C hepatitas yra kepenų ląstelių uždegimas, atsirandantis dėl infekcijos HCV viruso (hepatito C), kontaktuojant su infekuoto asmens krauju. Flaviviruso HCV genetinį kodą vykdo viruso struktūroje esanti RNR (ribonukleno rūgštis) molekulė. Šis gyvybei pavojingas reiškinys pasižymi slaptumu pradiniame patologijos etape. Laikotarpis tarp infekcijos ir simptomų atsiradimo (imuninės sistemos atsakas) gali būti nuo vieno mėnesio iki šešių mėnesių. Paprastai liga yra lėtinė ir sunkiai išgydoma.
Šiuolaikinė medicina leidžia diagnozuoti patologiją su nedideliu kepenų pažeidimu. Dažniausiai pasitaikantys ir efektyviausi diagnostikos metodai apima PGR analizę. Šiame straipsnyje apsvarstykite, kas tai yra ir kokie yra.
Kas yra tyrimas
C hepatito PCR analizė yra laboratorinis tyrimas, nustatantis flavirusą, genetinę ribonukleleninės rūgšties medžiagą (RNR). Jis nustato RNR molekulių kiekį kraujyje, biologinės medžiagos kokybę, HCV viruso genetinį tipą.
C hepatito PCR metodas leidžia nustatyti minimalų kiekį flaviro, prieš formuojant antikūnus, paprastai po infekcijos.
Tyrimas dažnai vadinamas RNR analize, kadangi jis aptinka 30-60 nm ribonukleino rūgšties daleles, esančias flavaviruso.
Tyrimas atliekamas taip: esant tuščiam skrandžiui, pacientas kraujagysles iš kraujo, kuris tada išbandomas įvairiais būdais:
- Realaus laiko PCR atliekamas uždarame automatiškai ir turi mažesnę RNR viruso aptikimo ribą, lygią 15 TV / ml;
- COBAS AMPLICOR, kurio jautrumas yra 50-100 TV / ml.
Kuo didesnė diagnostinės technikos jautrumo riba, tuo didesnė tikimybė rasti mažiausią viruso kiekį tiriamoje biologinėje medžiagoje.
Kokios analizės rūšys naudojamos
Analizė, sėkmingai panaudota kelis dešimtmečius, vadinama PGR hepatitu, ir ją galima lengvai ir greitai nustatyti. Medicinoje yra du reakcijos būdai, kurie iš esmės skiriasi vienas nuo kito:
- kokybinis metodas atskleidžia konkretaus viruso genetinio šaltinio buvimą biologinėje medžiagoje;
- kiekybinė analizė matuoja genetinės medžiagos skaičių, kuris leidžia nustatyti patologijos stadiją arba įvertinti terapinio kurso efektyvumą;
- genotipų nustatymas lemia organizme esančio viruso tipą.
Apskritai kraujo tyrimas padeda nustatyti viremijos pobūdį ir patogeno genetinį tipą. Paprastai moksliniai tyrimai atliekami 1 kartą, priklausomai nuo diagnostinės sistemos jautrumo laipsnio. Jei reikia, pakartotinis bandymas atliekamas naudojant ultragarsinį reagentą.
Aukštos kokybės PGR
Kas yra aukštos kokybės PCR RNR C hepatitui? Reakcijos esmė yra hepatito RNR sekos buvimas, ir reakcija yra įmanoma tik tuo atveju, jei ELISA tyrime dalyvauja panašūs etimologiniai virusai. Palyginimo metu aptinkama apkrova ir galimas kepenų srities pažeidimas.
Šio metodo išskirtinis bruožas yra gebėjimas aptikti net atskiro geno buvimą.
Pažymėtina, kad gavęs PCR ir ELISA tyrimų rezultatus, pacientui reikia tinkamo gydymo, neatsižvelgiant į tai, kas buvo galutinis imunologinis tyrimas. Teigiamas rodo infekciją, o PCR neigiamas rodo sumažintą virusinių dalelių skaičių, palyginti su jautrumo lygiu.
Yra keletas sąlygų, turinčių įtakos neigiamo PGR ir ELISA gamybai:
- tinkamų medžiagų surinkimo sąlygų nebuvimas;
- gauta analizė turi užterštumą;
- jei pacientui anksčiau skiriama heparino.
Pacientui nereikia laikytis tam tikrų kraujo mėginių ėmimo taisyklių PCR analizei, šiuo atveju šios analizės kokybė priklauso nuo gydytojo, atliekančio procedūrą. Gebėjimas nustatyti ligos buvimą (ypač ūmaus pavidalo) pasireiškia per kelias savaites po infekcijos.
Kiekybinė analizė
Prieš nustatant tolesnį gydymą ir kūno reakciją, rekomenduojama nustatyti kiekybinį tyrimą viruso kiekiui nustatyti. Kraujo mėginių ėmimo procesas atliekamas panašiai, kaip ir aukštos kokybės PCR ir ELISA, vienintelė sąlyga yra galimybė pacientui rūkyti prieš procedūrą.
Atsižvelgiant į duomenis, gautus atlikus duomenų tyrimą, padidėjusią apkrovą apibūdina rodikliai nuo 800000 TV / ml, mažas - 400000 TV / ml. Viruso buvimas paciento organizme yra nustatytas pagal PGR hepatito atveju, tai nėra neigiamas kokybinis tyrimas.
Toks tyrimas leidžia nustatyti, kaip pavojingas pacientas aplink jį gyvenantiems žmonėms. Pavyzdžiui, aukšto lygio nustatymas rodo padidėjusį paciento užkrečiamumą. Be to, analizės rezultatai padeda formuluoti tolesnį efektyviausią gydymą ir nustatyti, kiek esama terapija yra veiksminga.
Greitas neigiamas testų atsakas rodo pasirinktos technikos sėkmę, o lėtas - tai koregavimo poreikis ir daugiafunkcinis naudojimas.
Analizės procedūros vykdymo procesas priklauso nuo konkrečios ligos eigos dienos. Pirmasis nustatymas atliekamas pirmą dieną po to, kai pacientas įleidžiamas į ligoninę, tada procedūra kartojama 4, 12 ir 24 savaitėmis po vaistų vartojimo.
Taigi kiekybinė analizė rodo, kuris gydymas yra efektyviausias, turimos terapijos trukmė ir paciento pavojus kitų žmonių atžvilgiu.
Genotipavimas
Atliekant materialinės analizės tyrimą svarbu nustatyti viruso genotipo, kuris vyksta, tikslumą. Šiuo metu yra 11 hepatito C viruso veislių, kurios savo ruožtu apima tam tikras porūšius.
Visos šios rūšys skirtingai reaguoja į skirtingus gydymo būdus, o atskiros veislės yra atsparios daugeliui vaistų.
Genotipas leidžia nustatyti ir parodyti kepenų būklę. Nėra neįprasta, kad rezultatuose rezultatai nėra „įvedami“, o tai reiškia, kad paciento kraujyje esantis virusas šioje bandymo sistemoje nenustatytas. Tai galima nustatyti, jei tam tikras genotipas neatitinka šios zonos. Tokioje situacijoje analizė atliekama pakartotinai, o medžiaga tiriama jautresne sistema.
Itin jautrus metodas
Ypatingais atvejais ultragarsinis metodas yra būtinas, kai hepatito diagnozė negali būti atliekama kitais būdais, tuo pačiu metu, kai analizė turi būti atlikta gydytojo sprendimu:
- jei įtariate hepatito C viruso buvimą pacientams, kuriems yra paslėpta ligos įvairovė;
- antikūnų prieš hepatito C virusą buvimas, nepatvirtintas PCR diagnostika;
- siekiant nustatyti pasirinkto gydymo metodo veiksmingumo kokybę ir patvirtinti ligos pašalinimą.
Šio metodo jautrumas yra daug didesnis nei paprastai naudojamas, tačiau šis metodas neužkerta kelio gauti klaidingus, tiek teigiamus, tiek neigiamus rezultatus. Tokioje situacijoje svarbu kontroliuoti procedūros kokybę ir galimybę užteršti medžiagą.
PGR analizės paaiškinimas
Analizės dekodavimas atliekamas remiantis pateiktomis medžiagomis, o laboratorinių tyrimų rezultatai apima tam tikrus aukščiau aprašytus duomenis.
Transkripte gali būti teigiama PCR polimerazės grandinės reakcija ir neigiamas ELISA tyrimas, o tai reiškia, kad pacientas neturi hepatito C požymių kraujyje, bet praeityje jis perveda ūminę ligos formą. Paprastai diagnozuojant specialistai naudojasi PCR testo rodikliais.
Apibendrinant visa tai, galima daryti išvadą, kad analizės metu svarbu laikytis visų taisyklių ir rekomendacijų, kad gauti rezultatai būtų kiek įmanoma tikslesni, ir remiantis gautais duomenimis galima nustatyti naudojamo gydymo efektyvumą ir tolesnę visiško atsigavimo galimybę.
C hepatito kokybinė analizė
2017 m. Kovo 8 d., 12:29 Ekspertų straipsniai: Nova Vladislavovna Izvchikova 0 10 547
Kokybinė polimerazės grandinės reakcijos - hepatito C PGR analizė lemia HCV buvimą arba nebuvimą organizme. Laboratorinėmis sąlygomis tiriama RNR struktūra, kuri apims virusą. Jei aptinkamas virusas C, būtina atlikti gydymo kursą, nes apleista kepenų būklė sukels rimtų pasekmių. Aukštos kokybės PCR atliekamas po regeneravimo, kad būtų patvirtintas antikūnų nebuvimas. Paskirti ir atlikti įprastiniai patikrinimai. Su maža sukėlėjo koncentracija kraujyje, PCR (kokybinė) gali nieko nerasti, nes diagnostikos sistema turi savo jautrumo ribas. Pradinės ligos stadijos arba lengvos formos atveju, ultravioletinė diagnostika atlieka PCR itin jautrioje įrangoje.
Kas yra RNR virusas?
C hepatito viruso (arba hepatito C viruso RNR) terminas yra pati kepenų liga. Virusas C prisijungia prie sveikos kūno ląstelės įsiskverbdamas viduje. Laikui bėgant, išplitęs visas kūnas, būtina tik patekti į kraują. Dėl to patogenas prasiskverbia į kepenis, saugo savo ląsteles ir veikia sunkiai. Kepenų ląstelės (hepatocitai) veikia jos įtakoje, vyksta pokyčiai, ir nuo to jie miršta. Kuo ilgiau virusas yra kepenyse, tuo didesnis ląstelių skaičius. Laikui bėgant išsivysto pavojingos ligos, sukeliančios piktybinį degeneraciją ir mirtį.
Kepenų infekcija su šio tipo virusais gali pasireikšti išoriškai. Daugelį metų ar dešimtmečių užsikrėtęs žmogus jaučiasi visiškai sveikas, ir tik atsitiktinis tyrimas dažniausiai atskleidžia patologiją. Duodant kraują hepatitui, tiriama dalis RNR (ribonukleino rūgšties) grandinės, kuri yra žmogaus geno (DNR) dalis. Laboratorinių tyrimų rezultatai neturėtų būti naudojami savarankiškam apdorojimui, nes tai tik rodiklis. Tikslesnį vaizdą ir tolesnę diagnozę geriau nustato gydytojas.
Kai baigsite: tyrimų nuorodos
Patvirtinus HCV, atliekama PCR analizė (polimerazės grandininė reakcija). PCR tyrimai padeda rasti priežastinį vaistą RNR struktūroje ir paskirti veiksmingą gydymą. Paskirtas šiais atvejais:
- kepenų uždegimo požymių nustatymas;
- atrankos tyrimai prevencijai;
- kontaktų asmenų tyrimas;
- mišrios kilmės hepatito diagnostika (pagrindinio patogeno nustatymas);
- nustatyti viruso reprodukcijos aktyvumo lygį lėtine forma;
- kepenų cirozė;
- nustatyti nustatyto gydymo veiksmingumą.
Yra kokybinė ir kiekybinė PGR analizė. Kiekybinis PCR rodo RNR procentą su viruso nešikliais kraujyje, o kokybinis rodo viruso buvimą arba nebuvimą. Teigiamam kokybės rodikliui (C hepatito RNR buvimui) taip pat reikia atlikti kiekybinius tyrimus. Didelė hepatito C sukėlėjo koncentracija yra susijusi su jos perdavimo rizika, ty kitų infekcija. Mažas skaičius yra geriau gydomas. RNR virusų kiekis kraujyje nėra susijęs su ligos intensyvumu. PCR analizė taip pat atliekama gydant interferoną, siekiant nustatyti gydymo kurso trukmę ir sudėtingumą.
Aukštos kokybės hepatito C PCR analizės savybės
Visiems pacientams, sergantiems hepatito C antikūnais savo kraujyje, skiriama kokybinė analizė su polimerazės grandinės reakcijos rodikliu. Rekomenduojama atlikti hepatito B tyrimą, tada, jei yra teigiamas rezultatas, ir D hepatito atveju. Kokybiškai ištirtą reakciją reikia atlikti kartu su kitais kraujo tyrimais. Analizės parodys pilną virusų plitimo vaizdą.
Remiantis bandymų rezultatais, tik teigiamas hepatito C testas bus matomas arba neigiamas, ty viruso buvimas ar nebuvimas. Jei išėjimas yra „aptiktas“, virusas yra ir yra aktyvus. Pavadinimas „nenustatytas“ reiškia viruso nebuvimą arba jo nedidelį kiekį. Turint omenyje šį rodiklį, reikia nepamiršti, kad diagnostinių sistemų analitinis jautrumas yra skirtingas ir kad RNR hepatitas C vis dar gali būti kraujyje, tačiau jo neatsiranda analizėje.
Ypač jautrus PCR metodas atskleidžia itin hepatitą C net ir nedideliais kiekiais. Naudojamas fluorescencijos hibridizacijos tyrimas, kuris yra daug kartų didesnis nei standartinių PGR sistemų. Metodas naudojamas keliais atvejais:
- įtariamos paslėptos hepatito C formos;
- PCR diagnostika nepatvirtino patogeno, tačiau yra antikūnų;
- išieškojimo atveju;
- nustatyti ankstyvą infekciją.
Dekodavimo analizė
HCV PCR dekodavimas daro įtaką galutiniam sprendimui diagnozuojant, ypač ultrametodo metodu. Pagrindinis šio tyrimo trūkumas yra griežtas mėginio ir medžiagų sterilių sąlygų laikymasis. Nedidelis nukrypimas kartais rodo netikslias analitines išvadas, apsunkina diagnozę ir vėlesnį gydymą. PCR analizė hepatito RNR nustatymui ne visada užtikrintai rodo ligos vaizdą, kartais leidžiama netikslumų ir abiem kryptimis.
Diagnozuojant hepatito virusą, rekomenduojama atlikti išsamų tyrimą.
Rodiklių norma
Analizuojant polimerazės grandininę reakciją, laikoma, kad tyrimo rezultatuose nėra JgM antikūnų virusiniam hepatitui C. Tuo pačiu metu serologinės analizės rezultatai rodo, kad yra antikūnų prieš virusą C, ir tai taip pat yra normali. Kokybinis apibrėžimas neparodo ligos intensyvumo, jis atskleidžia tik C hepatito priežastį RNR. Ši analizė kartojama po gydymo, kad būtų patvirtintas faktinis regeneravimas.
Nukrypimai
Jei yra JGM antikūnų prieš HCV RNR, tai rodo besivystančią infekciją. Liga tuo pačiu metu vyksta akutingai arba chroniškai, pasireiškianti įvairiais etapais. Jei užfiksuotas antikūnų skaičiaus sumažėjimas, analizė parodys, kad gydymo rezultatai buvo pasiekti atsigavimo metu. Labai retai pasitaiko klaidingų teigiamų diagnostikos duomenų. Jie randami moterims nėštumo metu ir žmonėms, sergantiems kitomis infekcinėmis ligomis.
Hepatito C PGR diagnozė
Ne visi žino, kodėl jie naudoja hepatito C PCR diagnostikos metodą. Viena iš dažniausiai pasitaikančių ligų grupių yra infekcinės virškinimo trakto ligos. Dažniausiai pasireiškia skrandžio (opos), žarnyno (kolito, enterito) ir kepenų (hepatito) atvejai.
Tarp visų išvardytų organų didžiausia našta yra kepenyse. Kūno vaidmuo organizme yra labai svarbus:
- Beveik visos medžiagų apykaitos reakcijos vyksta kepenyse (kur susidaro visos gyvybiškai svarbios sudedamosios dalys, leidžiančios organizmui visiškai veikti).
- Kepenys yra pagrindinis detoksikacijos organas. Pagalba (ypač per tulžį) pašalina daug substratų, kurie gali sukelti apsinuodijimą ir sukelti rimtų pasekmių.
Deja, daugelis žmonių nekontroliuoja savo sveikatos, todėl kepenys kenčia. Dažnai atsiranda įvairių etiologijų (virusinių, toksinių) hepatitas.
Hepatito apibrėžimas
Virusinė hepatitas užima svarbią vietą tarp kepenų ligų. Ligos eigos sunkumas, gydymo sudėtingumas kelia juos į pirmąją vietą tarp to paties organo patologijos.
Visas hepatitas yra suskirstytas į ūminį ir lėtinį. A ir B hepatitas yra klasifikuojami kaip ūminiai, o iš lėtinio hepatito C pasireiškia pirmiausia.
Šią ligą sukelia hepatito C virusas, kuris būdingas tam, kad liga gali trukti ilgą laiką be jokių klinikinių požymių.
Jis perduodamas daugiausia per kraują. Kraujo srautas, virusas patenka į kepenis, kur jis pradeda daugintis savo ląstelėse. Dėl viriono susikaupimo atsiranda užkrėsto hepatocito naikinimas. Atsakant į tai, pradeda gaminti antikūnus, kurie pradeda pulti hepatocitų liekanas. Dėl to laikui bėgant išsivysto kepenų ląstelių baseinas, kuris sunkina ligos eigą.
Atsižvelgiant į tai, kad liga yra lengva, besimptomis ar besimptomis, o klinikiniai požymiai atsiranda tik tada, kai ląstelės yra labai paveiktos, ši liga reikalauja sukurti diagnostinius metodus, kad būtų galima nustatyti jo buvimą ir imtis atitinkamų priemonių.
C hepatito diagnostika: kokybinės ir kiekybinės analizės
Šiuo metu hepatito C diagnozei naudojami tokie metodai kaip kepenų biopsija ir imunograma.
Jie leidžia tiesiogiai nustatyti užsikrėtusių hepatocitų (kepenų biopsijos) arba specifinių antikūnų nuo pažeistų ląstelių (imunogramos) buvimą. Tačiau yra metodas, leidžiantis patikimai nustatyti pačios viruso buvimą. Tai yra PCR - polimerazės grandinės reakcija.
Šio metodo esmė yra ta, kad tam tikromis sąlygomis vyksta RNR grandinių gamyba. Taip yra dėl to, kad atitinkamame kraujyje arba biopsijoje yra virusinės dalelės fragmentų. Jungiant juos su kai kuriomis terpėje esančiomis molekulėmis, atsiranda grandinių, papildančių virusinę RNR, sintezė. Vėliau analizuojant ir lyginant su žinoma hepatito C viruso nukleotidų seka, galima nustatyti, ar virusas yra organizme ir ar yra kepenų pažeidimas.
PCR atliekamas nustatant specifinius antikūnus prieš hepatito virusą kraujyje. Atlikus bandymą, rezultatas - RNR yra „aptiktas“ arba „nenustatytas“. Kartais jis gali pasakyti „nepakankamą medžiagą“ - šiuo atveju būtina pakartotinai atlikti hepatito C tyrimą.
Jei virusinių dalelių skaičius yra mažesnis už reikalaujamą minimalų kiekį, tuomet galime pasakyti, kad nėra hepatito, ir minimalus genetinės medžiagos kiekis gali būti „painiojamas“ dėl genetinės medžiagos arba kai kurių nukleotidų sekų, kurios galėtų sutapti su virusu, imitacijos.
- Naudojant PCR, galima pastebėti neigiamą rezultatą, kai kraujyje iš tiesų yra virusų dalelių, tačiau jos yra tokios mažos (neseniai įvyko infekcija arba prieš tai buvo atliktas ilgalaikis ir intensyvus antivirusinis gydymas), kad bandymo sistema paprastai negalėjo nustatyti jų koncentracijos. RNR - "nėra aptikta".
- Jei PCR turi teigiamą rezultatą, kraujyje yra tiek daug virusų dalelių, kad jų skaičius viršija mažesnę jautrumo bandymo sistemos ribą. Šiuo atveju yra didelė infekcinio proceso vystymosi rizika (arba ji jau yra gana pažengusiame etape). Paprastai didelis viruso kiekis jau yra indikacija gydymui ir vėlesniam kepenų transplantacijai.
Kartais bandymas gali tapti klaidingu teigiamu arba klaidingu.
Jei kai kurie komponentai yra reakcijos terpėje, slopinančioje virusinės dalelės kopijų susidarymą, pastebimas klaidingas hepatito PGR rezultatas. Dėl šios priežasties neįmanoma gauti tikro kraujo būklės, kuri prisideda prie viruso praėjimo ir ligos progresavimo. Heparino buvimas kraujyje taip pat gali paveikti reakciją (mažinant santykinę kraujo klampą). Netinkamas analizės aiškinimas galimas net tada, kai nesilaikoma tiriamosios medžiagos transportavimo ir saugojimo sąlygų.
Nustačius hepatitą C, PCR dažniausiai pasitaiko klaidingų teigiamų rezultatų, kai vamzdis arba darbo aplinka yra užterštos. Be to, teigiamų rezultatų galima pastebėti, kai yra kitų grupių hepatito virusų (dėl kryžminės reakcijos).
Kokybinė PCR analizė hepatito C nustatymui
Daugelio krioglobulinų kiekis kraujyje taip pat tiesiogiai veikia PCR atlikimą. Dėl šios priežasties būtina prieš nustatant C hepatitą nustatyti jų koncentraciją kraujyje, kad būtų galima iš anksto nustatyti rezultato iškraipymą ir išvengti jo.
Po šių tyrimų paaiškėja, ar kraujyje yra virusinių dalelių. Nustatant juos, rekomenduojama nedelsiant pradėti antivirusinį gydymą, siekiant lėtinti proceso progresavimą. Skirtingai nuo hepatito B, nėra visiško C hepatito gydymo; liga eina tik į latentinę stadiją ir pradeda lėtai. Kepenų pažeidimas yra neišvengiamas. Paskutiniame proceso etape, kai kepenys nebegali susidoroti su savo funkcija, gali prireikti jo persodinimo.
Gydymas atliekamas daugiausia dviem vaistais - interferonu ir ribavirinu.
Įrodyta jų veiksmingumas lėtinant hepatocitų pralaimėjimo procesą. Pakeliui, infuzijos terapija būtinai skiriama kepenų darbui palengvinti.
Visi pacientai, pastebėję padidėjusį virusinių dalelių kiekį kraujyje, būtinai registruojami hepatologe. Keletą kartų per metus jiems rekomenduojama atlikti prevencinį tyrimą, kad būtų galima nustatyti proceso eigą ir laiku nustatyti transplantacijos indikacijas. Be to, galima naudoti hepatoprotektorius, nors gydytojų nuomonės šiek tiek skiriasi. Kai kurie mano, kad šie vaistai leidžia sustabdyti procesą ir apsaugoti vis dar nepaveiktus hepatocitus; kiti yra įsitikinę, kad nėra prasmės juos vartoti, ir reikia atlikti intensyvų antivirusinį gydymą.
Taigi, hepatitas C priklauso ligų kategorijai, kurios nustatymas kelia tam tikrų sunkumų. Diagnostikos metodų tobulinimas, taip pat laiku atliekami prevenciniai tyrimai sumažins šios ligos paplitimą. Taip pat svarbu užkirsti kelią šios ligos prevencijai. Reikia atidžiai vengti kontakto su krauju, atsisakyti vartoti narkotikus, tik tada ši liga bus išnaikinta. Pagrindinis prevencijos ir gydymo dalykas yra sąmoningas paciento požiūris į jų sveikatą.
Atlikti hepatito C PCR analizę ir rezultatus dekoduoti
C hepatito PCR analizė yra tyrimas, kurio pagrindinis tikslas yra nustatyti sukėlėjo genetinę medžiagą. Analizė atskleidžia ligos sukėlėją naudojant polimerazės grandinės reakciją. Ši diagnozė turi didelį tikslumą, specifiškumą, kad būtų galima nustatyti virusinės infekcijos nebuvimą ar buvimą.
Diagnozės esmė
Siekiant atlikti paciento hepatito C viruso nustatymo PCR analizę, imamas veninis kraujas, kuriame gali būti norimo viruso RNR (ribonukleino rūgštis) HCV.
Hepatito C PCR tyrimas reiškia, kad paciento kraujo dalelėms pridėti:
- pradmenis (trumpi dirbtinai sintezuoti reikiamo geno regionai);
- specialų fermentą (RNR polimerazę).
Po mėginių ėmimo biologinė medžiaga siunčiama moksliniams tyrimams laboratorijoje. Tiesioginei PCR analizei reikalinga viena kraujo porcija, antroji - testavimui ELISA. Fermentas per trumpą laiką gali padidinti patogeno viruso genetinės medžiagos skaičių. Specialiame aparate atliekami keli šilumos ir vėsinimo procesų ciklai. Baigiamajame etape gauta medžiaga lyginama su viruso genais ir daroma išvada apie patologijos buvimą arba nebuvimą paciento organizme.
PCR analizės esmė ir atlikimas laboratorijoje. Filmuoja SibiroMedicinosLaboratorija.
Tyrimų rūšys
Yra 3 diagnostikos tipai, kurie leidžia nustatyti hepatito C viruso buvimą žmogaus organizme:
- genotipų nustatymas;
- kokybė;
- kiekybinis.
Kokybinis metodas
C hepatito diagnostika kokybiniu metodu taikoma pacientams, kuriems kraujo tyrime nustatomi antikūnai prieš virusą. Esant ūmiai HCV RNR fazei, tokios diagnostinės priemonės gali nustatyti ligos buvimą per 1-2 savaites po infekcijos. Per šį laikotarpį antikūnai prieš hepatitą C dar negali būti sukurti.
Kiekybinis metodas
Nustatant viruso koncentraciją kraujo mėginiuose, naudojamas kiekybinis diagnostikos metodas. Toks viremijos (koncentracijos laipsnio) tyrimas leidžia tiksliai nustatyti virusinės RNR vienetų skaičių. Galutinis rezultatas išreiškiamas atitinkamu tūriu. Jei kalbame apie kiekybinę analizę, rodikliai matuojami 1 ml (1 kub. Cm).
Viruso apkrovos parametras reiškia ligos infekcijos lygį, ty jis atspindi paciento „užkrečiamumo“ laipsnį. Praktiškai tai reiškia, kad kuo didesnė viruso koncentracija kraujyje, tuo didesnė tikimybė, kad pacientas gali užkrėsti kitus hepatitu C. Kiekybinis tyrimo metodas taip pat leidžia nustatyti gydymo kokybę ir veiksmingumą.
Genotipavimas
Genotipas atskleidžia ligos sukėlėjo mutacijas. Prieš skiriant gydymo planą, nustatomas viruso genotipas: nuo jo priklauso gydymo kokybė ir trukmė. Pavyzdžiui, gydant I tipo ligą, veiksmingumas yra 60%, II, III tipo - apie 80%.
Hepatito PCR analizės privalumai
Tarp pagrindinių procedūros privalumų yra:
- Ankstyvos diagnostikos galimybė. PCR analizė gali aptikti viruso buvimą ankstyvosiose infekcijos stadijose.
- Maži klaidų rezultatai. Ištirtas biologinis išteklius leidžia diagnozuoti genetinės medžiagos skyrių, būdingą tik vienos rūšies virusinei infekcijai. Ši aplinkybė leidžia išvengti klaidingų diagnostikos rezultatų.
- Didelis jautrumo laipsnis. PCR analizė gali aptikti viruso RNR mažais kiekiais, o tai taip pat leidžia stebėti latentines infekcijas laiku.
Nuorodos
Būtina atlikti C hepatito PCR tyrimą, jei toks yra:
- sąlytis su sergančiais žmonėmis, dėl kurių gali kilti infekcija;
- kepenų cirozės simptomai (blužnies padidėjimas, nepakitę kepenų dydžio pokyčiai, venų plexo nustatymas ant pilvo po oda);
- teigiami ELISA rezultatai;
- padidėjęs AST ir ALT aktyvumas (pasireiškia biocheminėje kraujo analizėje);
- poreikį kontroliuoti antivirusinį gydymą;
- pradinis gydymo etapas, kai reikia nustatyti virusinę apkrovą;
- atlikti galutinį gydymo etapą, kad būtų išvengta galimų pasikartojimų;
- pacientas turi hepatitą B, kad būtų išvengta kepenų pažeidimo.
Kaip pasirengti kraujo donorystei PCR tyrimams
Pasirengimas PCR analizei apima šias rekomendacijas:
- ryte vartojamas kraujas;
- analizė atliekama tuščiu skrandžiu, todėl patartina pertrauka tarp paskutinio suvartojamo maisto kiekio 8-10 valandų;
- prieš kelias dienas iki diagnozės reikėtų pašalinti riebalų, aštrų ir keptą maistą, alkoholinius gėrimus ir rūkymą;
- vieną dieną prieš analizę reikėtų susilaikyti nuo sunkios fizinės jėgos, klasių neįtraukti į sporto salę ar baseiną.
Analizės rezultatai: normos ir nukrypimai
Pati analizė nėra ilgalaikė, o aukštos kvalifikacijos specialistas hepatologas arba infekcinių ligų specialistas iššifruoja C hepatito PCR rezultatus. Remiantis analizės rezultatais, pacientas diagnozuojamas.
Siekiant teisingai ištirti tyrimo rezultatus, jie atsižvelgia į rodiklius:
- biocheminė kraujo analizė;
- ultragarsiniai duomenys;
- biopsijos rezultatai.
Kiekybinės analizės aiškinimas
Gavus PCR kiekybinės analizės rezultatus, atsižvelgiama į šiuos rodiklius:
PCR metodas hepatito C nustatymui
PCR yra polimerazės grandininė reakcija, naudojama nustatyti hepatito C buvimą serume, o rezultatas gali būti teigiamas ir neigiamas.
PCR metodo privalumai
Šis diagnostikos metodas turi šiuos privalumus:
- PCR metodas leidžia nustatyti šiuos rezultatus:
- RNR viruso buvimas;
- radiacijos laipsnis;
- originali genetinė informacija;
- genetinių duomenų unikalumas ir unikalumas.
- Galite naudoti bet kokią būtiną klinikinę medžiagą:
- kraujas;
- plazma;
- šlapimas;
- kūno skysčiai ir išmatos;
- skreplių ir kt.
- Skirtingai nuo kitų mėginių, galite nustatyti daugiau nei vieno mikroorganizmo kraują vienu metu.
- Rezultatų gavimas per 24 valandas.
- Supaprastinti analizės, patogenų saugojimo ir transportavimo metodai nustatomi net ir negyvoje aplinkoje.
- PCR unikalumas leidžia nustatyti tam tikrus mikroorganizmus, kurių negalima pritaikyti kitiems mėginiams.
- Didelis reagentų jautrumas, bandymas yra pats tiksliausias.
PGR kokybinės analizės savybės
Atliekamas kokybinis tyrimas, siekiant nustatyti viruso buvimą kraujyje ir gauti neigiamą arba teigiamą rezultatą.
Šio tipo diagnozės indikacija yra paciento kūno hepatito C antikūnų nustatymas.
Galimi rezultatai:
- aptikta (teigiama);
- nenustatytas (neigiamas).
Kokybės testas netinka tiems pacientams, kurių kraujyje yra labai mažas virusų kiekis, todėl jis turi tam tikrą jautrumą.
Rezultatas „aptiktas“
Nustatyti, kad hepatito C virusas gali pasireikšti po kelių savaičių po kūno užsikrėtimo, net jei nėra antikūnų prieš šį patogeną. Šis rezultatas rodo, kad RNR fragmentas, būdingas hepatitui, yra organizme ir kraujo grupė.
Pacientas laikomas užkrėstu šiam virusui ir toliau plinta patogeninėse ląstelėse.
Rezultatas „nerastas“
Šis variantas rodo, kad tiriamos biologinės medžiagos mėginyje nėra hepatito C specifinių RNR fragmentų. Tai yra neigiamas rezultatas.
Bandymo jautrumas neatskleidžia mažo RNR fragmentų kiekio, todėl „nežinomas“ rezultatas ne visada yra patikimas.
Rezultatų aiškinimo ypatybės
Pagrindinis rezultatų aiškinimo bruožas yra PGR metodo ribinis jautrumas.
Tai priklauso nuo šių rodiklių:
- tyrimo tikslumas;
- naudojamos įrangos rūšis ir kokybė.
Pažymėtina, kad jautrumas gali svyruoti nuo 10-500 TV / ml. Iš to išplaukia, kad jei tiriamojo paciento organizme yra virusas, kurio koncentracija yra mažesnė nei 10 TV / ml, bandyme bus parodytas rezultatas „nenustatytas“. Tačiau tai nereiškia, kad patogenas visiškai nėra.
Diagnostikos sistemų variantai
Šiuo metu diagnostikos sistemoms yra šios parinktys:
- Jei kraujas paimamas iš antivirusinio gydymo paciento, reikia naudoti diagnostikos sistemas, kurių jautrumas yra ne mažesnis kaip 50 TV / ml. Šiam tikslui naudojami šie analizatoriai:
- Cobas Ampicolor HCV testas;
- RealBest HCV RNR.
- Siekiant galutinai nustatyti „hepatito C“ diagnozę, būtina nustatyti RNR virusą trimis skirtingais biologinių medžiagų mėginiais. Šias rekomendacijas parengė Pasaulio sveikatos organizacija. Jei rezultatas yra tris kartus neigiamas, diagnozė nepatvirtinama.
- Šiuo metu, be PCR metodo, yra tikslesnis testas, vadinamas TMA (transkripcijos amplifikacijos metodas). Jo jautrumo slenkstis yra daug didesnis nei kituose diagnozavimo metoduose.
Nustatytų virusų pakeitimų diapazonas
Šiame genetikos raidos etape žinomi keli viruso modifikacijos tipai ir variantai.
Laboratorinė diagnostika mūsų šalyje su absoliučiu tikslumu gali nustatyti šiuos genotipus:
PCR kiekybinės analizės savybės
Kiekybinė analizė yra hepatito C viruso apibrėžimas žmogaus organizme. Tyrimo metu RNR ir viruso apkrova pradinėje medžiagoje nustatoma pagal PGR. Priešingu atveju galime pasakyti, kad testas leidžia nustatyti, kiek virusinių ląstelių yra biologiniame skystyje. Šio tipo tyrimams naudojamas tik veninis kraujas. Specifinio bandymo preparato nėra.
Kiekybinė analizė leidžia stebėti jau pradėtą gydymo etapą ir įvertinti jo veiksmingumą. Vertinimui atlikti atliekami bandymų duomenys prieš terapinę intervenciją ir jos metu. Remiantis gautais rezultatais galima numatyti ligos eigą.
Pasirinkusio gydymo metodo sėkmę po 3 mėnesių, RNR kiekis turėtų sumažėti kelis kartus. Pagal rekomendacijas kiekybinė analizė atliekama po vieno, po to po trijų ir šešių mėnesių. Paskutinis gydymo rezultatas turėtų būti neigiamas.
Kiekybinio PCR tyrimo rezultatų vertinimas
Mūsų šalyje yra du galimi kiekybinio PGR tyrimo rezultatų įvertinimo variantai:
- kopijų skaičius mililitre biologinio skysčio;
- tarptautinių vienetų skaičius mililitre.
Norėdami gauti tarptautinius vienetus, kopijų skaičius padalintas iš 4.
- didelis, kai PCR yra didesnis kaip 800 000 TV / ml;
- mažas, kai PCR yra mažesnis nei 400 000 TV / ml.
Kiekybinio tyrimo rezultatas suteikia 2 parinktis:
- "Žemiau matavimo diapazono";
- "Nenustatyta" (neigiama).
Įvertinimas: „žemiau matavimo diapazono“
Tokia išvada daroma tada, kai kiekybinis RNR tyrimas nepavyko nustatyti C hepatito sukėlėjo ląstelių šaltinio medžiagoje, tačiau virusas vis dar yra kraujyje. Analizės patikimumą patvirtina kokybinis metodas, nes kiekybinio bandymo jautrumo riba negali nustatyti mažų patogeno verčių ir koncentracijų.
Įvertinimas: "nepastebėta"
Tokia išvada padaryta tada, kai diagnozės metu nebuvo aptikta hepatito C RNR virusų.
Kiekybinio PCR tyrimo analizės rezultatų aiškinimas
Naudojant virusinės apkrovos indikatorių nustatykite:
- ligos aplaidumo laipsnis;
- kaip infekcinis pacientas;
- veiksmingumą.
Kuo didesnis hepatito C viruso kiekis organizme, tuo pavojingesnis pacientas yra kitiems žmonėms ir kuo progresyvesnė jo liga.
Hepatito C PCR yra svarbus diagnostinis metodas, ypač gydymo metu. Dėl gautų neigiamų ar teigiamų rezultatų galima įvertinti jų veiksmingumą, visiškai išgydyti pacientą arba sutrumpinti gydymo laiką.
Hepatito C PGR analizė
"Lėtinio virusinio hepatito C (CVHS)" diagnozavimui reikalingas išsamus asmens tyrimas, apimantis klinikinius, laboratorinius ir instrumentinius tyrimus. Svarbi diagnozės požiūriu teisinga diagnozė yra PCR metodas - polimerazės grandinės reakcija.
Ką rodo ši analizė ir kodėl tai reikalinga?
Šis laboratorinis metodas aptinka hepatito C viruso RNR žmogaus kraujyje. Kartu su imunosorbento tyrimu (ELISA), skirtu antikūnams prieš virusą, PCR naudojamas CVHC ir jo patogeno genotipo diagnozei atlikti. Šis tyrimas yra vienas iš naujausių laboratorinių diagnostikos metodų. Jo patikimumas CVHS viršija 97%, o tai yra labai geras tyrimų rodiklis.
Yra trys PGR kraujo tyrimai, skirti CVHS: kokybinis, kiekybinis ir virusinis genotipas. Pirmasis viruso tyrimas (kokybinė analizė) jį nustato kraujyje, todėl jis naudojamas tik diagnozei.
Antrasis (kiekybinis) tyrimas lemia viruso apkrovos laipsnį organizme, todėl jis naudojamas gydymo veiksmingumui stebėti.
Trečiasis PCR (genotipas) paaiškina diagnozę, nustatantį viruso genotipą, kuris yra labai svarbus skiriant tinkamą antivirusinį gydymą.
Polimerazės grandininės reakcijos metodo esmė yra fermentų, kurie daugina genetinės medžiagos patogeną biomedžiagoje, naudojimas. Tokio replikacijos metu mėgintuvėlis su krauju keletą kartų šildomas ir atšaldomas iki temperatūros, reikalingos pagreitinti fermentinę reakciją. Dėl šių manipuliacijų viruso genomo kiekis daug kartų padidėja, todėl jis gali būti aptinkamas net minimaliu kiekiu.
PCR diagnostika turi daug privalumų, palyginti su kitais laboratoriniais tyrimais:
- didelis jautrumas - 97-98%;
- garantuotas analitinis specifiškumas (tiksliai atskleidžia patogeną, kurį norite rasti, o ne su juo susijusį kamieną);
- atlikimo greitis (išvados priėmimas trunka ne ilgiau kaip 2 dienas).
Trijų tipų PCR tyrimai
Visiems pacientams, kuriems ELISA analizė nustatė HVGS viruso antikūnus, skiriama aukštos kokybės PCR analizė. Atlikus aukštos kokybės PCR, galima gauti dvi atsakymo parinktis: "RNR aptikta" arba "RNR nėra aptikta". Norint nustatyti minimalų viruso kiekį kraujyje, reikalingos bent 50 TV / ml jautrumo bandymo sistemos. Jei viruso koncentracija paciento kraujyje yra mažesnė nei diagnozė, tyrimo rezultatas gali būti klaidingas. Siekiant išvengti tokios diagnostikos klaidos, laboratorijos, atliekančios PGR diagnostiką, turėtų būti aprūpintos labai jautriomis bandymų sistemomis. Pavyzdžiui, laboratorijoje „Invitro“ naudojami 15 TV / ml jautrumo bandymai. Laboratoriniai darbuotojai privalo pateikti informaciją apie testų jautrumą pacientams ir gydytojams po pirmojo prašymo.
PCR kiekybinė analizė lemia viremijos laipsnį, ty patogeno koncentraciją kraujyje, viruso kiekį. Šio tyrimo rezultatas, priešingai nei aukštos kokybės PGR, išreiškiamas skaičiais, pavyzdžiui, 2 × 10 * 6 TV / ml, o tai reiškia, kad 2 milijonai tarptautinių vienetų yra 1 ml kraujo. Kai kurios laboratorijos naudoja kitą rodiklį - kopijų skaičių / ml. Šie du rodikliai yra lengvai konvertuojami: 1 tarptautinis vienetas lygus 4 RNR kopijoms. Taigi, 2 × 10 * 6 TV / ml reiškia, kad 8 × 10 * 6 viruso RNR kopijos 1 ml, t.y. 8 milijonai kopijų 1 ml kraujo.
Genotipavimas yra vieno iš šešių viruso genotipų apibrėžimas. Klinikinis vaizdas, kepenų komplikacijų išsivystymo greitis ir prognozė paciento būsimam gyvenimui priklauso nuo sukėlėjo genotipo. Viruso genotipas yra labai svarbus jau diagnozavimo stadijoje, nes vaistų derinys ir pacientui skirto gydymo kurso trukmė priklauso nuo jo teisingo nustatymo.
Tačiau net ir šis „tarsi tobulas“ laboratorinis tyrimas turi savo trūkumų:
- tyrimas kartoja visų patogenų, net negyvų, genetinę medžiagą, kuri gali iškreipti rezultatą. Todėl, siekiant stebėti efektyvumą naudojant PCR, pakartotinė analizė atliekama ne anksčiau kaip praėjus 2 mėnesiams po ankstesnio, kad negyvi virusai galėtų „palikti“ paciento organizmą;
- dalis virusinės genomo, kuris nustatomas naudojant bandymų sistemas, teoriškai gali būti kitų virusų ar mikroorganizmų, todėl yra klaidingo teigiamo atsako galimybė;
- virusai greitai mutuoja. Kartais viruso mutacijos greitis ir mastas yra toks didelis, kad bandymo sistema nustoja gaudyti genomą. Todėl galimas klaidingas neigiamas rezultatas.
Siekiant ištaisyti šiuos trūkumus, laboratorinių bandymų sistemų, skirtų PCR diagnostikai, gamintojai nuolat atlieka bandymus, įskaitant kryžmines reakcijas ir jautrumą tam tikram viruso genotipui.
Kaip vartoti hepatito C PCR testą?
Kad PCR tyrimas būtų patikimas, būtina griežtai laikytis pasirengimo jo elgesiui taisyklių:
- tyrimas atliekamas tuščiu skrandžiu (gliukozė, riebalai, mineralai, patekę į kraują iš maisto, gali paveikti fermento reakcijos greitį ir kokybę);
- skirtumas tarp paskutinio valgio ir kraujo mėginių analizės turėtų būti ne trumpesnis kaip 8 valandos;
- tyrimo išvakarėse draudžiama vartoti alkoholį ir vartoti riebaus maisto, kurio pašalinimo laikotarpis yra užsitęsęs;
- dieną prieš išvykstant į laboratoriją reikėtų vengti stipraus fizinio ir emocinio streso;
- kol kraujo mėginių ėmimo laikas nėra rekomenduojamas rūkyti.
Siekiant išvengti klaidingų išvadų, tariamas pacientas turi atvykti į laboratoriją šiek tiek anksčiau nei kraujas. Tai užtrunka 15-20 minučių, kad žmogus kvėpuotų, nuramintų. Adrenalinas, kuris po greitos vaikščiojimo yra kraujo, gali turėti įtakos tyrimo rezultatams.
Jei pacientas, kuriam buvo atliktas tyrimas, vartoja vaistus, apie tai turėtų pranešti gydytojui. Gali būti, kad kai kuriuos iš jų reikės atsisakyti tam tikrą laiką (jei įmanoma).
C hepatito PCR analizės rezultatas
Analizės atlikusios laboratorijos gydytojo rezultatų dekodavimas. Dekodavimas yra iš normų gauto rezultato nuokrypio nustatymas. Rodiklių rodiklį tiesiogiai nustato bandymų sistemos gamintojas, kurį laboratorija naudoja diagnostikai. Todėl nenuostabu, kad kai kuriose laboratorijose viruso apkrova nustatoma TV / ml, o kitose - kopijomis / ml.
Priėmus išvadą, būtina ją tinkamai interpretuoti. Tyrimo rezultatus gydyti turi hepatitu C sergančio paciento gydytojas. Tik po objektyvaus, instrumentinio ir laboratorinio paciento tyrimo gydytojas gali gauti pakankamai duomenų, kad būtų galima teisingai suprasti gautus PGR rezultatus.
Kokybinės analizės vertinimas paprastai nesukelia sunkumų net pacientams. Rezultatas gali būti tik vienas: „aptiktas“ arba „nenustatytas“. Šiuo atveju antroji iš jų yra norma.
Kiekybinės analizės rodiklius sunkiau interpretuoti. Tai rodo paciento virusinės apkrovos laipsnį. Net tarp hepatologų nėra sutarimo, kaip gydyti nustatytą viremiją. Dauguma gydytojų yra linkę manyti, kad reikia atsižvelgti į didelę apkrovą, didesnę kaip 8 × 10 * 5 TV / ml. Laikoma, kad apkrova yra didesnė kaip 1 × 10 * 7 TV / ml, o maža apkrova yra mažesnė nei 4 × 10 * 5 TV / ml.
Virusinės apkrovos laipsnis rodo viruso virulentiškumą (agresyvumą): kuo didesnis jo kiekis kraujyje, tuo greičiau gali išsivystyti kepenų komplikacijos. Didelė viruso koncentracija nėščios moters kraujyje padidina tikimybę, kad ji prasiskverbia per hemato-placentinį barjerą vaisiui. Viremija taip pat turi įtakos gydymo veiksmingumui: mažai gydymo veiksmingumas yra didesnis nei didelių.
Norint būti tikriems C hepatito PCR analizės tikslumui, būtina teikti pirmenybę tik toms laboratorijoms, kurios yra gerai įrodytos. Šiuo atveju kainodaros politika neturėtų būti pagrindinis vaidmuo.
C hepatito tyrimas: tipai, indikacijos, transkriptas
Virusinis hepatitas C yra sunki liga, kuri pasireiškia kepenų pažeidimo metu. Aštuoniasdešimt procentų pacientų ji tampa lėtine. Virusas daugina kepenų ląstelėse - hepatocituose - ir sukelia jų mirtį. Mirusius audinius pakeičia jungiamojo audinio židiniai, atsiranda fibrozė.
Vystant fibrozei, kepenys negali atlikti savo funkcijų, prasideda kepenų cirozė, kuri yra pavojinga dėl komplikacijų: padidėjęs spaudimas portalo venos sistemoje, kraujavimas iš virškinimo trakto, sumažėjęs kraujo krešėjimas, psichiniai pokyčiai dėl smegenų branduolių pažeistų nuodingų produktų.
Šios ligos priežastis yra viruso, kurį sukelia Flaviviridae šeima, priklausanti RNR virusų tipui, infekcija. Tai reiškia, kad genetinė medžiaga, kuria sintezuojamas patogeno baltymas, yra koduojamas ribonukleino rūgšties molekulėje. Infekcija vyksta per kraują, lytiniu būdu ir iš nėščios moters į vaisių. Deja, pakankamai ilgas laikas gali praeiti tarp infekcijos ir antikūnų gamybos pradžios - nuo dviejų savaičių iki šešių mėnesių. Tai neleidžia nustatyti infekcijos ELISA metodu ir pradėti gydymą ankstyvoje stadijoje.
Kas yra PCR analizė?
PCR yra molekulinės analizės metodas, leidžiantis aptikti patogeno genetinę medžiagą jau pirmąją savaitę po infekcijos, naudojant polimerazės grandininę reakciją. Tyrimas turi didelį specifiškumą, tikslumą ir leidžia ne tik nustatyti viruso buvimą ar nebuvimą, bet ir jo koncentraciją bei genotipą.
Tyrimui imamas paciento kraujas, kuriame gali būti viruso RNR. Gruntai pridedami prie dirbtinai dirbtinai sintetizuotų mažo ilgio geno regionų, o RNR polimerazė yra specialus fermentas, kuris pakartotinai padidina patogeno genetinės medžiagos kiekį. Naudojant specialų aparatą, atliekami keli šildymo ir aušinimo ciklai. Tada medžiaga analizuojama ir palyginama su žinomais viruso genais, kurių pagrindu daroma išvada apie infekcijos buvimą ar nebuvimą.
C hepatito PCR analizės tipai
Yra trys PGR analizės tipai:
- PGR kokybinė analizė. Pirmasis tyrimo etapas. Tai leidžia nustatyti viruso genetinę medžiagą kraujyje.
PCR kiekybinė analizė. Leidžia nustatyti viruso apkrovą - patogeno genetinės medžiagos koncentraciją viename mililitre kraujo. Šis tyrimas atliekamas prieš pradedant gydymą, o tada pirmojoje, ketvirtoje, dvyliktojoje ir (jei kursas yra ilgas) dvidešimt ketvirtą gydymo savaitę, siekiant įvertinti jo veiksmingumą.
C hepatito PCR analizės indikacijos
PCR tyrimas skiriamas šiais atvejais:
- kontaktas su ligoniu, kuriame gali atsirasti infekcija;
- teigiamas fermento imunologinis tyrimas;
- kepenų cirozės požymiai: kepenų dydžio padidėjimas, išsiplėtusios blužnis, poodinio poodinio poodinio veido atsiradimas ant pilvo;
- kepenų pažeidimo simptomų atsiradimas: skausmas dešinėje pilvo dalyje, odos pageltimas;
- padidėjęs ALT ir AST aktyvumas biocheminėje kraujo analizėje;
- prieš pradedant gydymą nustatyti virusinę apkrovą;
- stebėti antivirusinio gydymo veiksmingumą;
- po gydymo kontroliuoti atkrytį;
- esant diagnozuotam hepatitui B, pašalinti kepenų pakenkimą.
C hepatito PCR tyrimų paaiškinimas
PCR analizės ir hepatito C fermento imunologinio tyrimo dekodavimą turėtų atlikti hepatologas arba infekcinių ligų specialistas. PCR rezultatų analizė yra būtina kartu su kraujo, biopsijos ir ultragarso biocheminės analizės duomenimis. Tik kvalifikuotas gydytojas galės analizuoti tyrimų rezultatus ir, remdamasis jais, paskirti tinkamą gydymą.
Kokybinės analizės dekodavimas.
Analizuojamoje biologinėje medžiagoje randama patogeno genetinė medžiaga. Infekcija patvirtinta.
Infekcija nėra, arba patogeno RNR kiekis yra mažesnis už jautrumo ribą.
Kiekybinės analizės dekodavimas.
Normali norma sveikiems žmonėms. Tai reiškia, kad bandomojoje medžiagoje nėra hepatito C RNR arba jos koncentracija yra mažesnė už tyrimo jautrumo slenkstį.
RNR koncentracija yra mažesnė už kiekybinį intervalą. Šie rezultatai aiškinami labai atsargiai, juos koreliuoja su kitų tyrimų duomenimis, dažnai pakartotinai tiriamais.
Manoma, kad tam tikros koncentracijos viruso kiekis yra mažas. Paprastai viruso kiekio sumažėjimas reiškia, kad gydymas yra sėkmingas.
Daugiau nei 8 * 10 ^ 5 TV / ml
Virusų apkrovos lygis tam tikroje koncentracijoje laikomas aukštu.
Daugiau nei 2,4 * 10 ^ 7 TV / ml
RNR kiekis viršija kiekybinio nustatymo intervalo viršutinę ribą. Negalima daryti išvadų apie viruso apkrovos laipsnį. Paprastai tokiais atvejais bandymas kartojamas su kraujo mėginio praskiedimu.
Genotipų dekodavimas.
Nustatyto konkretaus genotipo RNR
Biomedžiagoje aptiktas tam tikro genotipo hepatito C virusas ir potipis. Rezultatas yra užkoduotas romėniškais skaitmenimis ir lotyniškomis raidėmis, pavyzdžiui - 1a, 2b. Iš viso yra septyni genotipai ir šešiasdešimt septyni potipiai, tačiau Rusijoje yra tik trys pirmieji tipai.
Nustatyta hepatito C viruso RNR
RNR buvo rasta reta genotipo Rusijoje, kurios negalima priskirti pirmajam, antrajam ar trečiajam tipui. Reikia daugiau tyrimų.
Šis rezultatas rodo, kad pacientas yra sveikas arba kad patogeno RNR kiekis yra per mažas.
Gali būti, kad C hepatito PCR analizė yra neigiama, o imunosorbentinis tyrimas, susijęs su fermentu, atpažįsta antikūnus prieš virusą. Tai reiškia, kad pacientas turėjo ūminį hepatitą C ir atsigavo pats. Maždaug dvidešimt infekcijos atvejų sukelia spontanišką atsigavimą, jei paciento organizmas yra pakankamai atsparus infekcijai.
Nors PCR yra labai tikslus, jo rezultatai gali būti iškraipyti šiose situacijose:
- kraujas buvo gabenamas į laboratoriją netinkamomis sąlygomis, buvo pažeista temperatūra;
- biomaterialinis mėginys buvo užterštas;
- kraujyje buvo liekamieji heparino ir kitų antikoaguliantų pėdsakai;
- Nustatyta, kad tyrėjai yra inhibitoriai - medžiagos, kurios sulėtina arba sustabdo polimerazės grandinės reakciją.
PCR privalumai, palyginti su kitais metodais
- Diagnozė ankstyvosiose stadijose. PCR aptinka sukėlėjo genetinę medžiagą. Naudojant imunofluorescencinę analizę galima nustatyti tik imunoglobulinus - medžiagas, kurias organizmas gamina reaguojant į infekciją. Hepatito C infekcijos atveju skirtumas tarp infekcijos ir imuninio atsako pradžios gali būti kelios savaitės ir mėnesiai, šiuo metu ELISA bus neveiksminga. PCR bus atsakas per pirmą savaitę po infekcijos.
Maža klaidų tikimybė. Nagrinėjamoje medžiagoje nustatomas genetinės medžiagos plotas, būdingas tik vienam patogenų tipui. Tai pašalina klaidingus rezultatus. Kai įmanoma ELISA klaidų, nes to paties tipo antikūnas gali išsiskirti nuo įvairių virusų - tokie antikūnai vadinami kryžminiais antikūnais.
Kaip pasirengti kraujo donorystei PCR tyrimams
C hepatito PCR analizei surenkamas veninis kraujas. Paprastai iš paciento venų paimamos dvi kraujo porcijos: pirmasis siunčiamas PCR ir antrasis - ELISA. Tai daroma siekiant tiksliau įvertinti, kiek pacientas yra užsikrėtęs virusu, ir kaip imunitetas kovoja su juo.
Paprastai pacientas privalo laikytis šių taisyklių:
- ryte atliekamas kraujo tyrimas;
- Laikotarpis tarp paskutinio valgio ir kraujo donorystės turėtų būti nuo aštuonių iki dešimties valandų;
- likus dviem ar trims dienoms iki analizės, būtina atsisakyti kepti ir riebaus maisto ir alkoholio;
- dvidešimt keturias valandas prieš analizę pacientas turi vengti fizinio krūvio: nešiokite svorio, nesikreipkite į sporto salę ar baseiną.