Leukocitų skaičius

Skaičiavimo metodas fotoaparate. Vamzdžių metodu gaunamas kraujas ir skiedimas. Į mėgintuvėlį įpilama 0,4 ml skiediklio skysčio ir 0,02 ml kapiliarinio kraujo (pageidautina Vidalevskaya). Gautas praskiedimas praktiškai laikomas 1:20: 3-5% etilo rūgšties tirpalo, dažyto metileno mėlyną, paprastai naudojamas kaip skiediklis (acto rūgšties lizės eritrocitai, metileno mėlynas dėmes su leukocitų branduoliais). Prieš užpildant kamerą, Goryaeva mėgintuvėlis su praskiestu krauju yra kruopščiai pakratomas. Kamera pripildoma taip pat, kaip ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičiavimas.

Leukocitai yra daug mažesni nei eritrocitai (nuo 1 iki 2 didelių kvadratų), todėl, siekiant tikslumo, skaičiavimai atliekami 100 didelių kvadratų (nesurūšiuoti). Skaičiavimas: 100 didelių kvadratų (1600 mažų) skaičiuojami kaip leukocitai.
Nepamirštant, kad mažo kvadrato tūris yra 1/4000 mm3, o kraujas yra praskiedžiamas 20 kartų, skaičiuojamas leukocitų skaičius 1 μl kraujo: 4000 20 ir padalintas iš 1600 = a x 1/2. Praktiškai, norint gauti faktinį leukocitų kiekį 1 μl kraujo, pakanka padalinti į pusę skaičiaus gauto skaičiaus ir pridėti 2 nulius. Vidutinė metodo klaida yra ± 7%.

Tikslesnis (2-3% klaida) ir tobulas yra leukocitų skaičius naudojant elektroninius prietaisus. Leukocitų skaičiavimas kietųjų dalelių skaitikliai atliekamas pagal tą patį principą kaip ir eritrocitai. Išankstinis kraujas praskiedžiamas ir sumaišomas su bet kokiais raudonųjų kraujo ląstelių tirpikliais. „Technicon“ autoanalizatoriuje naudojamas kaip acto rūgšties tirpalas „Culter“ ir „Celloskop“ prietaisuose - saponinas arba sapoglobinas, kuris yra atskiestas (1: 500, 1: 700) izotoniniu natrio chlorido tirpalu (6 lašai 20 ml) veisimas).

Kraujo leukocitų skaičiavimas atliekamas dažytomis periferinio kraujo tepinėlėmis.
Geriau skaičiuoti nuo ploniausio taško, esančio netoli tepinėlės pabaigos, bent 200 ląstelių (išskyrus ryškią leukopeniją), o tada nustatyti tam tikrų tipų baltųjų kraujo kūnelių procentinį santykį. Skaičiavimas yra rekomenduojamas ta pačia tvarka: pusė ląstelių turi būti skaičiuojama viršutinėje pusėje, pusė insulto apačioje, nesikreipiant į pačią kraštą ir vidurį, zigzagavimas (3-4 regėjimo laukai išilgai insulto, 3-4 laukai stačiu kampu iki insulto vidurio) tada 3-4 laukus į šoną, lygiagrečią su kraštu, vėl stačiu kampu į viršų ir pan. į vieną pusę).

Tepalų paruošimas. Atsargiai nuplaunamas ir riebaluotasis stiklas (jo kraštas) liečia injekcijos vietą. Tepimas daro šlifavimo stiklą, įdėjus jį 45 ° kampu į stiklą prieš lašas. Atnešę stiklą į šį lašą, jie laukia, kol kraujas plečiasi išilgai jo krašto, tada greitai judant jie atlieka šlifavimo stiklą į priekį.

Tinkamai išteptas tepalas turi gelsvos spalvos (plonas), nepasiekia stiklo kraštų ir baigiasi pėdsakais (ūsai).

Sausų tepalų dažymas, susidaręs po preliminarios fiksacijos. Geriausias fiksavimas pasiekiamas absoliučiu metileno alkoholiu (3-5 min.) Arba Nikiforov mišinyje, kuriame yra lygios absoliučios etanolio ir eterio dalys (30 minučių).

Pagrindiniai hematologiniai dažai yra metileno mėlynas ir jo darinys - azure I (metileno žydras) ir azure II (vienodų Azure I ir metileno mėlynųjų dalių mišinys) iki rūgštinės vandenyje tirpios geltonosios eozino.

● Romanovsky-Giemsa tapyba. Romanovsky-Giemsa dažai (gamykloje pagaminti) yra tokie: Azur II - 3 g, vandenyje tirpus geltonas eozinas - 0,8 g, metilo alkoholis - 250 ml ir glicerinas - 250 ml. Darbinis dažų tirpalas paruošiamas 1,5-2 lašų galutinio dažų 1 ml distiliuoto vandens. Dažai pilami į tepinėlį su galbūt aukštesniu sluoksniu; dažymo laikas - 30-35 min Po šio laikotarpio tamponai plaunami vandeniu ir džiovinami ore. Šiuo metodu galima gerai atskirti branduolį, tačiau neutropilinis citoplazmos granuliacija yra daug blogesnė, todėl jis plačiai naudojamas periferiniam kraujo tepimui.

● Kombinuotas May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa dažymas pagal Pappenheimą. Gautas dažiklis, gegužės-Grunwaldo fiksatorius, kuris yra eozinmetileno mėlynojo tirpalo metileno alkoholyje tirpalas, pipetuojamas ant fiksuoto tepalo 3 minutes. Po 3 minučių į tirpalą dengiantį dažą pridedamas vienodas kiekis distiliuoto vandens, o dažymas tęsiamas dar 1 minutę. Po to dažai nuplaunami ir tepalas išdžiovinamas ore. Tada išdžiovinti tepinėliai perpilami šviežiai paruoštu vandeniniu Romanovsky dažų tirpalu 8-15 minučių. Šis metodas laikomas geriausiu, ypač tepinėliams, kuriuose yra čiulpų.

Leukocitų skaičiaus padidėjimas periferiniame kraujyje virš normalaus lygio vadinamas leukocitoze, sumažėjimas vadinamas leukopenija. Leukocitozei (leukopenijai) retai būdingas proporcingas visų rūšių leukocitų skaičiaus padidėjimas (sumažėjimas), pavyzdžiui, leukocitozė su kraujo sutirštėjimu. Daugeliu atvejų padidėja bet kurio tipo ląstelių skaičius (sumažėjimas). Atskirų tipų leukocitų kiekio kraujyje padidėjimas arba sumažėjimas gali būti santykinis arba absoliutus, priklausomai nuo bendro leukocitų skaičiaus - normalus, padidėjęs arba sumažėjęs. Leukocitų skaičiaus, individualių formų ir morfologijos santykio pokytis priklauso nuo patogeno tipo ir virulentiškumo, patologinio proceso pobūdžio, eigos ir apimties, individualios organizmo reakcijos.

Leukocitų ir trombocitų skaičiaus skaičiavimas

Veiksniai, turintys įtakos baltųjų kraujo kūnelių tyrimo teisingumui

- ilgas kraujo saugojimas kambario temperatūroje

Leukocitų kiekio kraujyje normos

Amžius Leukocitų skaičius

- 1 diena 11.6 - 22.0

- 1 savaitė 8.1. - 14.3

- 1 mėnuo 7.6 - 12.4

- Suaugusieji 4,0 - 9,0

Leukocitų kiekio kraujyje nustatymo metodai.

- Leukocitų skaičiavimas skaičiavimo kameroje

- Leukocitų skaičiavimas hematologiniuose analizatoriuose

Leukocitų skaičiaus nustatymas skaičiavimo kameroje.

- Leukocitų skaičiavimas mikroskopu atliekamas lizuojant raudonuosius kraujo kūnelius 100 didelių skaičiavimo tinklelio kvadratų ir perskaičiuojant 1 litrui kraujo, remiantis kvadratų tūriu ir kraujo praskiedimu. Leukocitų skaičius turi būti atliekamas per 2-4 valandas po kraujo surinkimo.

- Jei periferiniame kraujyje yra branduolinių raudonųjų ląstelių, jie nėra lizuojami ir skaičiuojami kartu su leukocitais. Šiuo atveju, norint nustatyti tikrąjį leukocitų skaičių, raudonoje eilutėje esančių ląstelių skaičius atimamas iš bendro skaičiuotų ląstelių skaičiaus.

- Pavyzdžiui: bendras leukocitų skaičius skaičiuojant kameroje (arba analizatoriuje) -45x109 / l. Apskaičiuojant leukocitų formulę nustatyta, kad 100 leukocitų yra 50 eritroblastų (normoblastų).

Apskaičiuojame tikrąjį leukocitų kiekį kraujyje:

150 ląstelių - 45 x 109 / l

100 ląstelių (leukocitų) - X

X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l

Taigi tikrasis leukocitų skaičius kraujyje yra 30 x 109 / l.

Pagrindiniai klaidų šaltiniai skaičiuojant leukocitus kameroje:

- Netinkamas kraujo ir acto rūgšties kiekio santykis, paimtas mėgintuvėlyje.

- Netinkamai paruoštas acto rūgšties tirpalas (esant daugiau kaip 5% koncentracijos, kai kurie leukocitai gali susilpnėti, todėl rezultatas bus nepakankamai įvertintas).

- Ilgalaikis mėginio veikimas esant aukštesnei nei 28 ° C temperatūrai, kuri gali pagreitinti leukocitų lizę mėginyje ir sukelti nepakankamą rezultatą.

- Netinkamas Goryaev kameros užpildymas. Kaip ir apskaičiuojant raudonuosius kraujo kūnelius, fotoaparatas turi būti paliktas 1 minutę, kad būtų galima nusistatyti ląsteles.

- Po ankstesnio apibrėžimo „Goryaev“ kamera nebuvo pakankamai gerai išplauta. Kameroje likusieji leukocitai gali pervertinti analizės rezultatus.

Trombocitų skaičiavimo metodai

- skaičiavimo kameroje

Kiekviena metodų grupė turi privalumų ir trūkumų.

- Trombocitų skaičiavimas kameroje yra pakankamai tikslus, nereikia apskaičiuoti raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus. Kita vertus, šis metodas yra sunkesnis, nes natūralios formos trombocitai vaizduojami mažais ir blogai kontrastingais elementais. Šio metodo trūkumas yra trombocitų skaičiavimas artimiausiomis valandomis po kraujo.

- Trombocitų kiekio kraujyje nustatymas yra žymiai prastesnis, palyginti su kameros metodu ar automatiniais skaitikliais. Kraujo tepimo skaičiavimo klaidos gali būti dėl prastos tepalo kokybės ir su tuo susijusio netolygaus trombocitų pasiskirstymo, netinkamo raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus nustatymo. Svarbus šio metodo trūkumas yra būtinybė tuo pačiu metu skaičiuoti trombocitus ir kraujo ląsteles. Jo privalumas yra gebėjimas bet kuriuo metu tirti trombocitus, neatsižvelgiant į kraujo surinkimo laiką.

- Trombocitų nustatymo metodas, naudojant hematologinį analizatorių, leidžia tiksliai nustatyti trombocitų skaičių, jų vidutinį tūrį ir pasiskirstymą pagal tūrį.

Leukocitų skaičiavimo metodas Goryaev kameroje

Baltųjų kraujo kūnelių - baltųjų kraujo kūnelių - vaidmuo svarbi organizmo antimikrobinei apsaugai. Granulocitai fagocitizuoja mikrobus ir juos sunaikina fermentais, uždengtais granulėmis, limfocitai gamina antikūnus ir imuninį atsaką į organizmą.

Bandymo metodo nustatymo metodas: įpilkite į mėgintuvėlį 0,4 ml Türk tirpalo (Türko skystis turi acto rūgšties, kad sunaikintų raudonuosius kraujo kūnelius ir metileno mėlyną, kad būtų galima nuslopinti leukocitų branduolius). Naudokite kapiliarinę pipetę 0,02 ml kraujo traukimui iš šviežio lašelio, švelniai išpurškite jį į mėgintuvėlį su reagentu ir nuplaukite pipetę. Gerai išmaišykite. Tuo pačiu metu kraujo skiedimas yra 20 kartų. Apvalaus stiklo strypo gale surenkamas atskiesto kraujo lašas ir dedamas į poliruoto stiklo kameros kraštą.

Skaičiavimas atliekamas 100 didelių nepertraukiamų kvadratų, sudėti keturis. Naudojamas nedidelis padidėjimas.

Skaičiavimo formulės Nr. 1 išvedimas.

1. 100 kvadratų yra 1600 mažų kvadratų (16x100)

2. Kraujo tūris virš mažo kvadrato 1/4000 mm3

3. 20 kartų kraujo skiedimas

Leukocitų skaičius 1 μl kraujo = -4000-20. = Ax 50

Pavyzdžiui: 100 leukocitų buvo skaičiuojami 100 didelių Goryaev tinklelio kvadratų. 1 μl kraujo leukocitų skaičius bus 130 x 50 = 6500 arba 6,5-10 3.

Siekiant nustatyti leukocitų kiekį 1 litrui kraujo, leukocitų skaičius, išreikštas tūkstančiais, turi būti padaugintas iš 10 9.

Mūsų pavyzdyje leukocitų skaičius 1 litro kraujo yra 6,5-10 9.

194.48.155.245 © studopedia.ru nėra skelbiamų medžiagų autorius. Bet suteikia galimybę nemokamai naudotis. Ar yra autorių teisių pažeidimas? Rašykite mums | Atsiliepimai.

Išjungti adBlock!
ir atnaujinkite puslapį (F5)
labai reikalinga

Leukocitai (leucocytus)

Leukocitai. Leukocitų kiekybinis nustatymas. Leukocitų skaičiavimas naudojant kamerą Goryaeva. Kiekybinis leukocitų kiekis. Leukocitozė.

Baltųjų kraujo kūnelių

Leukocitų kiekis kraujyje priklauso nuo jų susidarymo greičio ir nuo jų mobilizacijos iš kaulų čiulpų, taip pat nuo jų panaudojimo ir migracijos į audinius (į pažeidimus), plaučių ir blužnies paėmimo. Šiuos procesus savo ruožtu įtakoja daugybė fiziologinių veiksnių, todėl leukocitų skaičius sveiko žmogaus kraujyje svyruoja: jis pakyla iki dienos pabaigos, fizinio krūvio metu, emocinis stresas, baltymų maisto vartojimas ir staigūs aplinkos temperatūros pokyčiai.

Leukocitų kiekybinis nustatymas

Leukocitai skaičiuojami naudojant „Goryaev“ kamerą ir naudojant automatinius skaitiklius.

Leukocitų skaičiavimas naudojant kamerą Goryaeva

In vitro metodas leukocitų skaičiavimui:

• Į mėgintuvėlį pilamas 0,4 ml 3-5% acto rūgšties tirpalo, padengto metileno mėlyną. Naudokite kapiliarinę pipetę 20 μl kraujo traukimui iš šviežio lašelio (praskiedimo 20 kartų), atsargiai jį išpurškite į mėgintuvėlį reagentu ir išplaukite pipetę. Gerai išmaišykite;
• švarus ir sausas stiklas patenka į kamerą taip, kad kontaktiniame taške susidarytų vaivorykštės žiedai;
• kraujo tirpalas praskiedžiamas mėgintuvėlyje, gerai išmaišykite. Apvalaus stiklo strypo galas užima vieną lašą kraujo ir patenka į poliruoto kameros stiklo kraštą;
• užpildžius kamerą, jis paliekamas 1 min. ramybėje leukocitų nusėdimui;
• Leukocitai laikomi mažu didinimu (objektyvas × 8 arba × 9, okuliaras × 10 arba × 15) su tamsiu matymo lauku (su sumažintu kondensatoriumi arba susiaurėjusia diafragma);
• patenkinamų rezultatų leukocitai skaičiuojami 100 didelių kvadratų.

Žinant didelio kvadrato tūrį ir kraujo praskiedimo laipsnį, suraskite leukocitų skaičių 1 μl ir 1 l kraujo. Didelės aikštės pusė yra 1/5 mm, plotas yra 1/25 mm2, erdvės tūris virš šio kvadrato yra 1/250 mm3.

Baltųjų kraujo kūnelių skaičiavimo formulė:

kur B yra leukocitų skaičius 100 didelių kvadratų;
P - praskiedimo laipsnis (20).

Leukocitų skaičius

Standartas: 4,0–9,0 × 10 9 / L

Skambinama leukocitų, viršijančių 9,0 × 10 9 / l, skaičius
leukocitozė, jų skaičiaus sumažėjimas mažesnis nei 4,0 × 10 9 / l - leukopenija. Tačiau net 3,5 × 10 9 1 l leukocitų daugeliui asmenų gali būti norma. Remiantis literatūra, tokie žmonės turi didesnį atsparumą imunitetui ir yra mažiau linkę susirgti, o tai atrodo dėl to, kad reikia imuninio atsako į leukocitų rezervą audiniuose, kuriuose yra 50–60 kartų daugiau nei kraujyje. Akivaizdu, kad sveikų asmenų, kuriems periferiniame kraujyje yra mažas baltųjų kraujo kūnelių kiekis, jų atsargos audiniuose atitinkamai padidėja. Šis reiškinys paaiškinamas paveldimu ir šeimos pobūdžiu arba padidėjusiu parazimpatinės nervų sistemos poveikiu.

Leukopenija gali būti funkcionali ir ekologiška.
Funkcinė leukopenija yra susijusi su kraujo formavimosi reguliavimu ir stebima:

• kai kurios bakterinės ir virusinės infekcijos (vidurių šiltinė, gripas, raupai, raudonukė, Botkin liga, tymai);
• veikiant vaistams (sulfonamidams, analgetikams, prieštraukuliniams vaistams, antitiroidiniams, citostatiniams ir kitiems vaistams);
• raumenų darbo metu, užsienio baltymų įvedimas, nervų ir temperatūros poveikis, badas, hipotoninės būsenos;
• Ilgalaikio kraujo laikymo kambario temperatūroje (daugiau nei 4 valandos) gali būti siejama su klaidinga leukocitopenija.

Organinė leukopenija, atsiradusi dėl kaulų čiulpų aplazijos ir jos pakeitimo riebaliniu audiniu, atsiranda, kai:

• aplastinė anemija;
• agranulocitozė;
• leukopeninė leukemija;
• kai kurios Hodžkino ligos formos;
• jonizuojančiosios spinduliuotės;
• hipersplenizmas (pirminis ir antrinis);
• kolageno ligos.

Leukocitozė

Leukocitozė yra kraujodaros sistemos reakcija į poveikį
egzogeniniai ir endogeniniai veiksniai. Yra fiziologinė ir patologinė leukocitozė.

Fiziologinė leukocitozė yra:

• virškinimas - po valgymo, ypač daug baltymų; leukocitų skaičius neviršija 10,0–12,0 × 10 9 / l, o po 3-4 valandų normalus;
• emocinis stresas (adrenalinas), stiprus fizinis krūvis, aušinimas, pernelyg didelis saulės poveikis (saulės nudegimas), daugelio hormonų (katecholaminų, gliukokortikosteroidų ir tt) skyrimas antroje nėštumo pusėje, menstruacijų metu ir dėl nevienodo leukocitų pasiskirstymo kraujyje pagrindinę.

Patologinė leukocitozė yra suskirstyta į absoliučią ir santykinę.

Absoliutus leukocitozė - leukocitų kiekio kraujyje padidėjimas iki kelių šimtų tūkstančių (100,0–600,0 × 10 9 / l ir daugiau).

• Dažniausiai pasireiškė leukemija: lėtine leukemija - 98–100% atvejų ūminėje leukemijoje - 50-60%. Leukocitų ląstelių santykio kaulų čiulpuose ir kraujo punktais santykis yra pagrindas leukemijos diagnozei.

Nustatyta santykinė leukocitozė:

• ūminiai uždegiminiai ir infekciniai procesai, išskyrus vidurių šiltinės, gripo, raupų, raudonukės, Botkin ligos, tymų. Didžiausia leukocitozė (iki 70,0–80,0 × 10 9 / l) stebima sepse;
• esant toksiškoms medžiagoms (vabzdžių nuodams, endotoksinams), jonizuojančiai spinduliuotei (iš karto po švitinimo);
• dėl kortikosteroidų, adrenalino, histamino, acetilcholino ir skaitmeninių preparatų poveikio;
• su audinių dezintegravimu (nekroze), miokardo infarktu, periferinių arterijų tromboze su gangrena, nudegimais, eksudaciniu pleuritu, perikarditu, uremija, kepenų koma;
• reikšmingas kraujo netekimas sužalojimuose, vidinis, ginekologinis ir kitas kraujavimas.

Leukocitų skaičiaus padidėjimas infekcinėse ligose daugeliu atvejų lydi leukocitų formulės perėjimą į kairę

Leukocitų skaičius

Leukocitų skaičius apskaičiuojamas naudojant automatinį skaitiklį arba Goryaev kamerą. Norint skaičiuoti leukocitus kameroje, paruošiamas Turkio skystis - acto rūgšties tirpalas, dažomas vandeniniu metileno mėlynuoju tirpalu (0,1 ml 0,1% metileno mėlynojo tirpalo pridedama prie 9 ml 10% acto rūgšties). Bandymo mėgintuvėlyje supilkite 0,4 ml skysčio Türk. Įsigykite tiksliai 0,02 ml kraujo, atsargiai pridėkite prie praskiedimo skysčio. Kraujo skiedimas yra 1:20. Gerai išmaišykite ir palikite 4 minutes. Užpildykite kamerą Goryaeva, kruopščiai purtant mėgintuvėlį su atskiestu krauju. Fotoaparatas 1 min. Paliekamas ant lygaus paviršiaus leukocitų nusėdimui. Tada leukocitai skaičiuojami esant mažam mikroskopo padidinimui (objektyvas 8, okuliaras 10 arba 15) su tamsiu matymo lauku (kondensatorius nuleistas arba susiaurėjusi diafragma). Laikoma, kad leukocitai yra 100 neatskleistų didelių kvadratų, kurie atitinka 1600 mažų. Ląstelių skaičiavimo dideliuose kvadratuose rezultatai apibendrinti ir apskaičiuoti jų skaičių 1 μl kraujo, naudojant formulę:

kur X yra leukocitų skaičius 1 μl kraujo; A - ląstelių skaičius, skaičiuojamas 100 didelių kvadratų, 1600 - mažų kvadratų skaičius; 20 - kraujo skiedimas; 4000 yra daugiklis, dėl kurio gaunamas 1 μl kraujo tūris, remiantis mažo kvadrato (1/4000 μl) tūriu.

Leukocitų formulės skaičiavimas Ištirtos dažytos periferinio kraujo tepinėliai. Būtina sąlyga, kad būtų tinkamai atsižvelgta į kraujo ląstelių morfologines savybes, yra tinkamai pagamintas ir gerai nudažytas kraujo tepinėlis. Kraujo tepinėlis paruošiamas ant sausų, švarių, gerai nuriebalintų skaidres, brandinamas Nikiforovo mišinyje (96 ° C etilo alkoholis ir 1: 1 dietilo eteris). Laikydami stiklinę stiklą ilgiems kraštams, palieskite jo paviršių į kraujo lašą (bet ne odą), išleistą iš punkcijos, arba užpilkite kraujo lašą su mikropipete arba kapiliaru. Stiklo stiklelis laikomas ant stalo arba kairėje rankoje, kad būtų siauras kraštas. Naudodami dešinę ranką, įdėkite stiklą siaurais kraštais į stiklą su krauju į kairę nuo lašo 45 ° kampu ir stumkite jį į dešinę, kol jis paliečia kraują. Jie laukia, kol kraujas plinta per visą grunto stiklo kraštą, ir tada, greitai, greitai judant, nuveskite jį iš dešinės į kairę, kol visas lašas bus išnaudotas. Kraujo lašas turi būti mažas ir proporcingas taip, kad visas tepalas būtų dedamas ant stiklo, nepasiekiant 1-1,5 cm prieš jo kraštą. Gerai pagamintas tepalas yra plonas, gelsvas ir baigiasi „šluota“. Oro išdžiovinti kraujo tepinėliai dedami į specialius indus fiksavimui arba įprastus stiklinius stiklus, pripildytus fiksavimo skysčiu (metilo alkoholiu, fiksavimo laikas 3-5 minutės, etilo alkoholis, 30 minučių; Nikiforovo mišinys, 20-30 minučių). Fiksuoti preparatai išdžiovinami ore, o tada dažomi Romanovsky-Giemsa dažais. Baigtas dažų tirpalas Romanovsky-Giemsa (azureozinas), praskiestas 1:10 reikiamam dažymui. Stacionarūs tepalai pilami atskiestu dažikliu, kuris pilamas į tepinėlį su galbūt aukštesniu sluoksniu. Dažymas trunka priklausomai nuo oro temperatūros patalpoje nuo 25 iki 45 minučių. Baigę dažus, nuplaukite dažus distiliuotu vandeniu ir vertikaliai įdėkite smūgius į medinį stovą džiovinimui. Kraujo tepalų mikroskopija atliekama panardinant 100 × 10 didinimo būdu. Leukocitų skaičiavimas atliekamas kartu su zigzago linija („Meander linija“), skaičiuojamos 100-200 ląstelių, atsižvelgiant į atskirų leukocitų formų skaičių: stabus ir segmentuotus neutrofilus, eozinofilus, bazofilus, monocitus, limfocitus. Apskaičiuokite kiekvieno ląstelių tipo procentinę dalį.

Apskaičiuojant absoliutų fagocitų ir limfocitų skaičių, absoliutusis fagocitų (neutrofilų ir monocitų) ir aukštesnių stuburinių limfocitų skaičius apskaičiuojamas remiantis duomenimis apie leukocitų skaičių periferiniame kraujyje ir leukocitų formulėje.

Fagocitinės funkcijos tyrimas

Fagocitinio indekso ir fagocitinio skaičiaus nustatymas

Leukocitų absorbcijai ir virškinimui įvertinti buvo sukurta daug metodų. Visi jie yra pagrįsti fagocitų gebėjimu sugerti svetimas daleles, sudarančias bandymo sistemą (specifinis mikroorganizmo tipas, zimozanas, lateksas - absorbcijos objektas). Apreiškimas atliekamas in vitro arba in vivo. Bendras nustatymo kursas yra toks: Heparinizuotas arba citruotas šviežias kraujas (arba fagocitų suspensija) sumaišomas su vienodo tūrio suspenduotos mikrobinės suspensijos (Saccharomyces cerevisiae, Staphilococcus aureus, S. albus, E.coli, A. nydrophila) arba kitu absorbcijos objektu. Mišinys švelniai sumaišomas ir įdedamas į termostatą (37-40ºС - šiltakraujams, priklausomai nuo normalaus kūno temperatūros, 26 ° C - šilumai mylinčioms žuvims ir mažesniam šaltį mylinčiam). Po 15, 30, 45, 60 ir 90 minučių tepinėliai paruošiami ant skaidrių, išdžiovinami, tvirtinami metilo alkoholiu arba Nikiforovo mišiniu ir dažomi pagal Romanovsky-Giemsa. Jie žiūri į panardinimą ir nustato fagocitinį aktyvumą - fagocitų, dalyvaujančių fagocitozėje, procentą, fagocitinį indeksą - vieno fagocitinio leukocito užfiksuotų bandymų mikrobų skaičių, fagocitinį skaičių - vidutinį fagocitinių objektų skaičių per 1 aktyvų neutrofilą. Rodiklių vertinimas įvairiais laiko intervalais leidžia įvertinti fagocitozės dinamiką. Paprastai po 90 minučių fagocitinis indeksas turėtų būti mažesnis nei po 45 minučių ir 60 minučių, dėl mikrobų virškinimo. Pažeidus virškinimą, jis nekeičia.

Fagocitų funkcinio aktyvumo įvertinimas sumažinant nitro-mėlynojo tetrazolo reakciją (NBT bandymas)

Šis bandymas yra baktericidinės fagocitų funkcijos rodiklis ir leidžia jums įvertinti jų gebėjimą tapti deguonimi. Įjungus šį žudymo mechanizmą, aktyvuojamas fermentas NADPH oksidazė, dėl kurios fagocituose atsiranda reaktyviųjų deguonies rūšių. Tokių medžiagų išsiskyrimas ląstelėje vadinamas deguonies (kvėpavimo) sprogimu, kurį galima užregistruoti naudojant NBT testą. Atliekant šį bandymą, į fagocitus įterpiama nitrozino tetrazolio medžiaga, ji absorbuojama ląstelėje ir, esant reaktyviosios deguonies rūšims, tampa tamsiai mėlynos spalvos medžiaga, diformazanas. Daugiau tamsiai mėlynos granulės yra pritvirtintos prie paviršiaus arba fagocitų viduje, tuo labiau susidaro aktyvesnės deguonies formos, tuo daugiau deguonies priklauso.

NBT testas yra sudarytas iš dviejų variantų: spontaniškas ir sukeltas. Nustatant spontanišką NBT testą, fagocitai yra kultivuojami dalyvaujant NST be išankstinio ląstelių aktyvavimo, atliekant indukuotą NBT testą, į auginimo terpę pridedamas fagocitinės reakcijos aktyvatorius. NBT testo nustatymas dviejuose variantuose leidžia apskaičiuoti ląstelių funkcinį rezervą, kuris yra skirtumas tarp indukuotų diformazano teigiamų ląstelių skaičiaus (intensyvumo) ir spontaninių diformazano teigiamų ląstelių skaičiaus (intensyvumo). Indukuoto NBT testo reikšmės apibūdina fagocitinių ląstelių aktyvumą esant antigeniniam stimului ir yra laikomos jų pasirengimo pilnam fagocitozei kriterijumi. Spontaniškas NBT testas leidžia įvertinti deguonies priklausomų neaktyvių fagocitų žudymo mechanizmų aktyvumo laipsnį. Jis apibūdina intracelulinių mikrobicidinių sistemų aktyvinimo laipsnį.

Spontaniniam NBT testui sudaryti į 0,1 ml kraujo pridedama 0,05 ml 0,2% NBT tirpalo kalio fosfato buferyje (0,1, pH 7,3) ir 0,05 ml to paties buferio. Lygiagrečiai imamas mėginys, kuris atspindi indukuotą NBT testą, kuriame vietoj 0,05 ml buferio pridedamas toks pat fagocitinio aktyvatoriaus tūris (pavyzdžiui, pirogeninė koncentracija yra 50 μg / ml). Reakcijos mišinys termostatuojamas vandens vonioje, esant 37 ° C (30–60 min.). Paruošiami vidutinio tankio tepalai, išdžiovinami ore ir fiksuojami etilo alkoholyje arba Nikiforovo mišinyje (20 min.), Tada nudažomi neutraliu raudonu vandeniniu tirpalu (0,1%, 1 min.)

Po reakcijos kraujo tepinėliai mikroskopuojami panardinant (100 × objektyvas, 10 × okuliaras). Tarp 100 ląstelių skaičiuojamas aktyvuotų neutrofilų (DAN,%), turinčių diformazano granulių, santykis. Atsižvelgiant į ląstelėse deponuoto difrformazano kiekį, jų aktyvumas yra vertinamas atsitiktiniais vienetais ir apskaičiuojamas neutrofilų aktyvinimo indeksas (IAN, panaudoti vienetai):

kur yra H_Ne. - ląstelių, kuriose nėra diformazano granulių, skaičius;

H₁ - ląstelių, kuriose diformazano nuosėdų plotas yra mažesnis nei 1/3 branduolio ploto, skaičius;

H₂ - ląstelių, kuriose diformazano nuosėdos sudaro nuo 1/3 iki viso branduolio dydžio, skaičius;

H₃ - ląstelių, kuriose diformazano nuosėdos užima didesnį plotą, skaičius.

Mobilizacijos koeficiento (KM) nustatymas pagal šią formulę:

Leukocitų nustatymas kraujyje

Straipsnio turinys

• Leukocitų nustatymas kraujyje
• Kas yra leukocitai?
• Kokia yra bendro kraujo analizė moterims

Leukocitų skaičius kraujyje

Nėra fiksuoto fiksuoto leukocitų skaičiaus, kuris būtų laikomas norma visiems žmonėms. Šis skaičius priklauso nuo asmens amžiaus: kuo vyresnis asmuo, tuo mažesnis jo kraujyje esančių leukocitų skaičius. Normalus leukocitų skaičius naujagimyje yra 9-30x109 / l. Suaugusiam žmogui šis skaičius yra tris kartus mažesnis - 4-9x109 / l. Šių dalelių kiekio kraujyje rodiklis gali šiek tiek nukrypti nuo normos priklausomai nuo kūno funkcinės būklės ir net paros laiko.

Taigi, nėščių moterų kraujyje yra daugiau leukocitų. Standartas pirmą kartą po valgio padidėja po treniruotės, perkaitant ir vėsinant. Bet jei dalelių skaičius padidėja tris kartus daugiau nei norma, tai yra ligos, kuri vystosi organizme, signalas.

Būklė, kai organizme yra didelis leukocitų kiekis, vadinama leukocitoze, o atvirkštinė būsena vadinama leukopenija. Pažymėtina, kad kraujo mėginių ėmimo analizei kokybė stipriai veikia leukocitų skaičių: procedūra visada turi būti vykdoma tuščiu skrandžiu.

Kaip nustatyti leukocitų skaičių

Nustatyti kraujo leukocitų kiekį keliais būdais: dovanojant kraują, tepinėlį, šlapimą ar spermą.

Labai svarbu stebėti baltųjų kraujo kūnelių kiekį šlapime nėštumo metu. Dideli rodikliai rodo, kad organizme yra vaikas, turintis vaikų, uždegiminiai procesai, pavyzdžiui, pyelonefritas ar cistitas.

Nepamirškite, kad galutinis analizės rezultatas priklauso nuo jo tinkamo elgesio. Todėl gydytojai, prieš paskirdami nėštumo metu vartojančius vaistus, pakartotinai įvertinami.

Toliau aprašyta procedūra naudojama leukocitų skaičiui kraujyje, spermoje arba šlapime. Tam tikra skysčio dalis dedama į centrifugą. Nuosėdos dedamos ant stiklo ir tiriamos mikroskopu. Norėdami suskaičiuoti leukocitų skaičių, nuosėdos dažomos naudojant specialų dažiklį. Po to apskaičiuojamas matomas leukocitų skaičius regėjimo lauke.

Jei analizė parodė nukrypimą nuo normalaus baltųjų kraujo kūnelių skaičiaus, būtina išsiaiškinti dalelių skaičiaus padidėjimo priežastį. Kai kurios ligos diagnozuojamos tikrinant baltųjų kraujo kūnelių skaičių.

Leukocitai, jų skaičius ir pagrindinės grupės. Leukocitų skaičiaus nustatymo metodai. Leykoformula ir jo vertė.

Leukocitai Norm - (4–9) x109 / l kraujo. Jų skaičius priklauso nuo limfmazgių, blužnies ir kaulų čiulpų susidarymo greičio, mobilizacijos iš kaulų čiulpų, panaudojimo ir migracijos audiniuose, plaučių ir blužnies paėmimo ir fiziologinių veiksnių. Pagrindinė granulocitų (pirmiausia neutrofilinių) fagocitų funkcija yra svetimkūnių surinkimas ir virškinimas hidroliziniais fermentais. Vertinant leukocitų skaičių klinikoje, naudojama leukocitų formulė - atskirų leukocitų formų procentinė dalis. Paprastai ši vertė yra pastovi.

Leukocitų formulė

Leukocitų skaičiaus padidėjimas iki kelių dešimčių tūkstančių rodo leukocitozę ir yra stebimas ūminių uždegiminių ir infekcinių ligų metu, lydimas leukocitų formulės poslinkio į kairę. Leukocitų skaičiaus padidėjimas iki kelių šimtų tūkstančių nurodo leukemiją. Sunkiomis infekcinėmis ligomis pasikeičia neutrofilinės morfologijos: degranuliacija, vakuolizacija ir pan. Mažesnis nei 4000 leukocitų skaičius rodo leukopeniją, dažniau agranulocitozę. Baltųjų kraujo kūnelių skaičiaus mažinimas gali būti susijęs su įvairių vaistų vartojimu, padidėjusiu radioaktyviosios foninės medžiagos kiekiu, urbanizavimu ir pan. Neutropenija pasireiškia citostatikų, lupuso, reumatoidinio artrito, maliarijos, salmonelių, bruceliozės, kaip specifinio sindromo, poveikiu - su AIDS ir radiacija.

Neutrofiliniai leukocitai. Kiekis kraujyje - 50–75% (2,2–4,2) x109 / l. Skersmuo –10–12 mikronų.

Šerdis yra kompaktiška, susideda iš 3-4 segmentų, sujungtų tiltais; citoplazma su gausiu grūdu. Infekcijose ir uždegimuose neutrofilai atlieka makrofagų - fagocitozės gebančių ląstelių - funkciją.

Leukocitai yra eozinofiliniai. Tai 1–5% leukocitų, (0,1–0,3) x109 / l. Ląstelės, didesnės nei neutrofilai, skersmuo iki 12 mikronų. Šerdį dažnai sudaro 2–3 segmentai. Citoplazma yra šiek tiek bazofilinė, jame yra didelis, ryškus dažymas su eozino granuliacija, suteikiantis teigiamą oksidazę, peroksidazę, citochromo oksidazę, sukcinato dehidrogenazę, rūgštines fosfatazės reakcijas. Jie yra pajėgūs fagocitozei, dalyvauja baltymų produktų detoksikacijoje ir alerginėse organizmo reakcijose. Eozinofilija būdinga helmintų infekcijoms, ji yra įmanoma infekcinių ligų atkūrimo stadijoje.

Leukocitai bazofiliniai. Kiekis kraujyje - 0–1% (iki 0,06 x 109 / l). Skersmuo yra nuo 8 iki 12 mikronų. Šerdis yra plati, netaisyklinga. Citoplazmoje yra didelis grūdas, kuris dažyti metachromatiškai violetinės spalvos tonais. Dalyvaukite alerginėse reakcijose (neatidėliotinos ir uždelstos rūšys): gaminamas histaminas ir heparinas (heparinocitų grupė).

Monocitai / makrofagai. Tai yra 2-10% leukocitų, (0,2-0,55) x109 / l. Dydžiai nuo 12 iki 20 mikronų. Branduolys yra didelis, laisvas ir netolygus chromatino pasiskirstymas. Jie nesikaupia ilgai kraujyje, patenka į audinius, transformuojasi į makrofagus, galinčius judėti amooboidu. Pagrindinės organizmo imuninės reakcijos ląstelės. Pagrindinė funkcija yra endocitozė. Jie yra centrinė mononuklinės fagocitinės sistemos jungtis. Atliekamos kelios nuo citokinų priklausomos funkcijos: hematopoetinė, imunostimuliuojanti, priešuždegiminė, imunosupresinė ir priešuždegiminė.

Makrofagų sekrecijos produktai:

Proteazės: plazminogeno aktyvatorius, kolagenazė, elastazė, angiotenzino konvertazė.

Uždegimo ir imunomoduliacijos mediatoriai: interleukinas-1 (IL-1), naviko nekrozės faktorius α, interferonas γ, lizocimas, neutrofilų aktyvinimo faktorius, komplemento komponentai C1, C2, C3, C5, tinkamasis, faktoriai B, D, IL-3, IL -6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15.

Augimo faktoriai: CSF-GM, CSF-G, CSF-M, fibroblastų augimo faktorius, transformuojantis augimo faktorius.

Koaguliacijos faktorius ir fibrinolizės inhibitoriai: V, VII, IX, X, plazminogeno inhibitoriai, plazmino inhibitoriai.

Lipniosios medžiagos: fibronektinas, trombospondinas, proteoglikanai.

Kameros skaičiavimo metodas

Vamzdžių metodu gaunamas kraujas ir skiedimas. Į mėgintuvėlį įpilama 0,4 ml skiediklio skysčio ir 0,02 ml kapiliarinio kraujo (pageidautina Vidalevskaya). Gautas praskiedimas praktiškai laikomas 1:20: 3-5% etilo rūgšties tirpalo, dažyto metileno mėlyną, paprastai naudojamas kaip skiediklis (acto rūgšties lizės eritrocitai, metileno mėlynas dėmes su leukocitų branduoliais). Prieš užpildant kamerą, Goryaeva mėgintuvėlis su praskiestu krauju yra kruopščiai pakratomas. Kamera pripildoma taip pat, kaip ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičiavimas.

Leukocitai yra daug mažesni nei eritrocitai (nuo 1 iki 2 didelių kvadratų), todėl, siekiant tikslumo, skaičiavimai atliekami 100 didelių kvadratų (nesurūšiuoti).

Skaičiavimas: 100 didelių kvadratų (1600 mažų) skaičiuojami kaip leukocitai. Nepamirštant, kad mažo kvadrato tūris yra 1/4000 mm 3, o kraujas yra praskiedžiamas 20 kartų, skaičiuojamas leukocitų skaičius 1 μl kraujo: 4000 * 20 ir padalintas iš 1600 = a * 1/2. Praktiškai, norint gauti faktinį leukocitų kiekį 1 μl kraujo, pakanka padalinti į pusę skaičiaus gauto skaičiaus ir pridėti 2 nulius. Vidutinė metodo klaida yra ± 7%.

Tikslesnis (2-3% klaida) ir tobulas yra leukocitų skaičius naudojant elektroninius prietaisus. Leukocitų skaičiavimas kietųjų dalelių skaitikliai atliekamas pagal tą patį principą kaip ir eritrocitai. Išankstinis kraujas praskiedžiamas ir sumaišomas su bet kokiais raudonųjų kraujo ląstelių tirpikliais. Naudojant „Technicon“ analizatorių, naudokite acto rūgšties tirpalą aparate „Culter“ ir „Celloskop“ - saponiną arba sapoglobiną, kuris yra atskiestas (1: 500, 1: 700) izotoniniame natrio chlorido tirpale (6 lašai 20 ml). veisimas).

12. Granulocitų funkcijos. T-ir B-limfocitų vaidmuo kuriant specifinius imuniteto mechanizmus:

Pagrindinės imuninės sistemos ląstelės yra T-ir B-limfocitai, kurie cirkuliuoja kraujotakoje ir limfinėje sistemoje, nuolat judėdami iš vieno imuninės sistemos organo į kitus, turi galimybę išeiti į audinius, kad atliktų apsaugines funkcijas (1 pav.).

Specifinio imuniteto apsauginėse reakcijose, be T ir B ląstelių, fagocitinės ląstelės (granulocitai, monocitai, makrofagai), „natūralūs žudikai“, stiebinės ląstelės, endotelio ir epitelio ląstelės, kurios atlieka pagalbinių ląstelių vaidmenį, sąveikauja su T ir B ląstelėmis. limfocitai.

Imuninis atsakas susideda iš sudėtingos ląstelių sąveikos serijos, aktyvuotos pašalinus svetimąją antigeninę medžiagą. Pirma, makrofagas užfiksuoja organizmą, kuriame yra antigenai. Tada makrofagas pašalina dalį antigeno (peptido) ir parodo jį ant jo paviršiaus, tarsi pateikdamas jį imuninėms ląstelėms. Limfocitų aktyvinimas antigenu sukelia limfocitų proliferaciją ir transformaciją.

Limfocitai yra vienintelės kūno ląstelės, kurios sugeba specifiškai atpažinti savo ir svetimus antigenus ir reaguoti su aktyvavimu kontaktuodami su konkrečiu antigenu. Esant labai panašiai morfologijai, limfocitai skirstomi į dvi populiacijas, turinčias skirtingas funkcijas ir gaminančius skirtingus baltymus.

Viena populiacija vadinama B-limfocitais. Žmonėms B limfocitai brandinami kaulų čiulpuose. B-limfocitai atpažįsta antigenus specifiniais imunoglobulino receptoriais, kurie, kaip B-limfocitai brandinami, atsiranda ant jų membranų. B-limfocitai sugeba atpažinti ir susieti baltymus, polisacharidus ir lipoproteinus tirpius antigenus, o pagrindinė B-limfocitų funkcija yra specifinis antigeno atpažinimas. Antigeno atpažinimas sukelia B-limfocitų aktyvavimą, proliferaciją ir transformaciją į plazmos ląsteles - specifinių antikūnų - imunoglobulinų - gamintojus. Taigi susidaro humorinis imuninis atsakas. Dažniausiai B-limfocitams reikia T-limfocitų, aktyvuojančių citokinų produktus, siekiant sukurti humoralinį imuninį atsaką.

Kitas populiacija yra vadinama T-limfocitais dėl to, kad jų prekursoriai yra diferencijuoti tymus. T-limfocitai atlieka svarbiausią antigeno atpažinimo ir surišimo funkciją. T-limfocitai, aktyvuoti su antigenais, daugina ir transformuojasi į įvairias subpopuliacijas, kurios toliau dalyvauja visose imuninio atsako formose. Aktyvus T-limfocitas taip pat gamina ir išskiria citokinus, kurie didina T-limfocitų, B-limfocitų ir makrofagų skaičiaus didinimo procesą.

Tarp brandžių T-limfocitų yra dvi pagrindinės populiacijos: T-pagalbininkų ląstelės (CD4 +) ir T-žudikų ląstelės - citotoksinės T-limfocitai (CD8 +). Etiketė „CD“ yra „ląstelių paviršiaus fenotipo“ - „diferenciacijos klasterio“ (iš anglų kalbos diferenciacijos - CD) charakteristika.

Yra ir kito tipo limfocitai - dideli granuliuoti limfocitai, kurie skiriasi nuo mažesnių T-ląstelių ir B-limfocitų, ne tik dėl struktūros savybių, bet ir dėl antigenų atpažinimo receptorių nebuvimo. Šios ląstelės vadinamos "natūraliais žudikais": jos gali naikinti skirtingų virusų užkrėstas tikslines ląsteles arba naviko ląsteles (žr. 1 lentelę).

1 lentelė. Žmogaus limfocitų klasifikacija

T ląstelės žalingai veikia šiuos objektus:

1. Piktybinės ląstelės.

2. Mikroorganizmų užkrėstos ląstelės.

3. Persodinti organai ir audiniai.

Visa ląstelė yra įtraukta į ataką, todėl atsakymas vadinamas ląsteliniu imunitetu.

Taigi yra du pagrindiniai imuninio atsako tipai:

· Ląstelinis imunitetas yra T limfocitų funkcija.

· Humorinis imunitetas - dalyvaujant B-limfocitams.

Yra dar vienas T-limfocitų pogrupis: reguliavimo T-limfocitai, T-reguliuojančios ląstelės Treg), T-slopintuvai yra centriniai imuninio atsako reguliatoriai. Jų pagrindinė funkcija yra kontroliuoti imuninio atsako stiprumą ir trukmę reguliuojant T-efektorinių ląstelių (T-pagalbininkų ląstelių ir T-citotoksinių ląstelių) funkciją.

Fig. 2. Bendra imuninio atsako schema

Imuninio atsako slopinimo reiškinys buvo žinomas ilgą laiką, tačiau jo mechanizmai nebuvo žinomi. Todėl buvo pasiūlyta specifinių T-suppressorinių ląstelių buvimas, tačiau šių ląstelių buvimas nebuvo patvirtintas eksperimentiškai ilgą laiką. Tik 1990-ųjų pabaigoje ir 2000-ųjų pradžioje buvo parodyta tam tikrų T-ląstelių buvimas, kuriam būdingas CD25 + FOXP3 + fenotipas ir veiksmingai slopino imuninį atsaką.

13. imunitetas, jo nespecifiniai ir konkretūs mechanizmai:

Adaptyvus (pasenęs, įgytas, specifinis) imunitetas turi galimybę atpažinti ir reaguoti į atskirus antigenus, jam būdingas kloninis atsakas, reakcijoje dalyvauja limfoidinės ląstelės, yra imunologinė atmintis, galimas automatinis agresija.

Klasifikuota į aktyvią ir pasyvią.

• Įgytas aktyvus imunitetas atsiranda po ligos ar po vakcinos skyrimo.
• Įgytas pasyvus imunitetas išsivysto, kai paruošti antikūnai į organizmą patenka į serumą arba perkeliami į naujagimį su motinos priešpieniu ar prenataliu.

Kita klasifikacija imunitetą skirsto į natūralų ir dirbtinį.

• Natūralus imunitetas apima įgimtą imunitetą ir įgytą aktyvų (po ligos), taip pat pasyvų imunitetą perduodant motinos antikūnus.
• Dirbtinis imunitetas apima įgytą aktyvumą po vakcinacijos (vakcinos skyrimas) ir įgytą pasyvųjį (serumo vartojimą).

Įgimtas (nespecifinis) imunitetas atsiranda dėl gebėjimo atpažinti ir neutralizuoti įvairius patogenus pagal labiausiai konservatyvų, bendrą jiems būdingą evoliucinio giminystės spektrą, prieš pirmą susitikimą su jais. 2011 m. Nobelio premija medicinoje ir fiziologijoje buvo apdovanota už naujų įgimto imuniteto mechanizmų tyrimą (Ralph Steinman, Jules Hoffman ir Bruce Byotler).

Tai daugiausia atlieka mieloidinių serijų ląstelės, neturi specifinio antigenų specifiškumo, neturi kloninio atsako, neturi atminties pirminio kontakto su svetimu agentu.

14. Mononuklidinė fagocitinė sistema:

Mononuklidinių fagocitų sistema (graikų monoksas vienas + lat. Nucleos branduolys: graikų pagos gaudantis, sugeriantis + gistolio ląstelė; sinonimas: makrofagų sistema, monocitų makrofagų sistema) - ląstelių fiziologinė gynybos sistema, gebanti absorbuoti ir virškinti svetimas medžiagas. Šią sistemą sudarančios ląstelės turi bendrą kilmę, joms būdingas morfologinis ir funkcinis panašumas ir yra visuose kūno audiniuose.

Šiuolaikinės mononuklidinių fagocitų sistemos sampratos pagrindas yra I.I. Mechnikovas XIX a. Pabaigoje ir vokiečių patologo Aschoffo (K.A.L. Aschoffo) mokymas apie retikuloendotelinę sistemą (AE). Iš pradžių AEI buvo izoliuota morfologiškai kaip kūno ląstelių, galinčių kaupti gyvybiškai svarbų karminą, sistema. Tuo remiantis, AEI buvo priskirti jungiamojo audinio histiocitai, kraujo monocitai, kupfero kepenų ląstelės, taip pat kraujo formuojančių organų retikulinės ląstelės, kapiliarų endotelio ląstelės, kaulų čiulpų ir limfmazgių sinusai. Susikaupus naujoms žinioms ir tobulinant morfologinius tyrimo metodus, tapo aišku, kad idėjos apie retikuloendotelinę sistemą yra neaiškios, nespecifinės, o daugelyje nuostatų - klaidingos. Pavyzdžiui, ilgą laiką fagocitinių ląstelių šaltinio vaidmuo buvo priskirtas retikulinėms ląstelėms ir kaulų čiulpų ir limfmazgių sinusų endoteliui, kuris pasirodė esąs neteisingas.

Dabar nustatyta, kad mononukliniai fagocitai kilę iš cirkuliuojančių kraujo monocitų. Monocitai brandinami kaulų čiulpuose, tada patenka į kraujotaką, iš kur jie migruoja į audinius ir serozines ertmes, tapdami makrofagais. Retikulinės ląstelės atlieka palaikomąją funkciją ir sukuria vadinamąją hematopoetinių ir limfoidinių ląstelių mikroaplinką. Endotelio ląstelės transportuoja medžiagas per kapiliarines sienas. Retikulinės ląstelės ir kraujagyslių endotelis nėra tiesiogiai susiję su ląstelių apsaugine sistema. 1969 m. Leideno konferencijoje, skirtame REC problemai, „retikuloendotelinės sistemos“ sąvoka buvo laikoma pasenusi. Vietoj to ji priėmė mononuklinių fagocitų sistemos koncepciją. Iki šios sistemos yra histiocytes jungiamojo audinio, Kupfferio ląstelės kepenų (Žvaigždėtasis retikuloendoteliotsity), alveolių makrofaguose, plaučių makrofagai limfmazgiai, blužnis, kaulų čiulpuose, pleuros ir pilvaplėvės makrofaguose, osteoklastai kauliniame audinyje, mikroglijai nervų audinių sinovijos sinovijos membraną, odos ląstelių Langergaisa, pigmentiniai granuliuotieji dendrocitai. Yra nemokamų, t.y. judėjimas per audinius ir fiksuoti (rezidentiniai) makrofagai, turintys palyginti nuolatinę vietą.

Audinių ir serologinių ertmių makrofagai pagal nuskaitymo elektronų mikroskopiją turi formą arti sferinės, su nevienodu sulankstytu paviršiumi, kurį sudaro plazmos membrana (citolemma). Auginimo sąlygomis makrofagai išplito ant substrato paviršiaus ir įgauna plokščią formą, o judėjimo metu jie sudaro kelias polimorfines pseudopodijas.

Tipiškas makrofagų ultrastruktūros bruožas yra daugelio lizosomų ir fagolizosomų, arba virškinimo vakuolų, buvimas jo citoplazmoje. Lizosomose yra įvairių hidrolizinių fermentų, užtikrinančių absorbuotos medžiagos virškinimą. Makrofagai yra aktyvios sekrecinės ląstelės, kurios išskiria fermentus, inhibitorius ir papildo komponentus į aplinką. Pagrindinis makrofagų sekrecijos produktas yra lizocimas. Aktyvinti makrofagai išskiria neutralią proteinazę (elastazę, kolagenazę), plazminogeno aktyvatorius, komplemento faktorius, tokius kaip C2, C3, C4, C5, taip pat interferoną.

Mononuklidinių fagocitų sistemos ląstelėse yra daug funkcijų, pagrįstų jų gebėjimo endocitoze, t.y. pašalinių dalelių ir koloidinių skysčių absorbcija ir virškinimas. Dėl šio gebėjimo jie atlieka apsauginę funkciją. Per chemotaksą, makrofagai migruoja į infekcijos ir uždegimo židinius, kur atlieka mikroorganizmų fagocitozę, jų žudymą ir virškinimą. Lėtinio uždegimo sąlygomis gali atsirasti specialios fagocitų formos - epiteliozės ląstelės (pavyzdžiui, infekcinėje granulomoje) ir milžiniškos daugiasluoksnės Pirogovo-Langkhano ląstelių tipo ląstelės ir svetimkūnių ląstelių tipas. kurios yra susidariusios sujungus atskirus fagocitus į polykaryoną - daugiašalę ląstelę. Granulomos, makrofagai gamina glikoproteino fibronektiną, kuris pritraukia fibroblazius ir prisideda prie sklerozės vystymosi.

Ląstelės Mononuklidinė fagocitų sistema dalyvauja imuniniuose procesuose.

Taigi, būtina sąlyga imuninio atsako formavimui yra pirminė makrofago sąveika su antigenu. Tuo pačiu metu makrofagas antigeną absorbuoja ir apdoroja į imunogeninę formą. Imuninė limfocitų stimuliacija vyksta tiesiogiai kontaktuojant su makrofagu, turinčiu transformuotą antigeną. Imuninis atsakas paprastai atliekamas kaip kompleksinė daugiapakopė G ir B limfocitų sąveika su makrofagais.

Makrofagai turi priešnavikinį aktyvumą ir turi citotoksinių savybių prieš naviko ląsteles. Šis aktyvumas yra ypač ryškus vadinamuosiuose imuninės makrofaguose, kurie vykdo naviko tikslinių ląstelių lizę kontaktuodami su jautriais T limfocitais, turinčiais citofilinius antikūnus (limfinus).

Mononuklidinės fagocitų sistemos ląstelės dalyvauja reguliuojant mieloidinę ir limfoidinę kraujotaką. Taigi, kraujo salelės raudonosios kaulų čiulpuose, blužnies, kepenų ir embriono trynio sultyje susidaro aplink tam tikrą ląstelę - centrinę makrofagą, kuri organizuoja eritroblastinės salelės eritropoezę. Kupfero kepenų ląstelės dalyvauja reguliuojant kraują gaminant eritropoetiną. Monocitai ir makrofagai gamina veiksnius, skatinančius monocitų, neutrofilų ir eozinofilų gamybą. Kankinimosi liaukoje (tymų liaukoje) ir nuo limfoidinių organų tomis priklausančiose zonose randamos vadinamosios tarpsisteminės ląstelės - specifiniai strominiai elementai, taip pat priklausantys mononuklidinių fagocitų sistemoms, atsakingoms už limfocitų migraciją ir diferenciaciją.

Makrofagų mainų funkcija yra jų dalyvavimas geležies metabolizme.

Ląstelėje ir kaulų čiulpuose makrofagai atlieka eritrofagocitozę, o juose yra geležies kaupimasis hemosiderino ir feritino pavidalu, kurį slaugytojas gali pakartotinai panaudoti eritroblastais.

15. Leukocitas ir jo rūšys. Leukopenija:

Leukocitų formulė yra tam tikrų tipų leukocitų procentas periferiniame kraujyje. Leukocitų formulė yra modifikuota tam tikru būdu, būdinga kiekvienai konkrečiai ligai. Leukocitai su įvairiomis ligomis, dažnai su infekcijomis, keičiami kiekybiškai.

Leukocitų skaičiaus padidėjimas - leukocitozė, sumažėjimas - leukopenija.

Leukocitozė gali būti fiziologinė ir patologinė, pirmoji pasireiškia sveikiems žmonėms, antrasis - su tam tikromis skausmingomis sąlygomis. Leukocitozė yra kraujo ląstelių sudėties pokytis, kuriam būdingas leukocitų skaičiaus padidėjimas. Leukocitų kiekis kraujyje yra 3,5–8,8 × 109 / l, tačiau šis indikatorius gali skirtis aukštyn arba žemyn, priklausomai nuo laboratorijos ir naudojamų metodų.

Leukocitozė gali būti fiziologinė ir patologinė, pirmoji pasireiškia sveikiems žmonėms, antrasis - su tam tikromis skausmingomis sąlygomis. Fiziologinės funkcijos apima maistinę leukocitozę (po valgymo), miogeninį (po fizinio streso), nėščių moterų leukocitozę ir kt. Jis taip pat pastebimas su audinių nekroze (miokardo infarktas, naviko dezintegracija), po didelių kraujavimų, žaizdų, galvos traumų ir pan. Paprastai leukocitozė išnyksta kartu su priežastimi, dėl kurios atsirado. Pereinamoji leukocitozė, būdinga nesubrendusių leukocitų atsiradimui kraujyje, vadinama leukemoidine reakcija.

Leukopenija yra leukocitų kiekio kraujyje sumažėjimas kai kuriose infekcinėse ir kitose ligose, taip pat dėl ​​radiacinės žalos, medikamentų ar reflekso poveikio kaulų čiulpams.

Radiacinės žalos, sąlyčio su daugeliu cheminių medžiagų (benzeno, arseno, DDT ir tt) priežastis - leukopenija; vaistų vartojimas (citostatiniai vaistai, kai kurie antibiotikų tipai, sulfonamidai ir tt). Leukopenija atsiranda, kai virusinės ir sunkiai tekančios bakterinės infekcijos, kraujo sistemos ligos.

Kai reikia tiksliai nustatyti ligos priežastį, reikia leukopenijos. Kartu su virusinėmis infekcijomis ir kraujo formuojančių organų ligomis, alopatinių vaistų šalutinis poveikis gali sukelti leukopeniją, nes daugelis vaistų turi toksišką poveikį kaulų čiulpams ir gali sukelti alerginius mechanizmus leukopenijai ir agranulocitozei.

Gydymą sudaro vaistų skyrimas, skatinantis naujų leukocitų vystymąsi arba stimuliuojant brandinamų baltųjų kraujo kūnelių išsiskyrimą.

16. Leukopoesio reguliavimas:

Leukopoezės reguliavimas. Leukocitinų gamybą skatina leukopoetinai, kurie atsiranda po to, kai iš kraujo greitai pašalinamas didelis skaičius leukocitų. Cheminių savybių ir susidarymo vieta leukopoetinų organizme dar nėra ištirtas. Nukleino rūgštys, audinių skilimo produktai, atsiradę žalos ir uždegimo metu, ir kai kurie hormonai skatina leukopoezę. Taigi, esant hipofizės hormonų - adrenokortikotropinio hormono ir augimo hormono - poveikiui, padidėja neutrofilų skaičius ir sumažėja eozinofilų skaičius kraujyje.

Nervų sistema atlieka svarbų vaidmenį stimuliuojant leukopoezę. Simpatinių nervų dirginimas sukelia neutrofilinių leukocitų padidėjimą kraujyje. Ilgalaikis makšties nervo dirginimas sukelia leukocitų persiskirstymą kraujyje: jų kiekis padidėja mezenterinių kraujagyslių kraujyje ir sumažėja periferinių kraujagyslių kraujas; dirginimas ir emocinis susijaudinimas padidina leukocitų kiekį kraujyje. Po valgymo padidėja kraujagyslių kraujyje esančių leukocitų kiekis. Esant tokioms sąlygoms, taip pat raumenų ir skausmingų dirgiklių metu, į kraują patenka kaulų čiulpų blužnies ir sinusų leukocitai.