikūnų atsiradimą. Kai PCR analizės rezultatas yra teigiamas, tai reiškia aktyvios infekcijos buvimą.

Yra tokių PCR analizės variantų:

• kiekybinis PCR, kuris leidžia nustatyti ne tik viruso buvimo faktą, bet ir viruso kiekį (viruso kiekį). Šis rodiklis labai svarbus nustatant gydymo veiksmingumą;
• genotipų nustatymas, nustatantis hepatito C viruso genotipą, kuris yra svarbus nustatant gydymo trukmę ir taktiką. Yra daugiau nei 10 hepatito C viruso genotipų, tačiau klinikinėje praktikoje pakanka apibrėžti penkis iš labiausiai paplitusių tipų: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Atlikta kiekybinė PGR analizė:

• su kokybiniu teigiamu C hepatito viruso RNR buvimu serume;
• tiksliai įvertinti gydymo veiksmingumą;
• nustatyti paciento gydymo taktiką.

Nėra tiesioginio ryšio tarp hepatito C sunkumo ir viruso kiekio kraujyje. Viruso koncentracija turi įtakos ligos užkrečiamumui, ty kuo didesnis viruso kiekis paciento kraujyje, tuo didesnė viruso perdavimo rizika, pvz., Per lytinį ryšį arba iš motinos į vaiką. Be to, gydymo veiksmingumas priklauso nuo viruso koncentracijos. Gydymo metu palankus veiksnys yra maža virusinė apkrova, o labai didelis - nepalankus.

Genotipų analizė atliekama:

• su kokybiniu teigiamu C hepatito viruso RNR buvimu serume;
• tiksliai įvertinti gydymo veiksmingumą;
• nustatyti paciento gydymo taktiką;
• numatyti infekcinio proceso chronizaciją;
• nustatyti ligos progresavimą.

Nustatant gydymo trukmę, labai svarbu nustatyti viruso genotipą, kuris yra svarbus, nes interferonas turi platų šalutinių poveikių spektrą ir mažą paciento toleranciją.

C hepatito dekodavimo analizė

Paprastai viruso RNR, jų antikūnai ir antigenai visiškai nėra. Antikūnų buvimas kraujyje rodo, kad yra lėtinis arba ūminis C hepatitas arba atsigavimo laikotarpis. Jei HCV RNR yra kraujyje, kuri nustatoma pagal PCR analizę, tai rodo viruso buvimą kraujyje.

Netinkamai atlikus bandymo metodą, transportavimo ir kraujo pakitimus, PCR analizė kartais gali rodyti klaidingus teigiamus rezultatus. ELISA ir RIBA analizė ankstyvosiose ligos stadijose, kai organizmas dar nesukėlė pakankamo antikūnų kiekio, gali rodyti klaidingą neigiamą rezultatą.

Jei, išaiškinant hepatito C testą, gaunami teigiami rezultatai, reikia kreiptis į infekcinės ligos gydytoją ir gastroenterologą tolesniam diagnozavimui ir gydymui.

Segmentuoti neutrofilai nuleisti

Vaiko trombocitai yra normalūs, pakilę, nuleisti

Skydliaukę stimuliuojantis hormonas TGT

Hepatito diagnozė

Negalima iš karto nustatyti hepatito buvimo organizme, nes ligos inkubacinis laikotarpis gali trukti iki keturių savaičių. Kai atsiranda pirmieji ligos požymiai, paveiktame organizme atsiranda radikalūs kraujo sudėties pokyčiai: biocheminė analizė rodo rimtą sveikatos problemą ir patogeninį virusą. Tačiau, norint atlikti galutinę diagnozę, nepakanka dovanoti kraują hepatitui, taip pat išsamią hepatito diagnozę.

Laboratorinė hepatito diagnostika

Pageidautina, kad jis būtų atliktas pasibaigus inkubacijos laikotarpiui, kad gydytojas, turintis didžiausią tikslumą, galėtų nustatyti kūno liga, esanti organizme. Priešingu atveju, nustatytas gydymas neduos norimo gydomojo poveikio ir netgi padidins vyraujančią klinikinę nuotrauką.

A hepatito diagnostika

Paprastai hepatito A diagnozė prasideda nuo išsamaus paciento apklausos ir kelių testų, kuriuos reikia atlikti kuo greičiau, paskyrimas. Tai yra:

• biocheminis kraujo tyrimas;
• pilnas kraujo kiekis;
• PCR metodas;
• ELISA;
• koagulograma.

Jei Botkin liga progresuoja, po biocheminių kraujo analizės rezultatų stebimas nenormalus bilirubino, AlAT ir AsAT šuolis. Be to, gaminami specifiniai anti-HAV IgM, kurie yra neabejotinas hepatito A buvimas.
Apskritai kraujo analizę lemia leukocitų nuosmukis, šuolis ESR ir limfocitozė. Vis dėlto patikimiausias yra PCR metodas, kuris lemia patogeninio viruso RNR rodiklį.
Be to, gydytojas tiria ligos simptomus, po to gali atlikti galutinę diagnozę ir išspręsti veiksmingiausią gydymą. Instrumentinių egzaminų poreikis yra labai retas. Po sėkmingo konservatyvaus gydymo paciento hospitalizavimo ir karantino sąlygomis, galutinis atsigavimas laukia, o A hepatitas dar kartą nepasikartoja.

B hepatito diagnostika

Norint nustatyti hepatito B viruso buvimą, taip pat galima pagal laboratorinių tyrimų rezultatus, todėl pirmas dalykas yra būtinas kraujui paaukoti hepatitu. Dėl patogeninio viruso yra trys pagrindiniai antigenai - HBsAg, HBcAg ir HBeAg, kuriems organizme gaminami antikūnai. Pagrindinis šio klinikinio vaizdo bruožas yra ELISA - ELISA, kuri tik atskleidžia specifinius hepatito B žymenis.
Nedelsiant reikia paaiškinti, kad antigenas HBsAg pasireiškia kraujyje net prieš pirmuosius hepatito simptomus ir yra patikimai nustatomas lediniu laikotarpiu. Tačiau neigiamas testas neatmeta hepatito B buvimo, todėl reikia naudoti vienodai veiksmingą polimerazės grandinės reakcijos (PCR) metodą.
Jei įtariate, kad B hepatitas yra privalomas, tai yra biocheminis kraujo tyrimas, kurį rekomenduojama atlikti pirmoje vietoje. Atskirai aptariamas kepenų biopsijos ir peritoninių organų ultragarso tyrimas, tačiau kai ligos istorija yra labai aiški, klinikinio tyrimo metodų nereikia.

Kepenų echograma autoimuniniame hepatitu lėtinio hepatito stadijoje

C hepatito diagnozė

Siekiant diagnozuoti, nepakanka kraujo paaukoti hepatitui, nes virusas gali dominuoti kūno pavidalu. Nepaisant to, pagrindiniai laboratoriniai tyrimai yra visos pateiktos analizės, taip pat papildomos kepenų biopsijos charakteristikos. Šis mikroskopinis biologinės medžiagos tyrimas (mūsų atveju - kepenų audinio gabalas) lemia patologinio proceso ir audinių fibrozės mastą. Medžiagos mėginių ėmimas atliekamas pagal vietinį anestetiką, tokios procedūros komplikacijos yra labai retos medicinos praktikoje.
Jei įtariamas hepatitas C, pagrindinis klinikinio tyrimo metodas yra peritoninių organų ultragarsas. Priežastis yra paprasta: liga dažnai pasireiškia regimojo paveiktų kepenų pokyčiais, jo struktūros ir dydžio pokyčiais. Tokiu būdu galite nustatyti:

• kepenų, blužnies, kasos ir tulžies pūslės dydis;
• patologiniai šių organų pokyčiai;
• bendras kraujo tekėjimas peritoniniuose organuose;
• optimali vieta kepenų biopsijai atlikti.

Šis klinikinio tyrimo metodas nustato visas organo židinio patologijas mikroskopiniame lygmenyje. Jei kepenys yra vaizduojami pilkoje skalėje, reikalinga skubi biopsija, nes pilka spalva vaizduoja paveiktus „žmogaus filtro“ audinius.

Hepatito prevencija

Kadangi liga savaime nepasireiškia, toli gražu ne visi klinikiniai paveikslai, kurie nedelsiant gydomi. Pacientas gali tiesiog nežino apie patogeninio viruso buvimą organizme, kuris savo ruožtu sparčiai plinta į kraują ir užkrečia sveikus kepenų ląsteles.
Siekiant išvengti tokio tragiško likimo, rekomenduojama laikytis visų prevencinių priemonių. Toks budrumas gerokai sumažins sergamumo riziką ir išgelbės jus nuo rimtų sveikatos problemų ateityje. Toliau pateikiamos pagrindinės prevencijos taisyklės:

• nusiplaukite rankas po gatvės;
• aukštos kokybės šviežių daržovių ir vaisių perdirbimui;
• atlikti visus prevencinius skiepus, nurodytus metiniame kalendoriniame plane;
• selektyvus požiūris į seksualinius partnerius;
• išvengti kontakto su sergančiais žmonėmis;
• naudoti tik vienkartinius švirkštus ir būkite ypač budrūs kraujo perpylimo stotyse.

Taip pat rekomenduojama reguliariai (kartą per šešis mėnesius) paaukoti kraują hepatitui, kad įsitikintumėte, jog virusas neprasiskverbia į organizmą ir nepažeidžia sveikų kepenų ląstelių. Jei diagnozė nustatoma, būtina nedelsiant tapti gydytojo paskyra ir laikytis visų specialisto rekomendacijų.

Leidinio autorius:
Syropyatov Sergejus Nikolajevas
Išsilavinimas: Rostovo valstybinis medicinos universitetas (Rostovo valstybinis medicinos universitetas), Gastroenterologijos ir endoskopijos katedra.
Gastroenterologas
Medicinos mokslų daktaras