Principas Leukocitų skaičiavimas mikroskopijos metu tam tikru skaičiavimo kameros kvadratų skaičiumi ir jų skaičiaus apskaičiavimas 1 litro kraujo, atsižvelgiant į kraujo praskiedimą ir skaičiavimo kameros tūrį.
Reagentas: 3-5% acto rūgšties tirpalo, tamsintas dažytiems leukocitų branduoliams su keliais lašais metileno mėlynojo tirpalo. Tirpalas yra mėlynos spalvos, gali būti laikomas ilgą laiką.
Nustatymo eiga. Į sausą bandomąjį mėgintuvėlį supilkite 0,4 ml acto rūgšties tirpalo. Iš piršto surenkama 0,02 ml kraujo (galite naudoti antikoagulianto stabilizuotą venų kraują). Nuvalykite pipetės antgalį, tada išpurškite kraują iš mėgintuvėlio dugno, sumaišykite, iš naujo surinkite ir išpurškite kraujo ir reagento mišinį (pipetę). Ženklinkite mėgintuvėlį ir palikite jį iki skaičiavimo. Laikyti kraujo mišinį su acto rūgšties tirpalu rekomenduojama ne ilgiau kaip 2–4 valandas.
Kraujo tirpalas praskiedžiamas acto rūgštimi, kruopščiai sumaišomas ir užpildomas skaičiavimo kamera. Užpildyta kamera paliekama horizontalioje padėtyje 1 min., Kad nusodintų baltųjų kraujo kūnelių. Keičiant fotoaparato horizontalią padėtį, jie įdedami į mikroskopo stalą ir mažu didinimu (okuliaras 10 ×, objektyvas 8 ×) skaičiuoja baltus kraujo kūnus 100 didelių kvadratų, kurie atitinka 1600 mažų.
Siekiant didesnio tikslumo, leukocitai skaičiuojami per tinklelį dideliuose kvadratuose, neskirstytuose į mažus kvadratus ir juosteles, pradedant nuo viršutinio kairiojo tinklo kampo. Norėdami geriau kontrastuoti, patamsinkite matymo lauką, nuleiskite kondensatorių ir uždarykite diafragmą. Skaičiuojamos kvadrato viduje esančios ir ant bet kurios dvi linijos esančios ląstelės, kad nebūtų skaičiuojamas tas pats langelis du kartus.
Leukocitų skaičiavimas atliekamas pagal formulę:
kur X yra leukocitų skaičius 1 μl kraujo; ir - leukocitų skaičius 100 didelių kvadratų; 20 - kraujo skiedimas; 100 yra didelių kvadratų skaičius; 250 yra 1 μl konversijos koeficientas, nes vieno didelio kvadrato tūris yra 1/250 μl (kvadrato pusė yra 1/5 mm, aukštis 1/10 mm).
Praktiškai, norint apskaičiuoti leukocitų skaičių 1 μl kraujo, jų skaičius 100 didžiųjų kvadratų padauginamas iš 50, o 1 litre - gauta vertė dauginama iš 106.
Pastaba Skaičiuojant leukocitus, 6-8% atvejų klaida yra neišvengiama.
- Kadangi periferiniame kraujyje yra daug normocitų, jie skaičiuojami pagal leukocitų (tiek leukocitų, tiek normocitų - branduolinių ląstelių) skaičių. Siekiant tinkamai nustatyti leukocitų skaičių, iš bendro branduolinių kraujo ląstelių skaičiaus turėtų atimti normocitų skaičių.
- Likusios klaidos yra panašios į tas, kurios atsiranda apskaičiuojant raudonųjų kraujo kūnelių skaičių skaičiavimo kameroje.
Leukocitų skaičius
Skaičiavimo metodas fotoaparate. Vamzdžių metodu gaunamas kraujas ir skiedimas. Į mėgintuvėlį įpilama 0,4 ml skiediklio skysčio ir 0,02 ml kapiliarinio kraujo (pageidautina Vidalevskaya). Gautas praskiedimas praktiškai laikomas 1:20: 3-5% etilo rūgšties tirpalo, dažyto metileno mėlyną, paprastai naudojamas kaip skiediklis (acto rūgšties lizės eritrocitai, metileno mėlynas dėmes su leukocitų branduoliais). Prieš užpildant kamerą, Goryaeva mėgintuvėlis su praskiestu krauju yra kruopščiai pakratomas. Kamera pripildoma taip pat, kaip ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičiavimas.
Leukocitai yra daug mažesni nei eritrocitai (nuo 1 iki 2 didelių kvadratų), todėl, siekiant tikslumo, skaičiavimai atliekami 100 didelių kvadratų (nesurūšiuoti). Skaičiavimas: 100 didelių kvadratų (1600 mažų) skaičiuojami kaip leukocitai.
Nepamirštant, kad mažo kvadrato tūris yra 1/4000 mm3, o kraujas yra praskiedžiamas 20 kartų, skaičiuojamas leukocitų skaičius 1 μl kraujo: 4000 20 ir padalintas iš 1600 = a x 1/2. Praktiškai, norint gauti faktinį leukocitų kiekį 1 μl kraujo, pakanka padalinti į pusę skaičiaus gauto skaičiaus ir pridėti 2 nulius. Vidutinė metodo klaida yra ± 7%.
Tikslesnis (2-3% klaida) ir tobulas yra leukocitų skaičius naudojant elektroninius prietaisus. Leukocitų skaičiavimas kietųjų dalelių skaitikliai atliekamas pagal tą patį principą kaip ir eritrocitai. Išankstinis kraujas praskiedžiamas ir sumaišomas su bet kokiais raudonųjų kraujo ląstelių tirpikliais. „Technicon“ autoanalizatoriuje naudojamas kaip acto rūgšties tirpalas „Culter“ ir „Celloskop“ prietaisuose - saponinas arba sapoglobinas, kuris yra atskiestas (1: 500, 1: 700) izotoniniu natrio chlorido tirpalu (6 lašai 20 ml) veisimas).
Kraujo leukocitų skaičiavimas atliekamas dažytomis periferinio kraujo tepinėlėmis.
Geriau skaičiuoti nuo ploniausio taško, esančio netoli tepinėlės pabaigos, bent 200 ląstelių (išskyrus ryškią leukopeniją), o tada nustatyti tam tikrų tipų baltųjų kraujo kūnelių procentinį santykį. Skaičiavimas yra rekomenduojamas ta pačia tvarka: pusė ląstelių turi būti skaičiuojama viršutinėje pusėje, pusė insulto apačioje, nesikreipiant į pačią kraštą ir vidurį, zigzagavimas (3-4 regėjimo laukai išilgai insulto, 3-4 laukai stačiu kampu iki insulto vidurio) tada 3-4 laukus į šoną, lygiagrečią su kraštu, vėl stačiu kampu į viršų ir pan. į vieną pusę).
Tepalų paruošimas. Atsargiai nuplaunamas ir riebaluotasis stiklas (jo kraštas) liečia injekcijos vietą. Tepimas daro šlifavimo stiklą, įdėjus jį 45 ° kampu į stiklą prieš lašas. Atnešę stiklą į šį lašą, jie laukia, kol kraujas plečiasi išilgai jo krašto, tada greitai judant jie atlieka šlifavimo stiklą į priekį.
Tinkamai išteptas tepalas turi gelsvos spalvos (plonas), nepasiekia stiklo kraštų ir baigiasi pėdsakais (ūsai).
Sausų tepalų dažymas, susidaręs po preliminarios fiksacijos. Geriausias fiksavimas pasiekiamas absoliučiu metileno alkoholiu (3-5 min.) Arba Nikiforov mišinyje, kuriame yra lygios absoliučios etanolio ir eterio dalys (30 minučių).
Pagrindiniai hematologiniai dažai yra metileno mėlynas ir jo darinys - azure I (metileno žydras) ir azure II (vienodų Azure I ir metileno mėlynųjų dalių mišinys) iki rūgštinės vandenyje tirpios geltonosios eozino.
● Romanovsky-Giemsa tapyba. Romanovsky-Giemsa dažai (gamykloje pagaminti) yra tokie: Azur II - 3 g, vandenyje tirpus geltonas eozinas - 0,8 g, metilo alkoholis - 250 ml ir glicerinas - 250 ml. Darbinis dažų tirpalas paruošiamas 1,5-2 lašų galutinio dažų 1 ml distiliuoto vandens. Dažai pilami į tepinėlį su galbūt aukštesniu sluoksniu; dažymo laikas - 30-35 min Po šio laikotarpio tamponai plaunami vandeniu ir džiovinami ore. Šiuo metodu galima gerai atskirti branduolį, tačiau neutropilinis citoplazmos granuliacija yra daug blogesnė, todėl jis plačiai naudojamas periferiniam kraujo tepimui.
● Kombinuotas May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa dažymas pagal Pappenheimą. Gautas dažiklis, gegužės-Grunwaldo fiksatorius, kuris yra eozinmetileno mėlynojo tirpalo metileno alkoholyje tirpalas, pipetuojamas ant fiksuoto tepalo 3 minutes. Po 3 minučių į tirpalą dengiantį dažą pridedamas vienodas kiekis distiliuoto vandens, o dažymas tęsiamas dar 1 minutę. Po to dažai nuplaunami ir tepalas išdžiovinamas ore. Tada išdžiovinti tepinėliai perpilami šviežiai paruoštu vandeniniu Romanovsky dažų tirpalu 8-15 minučių. Šis metodas laikomas geriausiu, ypač tepinėliams, kuriuose yra čiulpų.
Leukocitų skaičiaus padidėjimas periferiniame kraujyje virš normalaus lygio vadinamas leukocitoze, sumažėjimas vadinamas leukopenija. Leukocitozei (leukopenijai) retai būdingas proporcingas visų rūšių leukocitų skaičiaus padidėjimas (sumažėjimas), pavyzdžiui, leukocitozė su kraujo sutirštėjimu. Daugeliu atvejų padidėja bet kurio tipo ląstelių skaičius (sumažėjimas). Atskirų tipų leukocitų kiekio kraujyje padidėjimas arba sumažėjimas gali būti santykinis arba absoliutus, priklausomai nuo bendro leukocitų skaičiaus - normalus, padidėjęs arba sumažėjęs. Leukocitų skaičiaus, individualių formų ir morfologijos santykio pokytis priklauso nuo patogeno tipo ir virulentiškumo, patologinio proceso pobūdžio, eigos ir apimties, individualios organizmo reakcijos.
Leukocitų skaičiavimo metodas Goryaev kameroje
Baltųjų kraujo kūnelių - baltųjų kraujo kūnelių - vaidmuo svarbi organizmo antimikrobinei apsaugai. Granulocitai fagocitizuoja mikrobus ir juos sunaikina fermentais, uždengtais granulėmis, limfocitai gamina antikūnus ir imuninį atsaką į organizmą.
Bandymo metodo nustatymo metodas: įpilkite į mėgintuvėlį 0,4 ml Türk tirpalo (Türko skystis turi acto rūgšties, kad sunaikintų raudonuosius kraujo kūnelius ir metileno mėlyną, kad būtų galima nuslopinti leukocitų branduolius). Naudokite kapiliarinę pipetę 0,02 ml kraujo traukimui iš šviežio lašelio, švelniai išpurškite jį į mėgintuvėlį su reagentu ir nuplaukite pipetę. Gerai išmaišykite. Tuo pačiu metu kraujo skiedimas yra 20 kartų. Apvalaus stiklo strypo gale surenkamas atskiesto kraujo lašas ir dedamas į poliruoto stiklo kameros kraštą.
Skaičiavimas atliekamas 100 didelių nepertraukiamų kvadratų, sudėti keturis. Naudojamas nedidelis padidėjimas.
Skaičiavimo formulės Nr. 1 išvedimas.
1. 100 kvadratų yra 1600 mažų kvadratų (16x100)
2. Kraujo tūris virš mažo kvadrato 1/4000 mm3
3. 20 kartų kraujo skiedimas
Leukocitų skaičius 1 μl kraujo = -4000-20. = Ax 50
Pavyzdžiui: 100 leukocitų buvo skaičiuojami 100 didelių Goryaev tinklelio kvadratų. 1 μl kraujo leukocitų skaičius bus 130 x 50 = 6500 arba 6,5-10 3.
Siekiant nustatyti leukocitų kiekį 1 litrui kraujo, leukocitų skaičius, išreikštas tūkstančiais, turi būti padaugintas iš 10 9.
Mūsų pavyzdyje leukocitų skaičius 1 litro kraujo yra 6,5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru nėra skelbiamų medžiagų autorius. Bet suteikia galimybę nemokamai naudotis. Ar yra autorių teisių pažeidimas? Rašykite mums | Atsiliepimai.
Išjungti adBlock!
ir atnaujinkite puslapį (F5)
labai reikalinga
Leukocitų kiekis kraujyje
Leukocitozė gali būti absoliuti (tiesa) ir santykinė (perskirstymo).
Absoliutinė leukocitozė stebima ūminiuose uždegiminiuose procesuose, audinių nekrozėje, ūminėse bakterinėse infekcijose (išskyrus vidurių šiltinės, bruceliozės, tularemijos ir kt.), Alerginių ligų, piktybinių navikų (su audinių naikinimu), uždarytų galvos traumų ir hemoragijų smegenyse, diabetu. ureminė koma, šokas, ūminis kraujo netekimas, kaip pirminė reakcija - su radiacine liga. Esant leukemijai, žymiai padidėja leukocitų skaičius.
Santykinis (perskirstymo) yra leukocitų gavimo iš kraujo srauto iš organų, kurie tarnauja jos depo. Jis pasireiškia po valgymo (maisto leukocitozės), karšto ir šalto vonios, stiprios emocijos (vegetovaskulinė leukocitozė), intensyvus raumenų darbas (miogeninė leukocitozė) ir tt
Leukopenija Leukopenija laikoma kaulų čiulpų funkcinio gebėjimo slopinimu, kurį sukelia toksinės medžiagos (arsenas, benzenas ir kt.), Kai kurie vaistai (sulfanilamidai, chloramfenikolis, butadionas, imuninė, ciklofosfamidas ir kt.), Virusai (gripas, virusinis hepatitas). tymų ir kt.), mikrobų (vidurių šiltinės, bruceliozės ir kt.), jonizuojančiosios spinduliuotės, rentgeno spindulių ir hipersplenizmo (padidėjusios blužnies funkcijos).
Leukocitozei ir leukopenijai retai būdingas proporcingas visų tipų leukocitų skaičiaus padidėjimas (sumažėjimas) (pvz., Leukocitozė su kraujo sutirštinimu); daugeliu atvejų yra padidėjęs (sumažėjęs) bet kurio tipo ląstelių skaičius, todėl vartojami terminai "neutrofilija", "neutropenija", "limfocitozė", "limfopenija", "eozinofilija", "eozinopenija", "monocitozė", "monocitopenija"., "Basofilija".
Atliekant leukocitų skaičiaus pokyčių klinikinį įvertinimą, labai svarbus procentas yra atskirų leukocitų, ty leukocitų formulės, procentinis santykis.
Sveiko žmogaus leukocitų kiekis kraujyje:
Santykinė suma Absoliuta suma
Bazofilai ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l
Eozinofilai …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l
Neutrofilai: - mielocitai............. 0%
- nuskustas... 1-6% 0,040-0,300 x 10 9 / l
- segmentuotas….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l
Limfocitai …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L
Monocitai ……………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L
Leukocitų skaičiavimas atliekamas dažytomis periferinio kraujo tepinėlėmis. Norint teisingai interpretuoti leukocitų formulės tyrimo rezultatus, rekomenduojama skaičiuoti absoliučiais kiekiais, bet ne santykiniais. Dažniausiai pasitaikantys Romanovsky-Giemsa, Pappenheimo tapybos metodai. Panardinus, skaičiuojama mažiausiai 200 ląstelių, o tada gaunamas tam tikrų tipų leukocitų procentinis santykis. Leukogramos analizė, atsižvelgiant į kitus kraujo parametrus ir klinikinį vaizdą, yra vertingas tyrimo metodas, jis padeda diagnozuoti ir nustatyti ligos prognozę.
Pagrindinės neutrofilijos priežastys.
Ūminės bakterinės infekcijos - lokalizuotos ir apibendrintos.
Audinių uždegimas arba nekrozė.
Vaistų poveikis (kortikosteroidai).
Pagrindinės neutropenijos priežastys.
Infekcijos - bakterinė (vidurių šiltinė, bruceliozė, tularemija, paratifoidinis karščiavimas) ir virusas (infekcinis hepatitas, tymai, gripas, raudonukė ir kt.).
Miototoksinis poveikis ir granulocitopoezės slopinimas (jonizuojančioji spinduliuotė; cheminiai veiksniai - benzenas, anilinas, DDT; vaistinis poveikis - citostatikai ir imunosupresantai; vitaminas B;12-folio rūgšties trūkumo anemija, ūminė aleukeminė leukemija, aplastinė anemija).
Antikūnų ekspozicija (imuninės formos) - padidėjęs jautrumas vaistams, autoimuninės ligos (SLE, reumatoidinis artritas, lėtinė limfinė leukemija), izoimuninės apraiškos (naujagimio hemolizinė liga).
Perskirstymas ir nusėdimas organuose - šoko sąlygos, ligos, turinčios splenomegalia ir hipersplenizmas.
Paveldimos formos (šeiminė gerybinė lėtinė neutropenija).
Pagrindinės eozinofilijos priežastys.
Parazitinės invazijos (trichinozė).
Lėtiniai odos pažeidimai - psoriazė, pemphigus, egzema.
Navikai (eozinofiliniai leukemijos variantai).
Kitos ligos - fibroplastinis endokarditas Lefflera, skarlatina.
Infekcijų ir uždegiminių ligų atkūrimo fazėje (palankus prognozinis ženklas).
Eozinopenijos (aneozinofilijos) priežastys.
Padidėjęs adrenokortikosteroidų aktyvumas organizme.
Pagrindinės bazofilijos priežastys:
Lėtinė mieloidinė leukemija ir eritremija.
Pagrindinės monocitozės priežastys.
Subakutinės ir lėtinės bakterinės infekcijos.
Parazitinės infekcijos - leishmaniasis, maliarija.
Hemoblastozė - monocitinė leukemija, limfogranulomatozė, limfomos.
Kitos sąlygos yra SLE, sarkoidozė, reumatoidinis artritas, infekcinė monocitozė; po splenektomijos atsigaunant nuo infekcijų, paliekant agranulocitozę.
Monocitų skaičiaus sumažėjimas yra svarbus vertinant limfocitų monocitinį santykį plaučių tuberkulioze.
Pagrindinės limfocitozės priežastys.
Infekcijos - ūminė virusinė (infekcinė mononukleozė, tymų, raudonukės, vėjaraupiai), lėtinė bakterinė (tuberkuliozė, sifilis, bruceliozė), pirmuonis (toksoplazmozė).
Hemoblastozė (limfocitinė leukemija, limfoma).
Kitos ligos - hipertirozė, Adisono liga, vitaminas B12-folio trūkumo anemija, hipo ir aplastinė anemija.
Limfocitopenija stebima SLE, Hodžkino liga, plačiai paplitusi limfmazgių tuberkuliozė, inkstų nepakankamumo galutinis etapas, ūminė spinduliuotės liga, imunodeficito būsenos, vartojant gliukokortikoidus.
Tam tikrų tipų leukocitų kiekio kraujyje padidėjimas arba sumažėjimas gali būti santykinis arba absoliutus. Jei pasikeičia tik tam tikro tipo baltųjų kraujo kūnelių kiekis, tada atsiranda santykinė neutrofilija, santykinė eozinopenija ir kt. Absoliutus bet kokio tipo leukocitų kiekis, t. Y. Šių ląstelių kiekis viename tūrio vienete, padidėjimas arba sumažėjimas vadinamas absoliučia neutrofilija, absoliučia eozinopenija ir kt.
Formulės perkėlimas į kairę (didinant jaunų neutrofilų formų skaičių) yra uždegimo arba nekrotinio proceso požymis organizme.
Leukocitų formulės poslinkis dešinėje yra būdingas radiacinei ligai ir B vitaminui12-folio rūgšties trūkumo anemija.
Visų tipų granuliuotų leukocitų - granulocitų (neutrofilų, eozinofilų, bazofilų) nebuvimas ar reikšmingas sumažėjimas žymimas terminu agranulocitozė. Priklausomai nuo atsiradimo mechanizmo, išskiriami mielotoksiniai (jonizuojančiosios spinduliuotės, citostatinio suvartojimo) ir imuninės sistemos (hapeno ir autoimuninės agranulocitozės).
Leukocitai (leucocytus)
Leukocitai. Leukocitų kiekybinis nustatymas. Leukocitų skaičiavimas naudojant kamerą Goryaeva. Kiekybinis leukocitų kiekis. Leukocitozė.
Baltųjų kraujo kūnelių
Leukocitų kiekis kraujyje priklauso nuo jų susidarymo greičio ir nuo jų mobilizacijos iš kaulų čiulpų, taip pat nuo jų panaudojimo ir migracijos į audinius (į pažeidimus), plaučių ir blužnies paėmimo. Šiuos procesus savo ruožtu įtakoja daugybė fiziologinių veiksnių, todėl leukocitų skaičius sveiko žmogaus kraujyje svyruoja: jis pakyla iki dienos pabaigos, fizinio krūvio metu, emocinis stresas, baltymų maisto vartojimas ir staigūs aplinkos temperatūros pokyčiai.
Leukocitų kiekybinis nustatymas
Leukocitai skaičiuojami naudojant „Goryaev“ kamerą ir naudojant automatinius skaitiklius.
Leukocitų skaičiavimas naudojant kamerą Goryaeva
In vitro metodas leukocitų skaičiavimui:
- Į mėgintuvėlį pilamas 0,4 ml 3-5% acto rūgšties tirpalo, padengto metileno mėlyną. Naudokite kapiliarinę pipetę 20 μl kraujo traukimui iš šviežio lašelio (praskiedimo 20 kartų), atsargiai jį išpurškite į mėgintuvėlį reagentu ir išplaukite pipetę. Gerai išmaišykite;
- švarus ir sausas stiklas patenka į kamerą taip, kad kontaktiniame taške susidarytų vaivorykštės žiedai;
- kraujo tirpalas praskiedžiamas mėgintuvėlyje, gerai išmaišykite. Apvalaus stiklo strypo galas užima vieną lašą kraujo ir patenka į poliruoto kameros stiklo kraštą;
- užpildžius kamerą, jis paliekamas 1 min. ramybėje leukocitų nusėdimui;
- Leukocitai laikomi mažu didinimu (objektyvas × 8 arba × 9, okuliaras × 10 arba × 15) su tamsiu matymo lauku (su sumažintu kondensatoriumi arba susiaurėjusia diafragma);
- patenkinamų rezultatų leukocitai skaičiuojami 100 didelių kvadratų.
Žinant didelio kvadrato tūrį ir kraujo praskiedimo laipsnį, suraskite leukocitų skaičių 1 μl ir 1 l kraujo. Didelės aikštės pusė yra 1/5 mm, plotas yra 1/25 mm2, erdvės tūris virš šio kvadrato yra 1/250 mm3.
Baltųjų kraujo kūnelių skaičiavimo formulė:
kur B yra leukocitų skaičius 100 didelių kvadratų;
P - praskiedimo laipsnis (20).
Leukocitų skaičius
Standartas: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Skambinama leukocitų, viršijančių 9,0 × 10 9 / l, skaičius
leukocitozė, jų skaičiaus sumažėjimas mažesnis nei 4,0 × 10 9 / l - leukopenija. Tačiau net 3,5 × 10 9 1 l leukocitų daugeliui asmenų gali būti norma. Remiantis literatūra, tokie žmonės turi didesnį atsparumą imunitetui ir yra mažiau linkę susirgti, o tai atrodo dėl to, kad reikia imuninio atsako į leukocitų rezervą audiniuose, kuriuose yra 50–60 kartų daugiau nei kraujyje. Akivaizdu, kad sveikų asmenų, kuriems periferiniame kraujyje yra mažas baltųjų kraujo kūnelių kiekis, jų atsargos audiniuose atitinkamai padidėja. Šis reiškinys paaiškinamas paveldimu ir šeimos pobūdžiu arba padidėjusiu parazimpatinės nervų sistemos poveikiu.
Leukopenija gali būti funkcionali ir ekologiška.
Funkcinė leukopenija yra susijusi su kraujo formavimosi reguliavimu ir stebima:
- kai kurios bakterinės ir virusinės infekcijos (vidurių šiltinė, gripas, raupai, raudonukė, Botkin liga, tymai);
- veikiant vaistams (sulfonamidams, analgetikams, prieštraukuliniams vaistams, antitiroidiniams, citostatiniams ir kitiems vaistams);
- raumenų darbo metu, užsienio baltymų įvedimas, nervų ir temperatūros poveikis, badas, hipotoninės būsenos;
- Ilgalaikio kraujo laikymo kambario temperatūroje (daugiau nei 4 valandos) gali būti siejama su klaidinga leukocitopenija.
Organinė leukopenija, atsiradusi dėl kaulų čiulpų aplazijos ir jos pakeitimo riebaliniu audiniu, atsiranda, kai:
- aplastinė anemija;
- agranulocitozė;
- leukopeninė leukemija;
- kai kurios Hodžkino ligos formos;
- jonizuojančiosios spinduliuotės;
- hipersplenizmas (pirminis ir antrinis);
- kolageno ligos.
Leukocitozė
Leukocitozė yra kraujodaros sistemos reakcija į poveikį
egzogeniniai ir endogeniniai veiksniai. Yra fiziologinė ir patologinė leukocitozė.
Fiziologinė leukocitozė yra:
- virškinimas - po valgymo, ypač daug baltymų; leukocitų skaičius neviršija 10,0–12,0 × 10 9 / l, o po 3-4 valandų normalus;
- emocinis stresas (adrenalinas), stiprus fizinis krūvis, aušinimas, pernelyg didelis saulės poveikis (saulės nudegimas), daugelio hormonų (katecholaminų, gliukokortikosteroidų ir tt) skyrimas antroje nėštumo pusėje, menstruacijų metu ir dėl nevienodo leukocitų pasiskirstymo kraujyje pagrindinę.
Patologinė leukocitozė yra suskirstyta į absoliučią ir santykinę.
Absoliutus leukocitozė - leukocitų kiekio kraujyje padidėjimas iki kelių šimtų tūkstančių (100,0–600,0 × 10 9 / l ir daugiau).
- Dažniausiai pasireiškė leukemija: lėtine leukemija - 98–100% atvejų ūminėje leukemijoje - 50-60%. Leukocitų ląstelių santykio kaulų čiulpuose ir kraujo punktais santykis yra pagrindas leukemijos diagnozei.
Nustatyta santykinė leukocitozė:
- ūminiai uždegiminiai ir infekciniai procesai, išskyrus vidurių šiltinės, gripo, raupų, raudonukės, Botkin ligos, tymų. Didžiausia leukocitozė (iki 70,0–80,0 × 10 9 / l) stebima sepse;
- esant toksiškoms medžiagoms (vabzdžių nuodams, endotoksinams), jonizuojančiai spinduliuotei (iš karto po švitinimo);
- dėl kortikosteroidų, adrenalino, histamino, acetilcholino ir skaitmeninių preparatų poveikio;
- su audinių dezintegravimu (nekroze), miokardo infarktu, periferinių arterijų tromboze su gangrena, nudegimais, eksudaciniu pleuritu, perikarditu, uremija, kepenų koma;
- reikšmingas kraujo netekimas sužalojimuose, vidinis, ginekologinis ir kitas kraujavimas.
Leukocitų skaičiaus padidėjimas infekcinėse ligose daugeliu atvejų lydi leukocitų formulės perėjimą į kairę
Leukocitų skaičius ir leukocitų skaičius.
Leukocitų skaičiavimui kraujas praskiedžiamas maišytuvais arba mėgintuvėliuose. Šiam tikslui naudokite 3-5% acto rūgšties tirpalo (raudonųjų kraujo kūnelių naikinimui), tonuojant bet kokiu anilino dažikliu (leukocitų branduolių dažymui). Skaičiavimo tinklelis užpildomas taip pat, kaip ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičiavimas. Leukocitai skaičiuojami 100 didelių kvadratų. „Goryaev“ tinklelyje patogu juos suskaičiuoti į nepertraukiamus kvadratus (jų yra 100). Atsižvelgiant į kraujo praskiedimą ir skysčio tūrį virš kvadratų, apskaičiuokite pastovų daugiklį. Veisiant 20 kartų, tai 50.
Dirbdami su mėgintuvėliais, į juos įpilkite 0,38 ml skysčio ir į jį išleiskite 0,02 ml kraujo. Norint apskaičiuoti automatinį mėgintuvėlių skaičiavimą, raudonieji kraujo kūneliai hemolizuojasi saponinu. Normalus baltųjų kraujo kūnelių kiekis yra 4,3 • 10 9 - 11,3 • 10 9 / l arba 4300-11 300 1 μl kraujo.
Leukocitų skaičius skaičiuojamas dažytuose tepaluose.
Geras tepimas atitinka šiuos reikalavimus: jis yra plonas, o formos elementai yra viename sluoksnyje; šiuo atveju tepinėlis yra geltonas ir permatomas. Geras tepalas yra vienodas, o ląstelės nėra pažeistos. Kad kraujas ant stiklo būtų lygiai lygus, jis pašalinamas deginant dujų degiklį virš liepsnos arba laikomas alkoholio ir eterio mišinyje. Pasibaigus stiklui, jie paliečia šviežiai išleistą mažą kraujo lašą ir nedelsdami skleidžia ant stiklo. Prieš dažymą tepinėlį nustatoma panardinant į metanolį 3 minutes, etanolyje arba jo mišinyje su eteriu 30 minučių. Yra daug kitų fiksatorių. Po fiksavimo išdžiovintas tamponas pripildytas dažais.
Skirti kraujo ląsteles (leukocitų formulės apibrėžimus) taikyti diferencinį dažymą. Romanovsky-Giemsa dažniausiai naudojamas dažymas. Šis dažiklis yra silpnai rūgšties (eozino) ir silpnai šarminių (azure II) dažų mišinys. Ląstelės ir jų dalys, priklausomai nuo terpės reakcijos, suvokia vieną ar kitą dažų komponentą: rūgštinės (bazofilinės) medžiagos yra spalvos žydra mėlyna, šarminė (oksifilinė) eozino raudona; Neutralus suvokia tiek spalvas, tiek ir violetines.
Leukocitų formulė reiškia atskirų kraujo leukocitų formų procentinę dalį.
Norint pakankamai tiksliai apskaičiuoti, reikia peržiūrėti bent 200 baltųjų kraujo kūnelių.
Skaičiuojama naudojant panardinimo sistemą. Atsižvelgiant į tai, kad ląstelės yra netolygiai išdėstytos tepinėlėje (didesnės eina į kraštus), svarbu laikytis tokios judėjimo tvarkos tepinėlėje, kurioje jos kraštai ir vidurinė sritis būtų vertinami vienodai. Naudojamas vienas iš dviejų judėjimo būdų: vienas iš jų perkelia smūgį iš viršutinio krašto į apačią, perkelia 2–3 matymo laukus išilgai krašto, tada eina priešinga kryptimi į viršutinį kraštą ir tt Antruoju metodu jie pereina nuo krašto iki 5 —6 laukai iki insulto vidurio, tada tas pats kiekis į šoną, tada grįžta į kraštą, perkelti kelis laukus į šoną ir dar kartą pakartokite judėjimą, kol bus skaičiuojamos 50 ląstelių. Žiūrėkite 4 iš šių vietų 4 tepimo kampuose. Skaičiuojama 200 ląstelių, skaičius padalintas į pusę ir nustatomas kiekvieno baltųjų kraujo kūnelių tipo skaičius.
Leukocitai yra kraujo elementai, greitai reaguojantys į įvairius išorinius poveikius ir pokyčius organizme. Bendras leukocitų skaičiaus nustatymas gali turėti didelę diagnostinę vertę, nes jis atskleidžia kraujo formuojančių organų būklę arba jų atsaką į žalingą poveikį. Leukocitų skaičiaus padidėjimas - leukocitozė - yra leukopoezės aktyvacijos rezultatas, jų skaičiaus sumažėjimas - leukopenija - gali priklausyti nuo kraujo formuojančių organų slopinimo, jų išeikvojimo ir padidėjusio leukocitų skilimo, veikiant anti-leukocitų antikūnams 1. Neutrofilai. Labiausiai kintama leukocitų grupė yra neutrofilai, kurių skaičius didėja daugeliu infekcijų, apsinuodijimų ir audinių suskirstymo.
Aktyvioms neutropozėms būdinga ne tik bendras neutrofilų skaičiaus padidėjimas kraujyje, bet ir nesubrendusių formų atsiradimas: didėja guolių skaičius, atsiranda jauni neutrofilai, kartais net mielocitai. Šis neutrofilinės kompozicijos „atjauninimas“ vadinamas leukocitų perėjimu į kairę. Apsauginį neutrofilų vaidmenį lemia jų fagocitinė funkcija, baktericidinis poveikis ir proteolitinių fermentų išsiskyrimas, skatinantis nekrozinio audinio rezorbciją ir žaizdų gijimą.
Dažniausiai regeneracinis poslinkis vyksta esant bet kuriam uždegiminiam procesui arba nekrozės dėmesiui. Labai aštrus kairysis perėjimas prie promyelocitų ir netgi myeloblastų, turinčių reikšmingą leukocitozę, vadinamas leukemoidine reakcija. Neutrofilų skaičiaus sumažėjimas - absoliutus neutropenija - atsiranda, kai kaulų čiulpai slopina kai kurių mikroorganizmų (vidurių šiltinės, bruceliozės ir kt.) Ir virusų, jonizuojančiosios spinduliuotės, daugelio vaistų toksinų poveikį.
2. Limfocitai. Limfocitozė stebima atsigaunant nuo ūminių infekcinių ligų, infekcinės mononukleozės, infekcinės limfocitozės, limfocitinės leukemijos, raudonukės, bruceliozės, tirotoksikozės.
Absoliutinė limfopenija atsiranda spinduliuotės ligos, sisteminių limfinės sistemos pažeidimų atveju: limfoma, limfosarkoma.
3. Eozinofilai. Jie randami kraujyje palyginti mažais kiekiais (daugiausia audiniuose), tačiau jų skaičius kartais žymiai padidėja alerginiuose procesuose (serumo liga, bronchinė astma), helmintinėmis invazijomis ir niežuliais dermatozėmis.
Sepsio, sunkių tuberkuliozės formų, vidurių šiltinės ir stiprios intoksikacijos eozinofilų - eozinopenijos - sumažėjimas iki pilno jų išnykimo.
4. Bazofilai. Ar yra svarbių audinių metabolizmo tarpininkų (riebalinių audinių ląstelių kraujo "ekvivalentai"). Kai organizmas yra jautrinamas, jų skaičius didėja, o kai alergenas vėl įvedamas, dėl jų suskirstymo jis smarkiai sumažėja.
5. Monocitai. Monocitų - monocitozės - skaičiaus didėjimas yra imuninių procesų raidos rodiklis. Monocitai yra atpažįstami kaip audinių makrofagų analogai. Monocitai randami daugelyje lėtinių ligų (chroniosepsio, tuberkuliozės, sifilio). Kartais pastebima, kad monocitopenija pasireiškia sunkiose septinėse, hipertoxicinėse vidurių šiltinės formose.
Agranulocitai. Skiriamasis agranulocitų bruožas yra ne segmentuotas branduolys ir bazofilinė (mėlyna) citoplazma.
Limfocitai yra mažiausias leukocitų dydis. Šerdis yra apvali, ovali arba pupelių forma; užima daugumą ląstelių, intensyviai spalvotų. Daugumos limfocitų, turinčių siaurą ratlankį, citoplazma supa branduolį, yra nudažyta šviesiai mėlyna spalva ir patikslinta iki branduolio.
Monocitai yra didžiausia iš kraujo ląstelių. Didelis netaisyklingos formos ir santykinai šviesios spalvos šerdis. Cytoplazma yra pilkšvai mėlyna, dūminė spalva, nėra aiškinama į šerdį
Be šių ląstelių, ji retai būna normaliajame kraujyje, o ląstelių ląstelės dažnai gali pasireikšti ligose. Jie pasižymi ekcentriškai esančia tankia šerdimi, dažnai su ratų struktūra. Šių ląstelių skaičius didėja su tam tikromis infekcinėmis ligomis, žaizdų sepse ir daugybine mieloma.
Apskaičiuojant leukocitų formulę, dėmesys skiriamas ne tik kiekybiniams pokyčiams, bet ir kokybiniams pokyčiams formų elementuose. Anksčiau buvo pastebėti degeneraciniai leukocitų pokyčiai. Sunkus apsinuodijimas, neutrofilų granuliacija tampa gausu, dideliu, intensyviai nudažytu ir vadinama toksiška (arba toksogenine). Kartais kraujo tepinėliai aptinkami krauju, dažomi kaip leukocitų branduolinė medžiaga. Tai yra vadinamasis „Botkin-Humprecht“ šešėliai - branduolinės chromatino liekanos, rodančios padidėjusį leukocitų trapumą, dėl kurio jie suskaidomi - leukocitolizė
99. Kraujo grupės nustatymo metodai, Rh faktoriaus sąvoka.
1. Kraujo grupės nustatymas pagal serumo serumus:
Reikalinga ši įranga:
o dviejų tipų hemagliutinuojančių serumų I (0), II (A), III (B) grupių, sudarytų iš dviejų skirtingų serijų, ir vienas IV (AB) serumo buteliukas
o buteliuką su izotoniniu natrio chlorido tirpalu pipete
o išvalykite sausą sausą plokštelę
o stiklinės skaidrės
o sterilios spyglių adatos, skirtos piršto kūnui ištraukti
o sterilūs marlės rutuliai;
Standartiniai kraujo grupės nustatymo serumai pagal ABO sistemą gaminami naudojant konkretų spalvos ženklą.: I (0) - bespalvis, II (A) - mėlyna, III (B) - raudona, IV (AB) - geltona. Serumas laikomas 4-10 ° C temperatūroje. Serumas turi būti lengvas ir skaidrus. Dribsniai, nuosėdos, drumstumas yra serumo netinkamumo požymiai. Pirmieji agliutinacijos požymiai turėtų pasirodyti ne vėliau kaip per 30 sekundžių.
Plokštelė yra padalinta į 4 kvadratus spalvotu pieštuku ir pagal laikrodžio rodyklę žymimi kvadratais I (0), II (A), III (B). Į atitinkamą plokštelės kvadratą pipete įdedama didelė dviejų I (0), II (A), W (B) grupių serumo lašai. Pirštų dėklas yra apdorojamas alkoholiu, o adata išpurškiama. Pirmasis kraujo lašas pašalinamas marlės rutuliu, tolesni lašai skirtingose stiklelio dalyse yra iš eilės išpilstyti į serumo lašus ir kruopščiai maišomi. Kraujo lašas turėtų būti 5-10 kartų mažesnis nei kraujo lašelis. Tada purtant plokštelę kruopščiai sumaišykite kraują su serumu. Preliminarūs rezultatai vertinami po 3 minučių, po to pridedama izotoninio natrio chlorido tirpalo lašo, dar kartą sumaišoma plokštelę, o po 5 minučių atliekamas galutinis agliutinacijos reakcijos įvertinimas.
Naudojant teigiamą izohemagliutinacijos testą, pridedant raudonųjų kraujo kūnelių dribsniai ir branduoliai, skiriant izotoninį natrio chlorido tirpalą ir maišant, nesiskiria.
Kai neigiama reakcijos lašai ant plokštelės yra skaidrūs, tolygiai rausvi, juose nėra dribsnių ir grūdų.
Galimi šie 4 agliutinacijos reakcijų deriniai su I (0), II (A), III (B) grupių standartiniais serumais.
v Visi trys serumai abiejose serijose nėra agliutinuoti. Kraujo tyrimas -
I grupė.
v izohemagliutinacijos reakcija neigiama abiejų serijų P (A) serijų grupėmis ir teigiama su serumo I (0) ir III (B) grupėmis. Kraujo tyrimas -
II (A) grupė.
v Izohemagliutinacijos reakcija yra neigiama III (B) grupės serume abiejose serijose ir teigiama su I (0) ir II (A) grupių serumu. Kraujo tyrimas -
III (B) grupė.
v Serumo I (0), II (A), III (B) grupės duoda teigiamą reakciją abiejose serijose. Kraujas priklauso IV (AB) grupei. Tačiau prieš pateikiant tokią išvadą, reikia atlikti izohemagliutinacijos reakciją su grupės standartiniu serumu IV (AB) ta pačia tvarka. Neigiamas izohemagliutinacijos testas leidžia galutinai priskirti bandomąjį kraują IV (AB) grupei.
2. Rh faktoriaus sąvoka.
Kitas antigenas (agliutinogenas) rastas eritrocituose, vadinamas Rh faktoriu. Visi žmonės yra suskirstyti į asmenis, turinčius Rh teigiamą (Rh +) ir Rh-neigiamą (Rh) kraują. Nustatyta, kad 85% eritrocitų žmonių turi Rh faktorių, t. Y. Jų kraujas yra Rh-teigiamas, o 15% jo neturi, t. Y. Šių žmonių kraujas yra Rh-neigiamas. Į Rh faktorių (Rh-antigeną) kraujyje paprastai nėra anti-Rh-agglutinino (paruoštų antikūnų). Tokie antikūnai pasireiškia kraujo serume tik imunizavus asmenį su Rh-neigiamu krauju su Rh-teigiamais eritrocitais. Tokia imunizacija atsiranda dėl pakartotinio Rh teigiamo kraujo perpylimo į Rh-neigiamą gavėją arba nėštumo metu su Rh-neigiamu Rh teigiamu krauju. Tokiu būdu imunizuoti žmonės tampa jautrūs: kai jie yra transfuzuojami su Rh teigiamu krauju, atsiranda rimta komplikacija - kraujo perpylimo šokas.
Leukocitų ir trombocitų skaičiaus skaičiavimas
Veiksniai, turintys įtakos baltųjų kraujo kūnelių tyrimo teisingumui
- ilgas kraujo saugojimas kambario temperatūroje
Leukocitų kiekio kraujyje normos
Amžius Leukocitų skaičius
- 1 diena 11.6 - 22.0
- 1 savaitė 8.1. - 14.3
- 1 mėnuo 7.6 - 12.4
- Suaugusieji 4,0 - 9,0
Leukocitų kiekio kraujyje nustatymo metodai.
- Leukocitų skaičiavimas skaičiavimo kameroje
- Leukocitų skaičiavimas hematologiniuose analizatoriuose
Leukocitų skaičiaus nustatymas skaičiavimo kameroje.
- Leukocitų skaičiavimas mikroskopu atliekamas lizuojant raudonuosius kraujo kūnelius 100 didelių skaičiavimo tinklelio kvadratų ir perskaičiuojant 1 litrui kraujo, remiantis kvadratų tūriu ir kraujo praskiedimu. Leukocitų skaičius turi būti atliekamas per 2-4 valandas po kraujo surinkimo.
- Jei periferiniame kraujyje yra branduolinių raudonųjų ląstelių, jie nėra lizuojami ir skaičiuojami kartu su leukocitais. Šiuo atveju, norint nustatyti tikrąjį leukocitų skaičių, raudonoje eilutėje esančių ląstelių skaičius atimamas iš bendro skaičiuotų ląstelių skaičiaus.
- Pavyzdžiui: bendras leukocitų skaičius skaičiuojant kameroje (arba analizatoriuje) -45x109 / l. Apskaičiuojant leukocitų formulę nustatyta, kad 100 leukocitų yra 50 eritroblastų (normoblastų).
Apskaičiuojame tikrąjį leukocitų kiekį kraujyje:
150 ląstelių - 45 x 109 / l
100 ląstelių (leukocitų) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l
Taigi tikrasis leukocitų skaičius kraujyje yra 30 x 109 / l.
Pagrindiniai klaidų šaltiniai skaičiuojant leukocitus kameroje:
- Netinkamas kraujo ir acto rūgšties kiekio santykis, paimtas mėgintuvėlyje.
- Netinkamai paruoštas acto rūgšties tirpalas (esant daugiau kaip 5% koncentracijos, kai kurie leukocitai gali susilpnėti, todėl rezultatas bus nepakankamai įvertintas).
- Ilgalaikis mėginio veikimas esant aukštesnei nei 28 ° C temperatūrai, kuri gali pagreitinti leukocitų lizę mėginyje ir sukelti nepakankamą rezultatą.
- Netinkamas Goryaev kameros užpildymas. Kaip ir apskaičiuojant raudonuosius kraujo kūnelius, fotoaparatas turi būti paliktas 1 minutę, kad būtų galima nusistatyti ląsteles.
- Po ankstesnio apibrėžimo „Goryaev“ kamera nebuvo pakankamai gerai išplauta. Kameroje likusieji leukocitai gali pervertinti analizės rezultatus.
Trombocitų skaičiavimo metodai
- skaičiavimo kameroje
Kiekviena metodų grupė turi privalumų ir trūkumų.
- Trombocitų skaičiavimas kameroje yra pakankamai tikslus, nereikia apskaičiuoti raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus. Kita vertus, šis metodas yra sunkesnis, nes natūralios formos trombocitai vaizduojami mažais ir blogai kontrastingais elementais. Šio metodo trūkumas yra trombocitų skaičiavimas artimiausiomis valandomis po kraujo.
- Trombocitų kiekio kraujyje nustatymas yra žymiai prastesnis, palyginti su kameros metodu ar automatiniais skaitikliais. Kraujo tepimo skaičiavimo klaidos gali būti dėl prastos tepalo kokybės ir su tuo susijusio netolygaus trombocitų pasiskirstymo, netinkamo raudonųjų kraujo kūnelių skaičiaus nustatymo. Svarbus šio metodo trūkumas yra būtinybė tuo pačiu metu skaičiuoti trombocitus ir kraujo ląsteles. Jo privalumas yra gebėjimas bet kuriuo metu tirti trombocitus, neatsižvelgiant į kraujo surinkimo laiką.
- Trombocitų nustatymo metodas, naudojant hematologinį analizatorių, leidžia tiksliai nustatyti trombocitų skaičių, jų vidutinį tūrį ir pasiskirstymą pagal tūrį.
Unifikuotas kraujo leukocitų skaičiavimo skaičiavimo kameroje metodas;
Leukocitų kiekio kraujyje skaičiavimo metodai
Unified 2 metodai leukocitų kiekiui kraujyje nustatyti:
- skaičiavimo kameroje;
- naudojant hematologinius analizatorius.
Principas Leukocitai skaičiuojami mikroskopu tam tikrame skaičiavimo kameros tūriu, pastoviam kraujo praskiedimui po raudonųjų kraujo kūnelių naikinimo.
Reagentas: 3-5% acto rūgšties tirpalo, dažomas vandeninio metileno mėlynojo tirpalo, kad būtų galima užteršti leukocitų branduolius ir palengvinti jų skaičiavimą. Tirpalas yra mėlynos spalvos, stabilus laikant.
Speciali įranga: mikroskopas, skaičiavimo kamera Goryaeva.
Nustatymo eiga. Naudojant matavimo pipetę arba automatinį dozatorių, į agliutinacijos mėgintuvėlį pilamas tiksliai 0,4 ml acto rūgšties tirpalo, prie kurio pridedama 0,02 ml (Sali kapiliarų). Kapiliarą keletą kartų nuplaukite rūgšties tirpalu ir sumaišykite mėgintuvėlio turinį. Tai sukelia kraujo praskiedimą 20 kartų. Palikite iki skaičiavimo, bet ne ilgiau kaip 2–4 val. Po kraujo mėginių paėmimo. „Goryaev“ kamera yra paruošta darbui, nuvalydama stiklą, kad atsirastų vaivorykštės žiedai. Dar kartą kruopščiai suplakite mėgintuvėlio turinį ir užpildykite Goryaev kamerą su šiuo mišiniu, naudodami Pasteur pipetę arba stiklinį lazdą su lydytu galu. Užpildytą skaičiavimo kamerą palikite 1 minutę horizontaliai leukocitų nusėdimui. Leukocitai skaičiuojami 100 didelių nesuskaičiuojamų skaičiavimo kameros kvadratų tokiomis sąlygomis: kondensatorius nuleistas, okuliaras 10x arba 15x, objektyvas 8x. Skaičiavimas prasideda viršutiniame kairiajame Goryaev fotoaparato tinklo kampe. Skaičiuojant leukocitus, jie vadovaujasi taisykle: visos langelio viduje esančios ląstelės ir demarkacijos linijos skaičiuojamos, jei jos dažniausiai eina į aikštę. Ląstelės, susikertančios dalijamos linijos tiksliai per pusę, skaičiuojamos tik dviejose kvadrato pusėse (pavyzdžiui, kairėje ir viršuje).
Skaičiavimas Apskaičiuojant leukocitų skaičių 1 μl kraujo, naudokite formulę:
- leukocitų skaičius 1mkl kraujyje;
a - leukocitų skaičius, apskaičiuotas 100 didelių kvadratų;
4000 - tūrio perskaičiavimo koeficientas iki 1 µl, remiantis mažo kvadrato tūriu, kuris yra µl;
1600 - skaičiuotų mažų kvadratų skaičius;
20 - kraujo skiedimas.
Leukocitų skaičius SI vienetais (1 l kraujo) konvertuojamas, gautas skaičius padauginamas iš 10 6.
Praktiškai nustatant leukocitų kiekį 1 l kraujo, leukocitų skaičius, apskaičiuotas 100 didelių skaičiavimo kameros kvadratų, padauginamas iš 50, padalintas iš 1000 (tai yra, perkeliamas į kablelį 3 ženklais į kairę) ir padaugintas iš 10 9.
Leukocitų skaičiavimo metodai Goryajevo kameroje, rodiklių ir nukrypimų normos
„Goryaev“ kamera yra prietaisas, skirtas matuoti tam tikrą kiekį skysčio (kraujo, šlapimo) ląstelių ir dalelių, susidedančių iš specialaus storio objekto ir stiklo.
Stiklo skaidrėje viduryje yra įleidžiamas plotas, kuriame yra 225 didelių kvadratų tinklelis. Iš šių kvadratų 25 yra tolygiai suskirstyti į 16 mažesnių kvadratų. Dėl šio tinklo apimties skaičiavimas atliekamas tiksliau nei kituose rankiniuose skaičiavimo įrenginiuose.
Fotoaparato paslauga
Naudojant prietaisą, skaidrė dezinfekuojama panardinant į 4% formalino tirpalą vieną valandą arba 70% etanolio tirpale pusvalandį. Po to kamera gerai išplaunama distiliuotu vandeniu. Skysčio perteklius pašalinamas minkšta šluoste. Verta atkreipti dėmesį į tai, kad fotoaparatas negali būti nuvalytas medvilnės tamponu dėl to prilipusių pluoštų. Saugomas stiklas sausoje vietoje.
Naudojant fotoaparatą, skaičiuojami PE, kurie yra tinklelio kvadrato viduje ir viršutinėje bei kairėje jo perimetro linijose. Tokiu atveju nėra įtrauktos dalelės, kurios šio elemento skaičiavimo metu liečia dešines ir apatines perimetro linijas.
Leukocitų nustatymas kraujyje
Leukocitų skaičiavimo metodas
Leukocitų skaičiaus skaičiavimas prasideda nuo kraujo praskiedimo 3-5% etano rūgšties tirpale su metilo mėlynu 20 kartų. Darbo medžiaga prieš naudojimą nuvalykite sausu marle.
Viršutinis stiklas turi būti nuvalytas prieš atsiradus Newton spalvotiems žiedams. Toliau kamera užpildoma praskiestu krauju, o pirmieji du lašai išleidžiami į filtravimo popierių. Skystis patenka į kamerą dėl vandens kapiliarinės savybės. Svarbu užtikrinti, kad užpildant niekas nepatektų į griovelius. Jei taip atsitinka, skystis švelniai pašalinamas filtravimo popieriumi. Tada palikite tinklelį vieną minutę, laukdami, kol FE sustabdys judėjimą.
Baltųjų kraujo kūnelių skaičius atliekamas per šimtą didelių kvadratų, esant mažam padidinimui, ty su okuliaru 10x ir 8x tikslu pagal Egorovo taisyklę. Gautas skaičius naudojamas formulėje.
X = (n × 250 × 20) / 100 arba X = n × 50
X - leukocitų skaičius.
n yra skaičius, gautas skaičiuojant kameroje.
Nustatomas leukocitų skaičius, atsižvelgiant į didelių tinklelių kvadratų skaičių - 100 ir kraujo praskiedimą - 20.
Kaip yra leukocitų skaičius
Leukocitų dažnis ir sutrikimai
Leukocitų dažnis žmonėms yra 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Arba kitaip, apie 6000 baltųjų kraujo kūnelių yra 1 kubiniame mm kraujyje.
Išorės fiziologiniai veiksniai gali turėti įtakos nukrypimams nuo normos:
- maisto vartojimas prieš kraujo donorystę;
- stresas;
- nėštumo ar menstruacijų moterims;
- hipotermija arba perkaitimas;
- didelis fizinis krūvis prieš bandymą.
Jei baltųjų kraujo kūnelių skaičius viršija 9,0 × 10⁹ / l (leukocitai yra padidėję), ši būklė vadinama leukocitoze. Panašus vaizdas gali būti pastebėtas piktybinių kraujo ligų, infekcijų, radiacinės žalos ir apsinuodijimo metu.
Vaistai taip pat gali padidinti leukocitų skaičių. Audinių nekrozė, sunkus kraujavimas, įskaitant operacijas, inkstų koma, širdies liga - visa tai gali sukelti leukocitozę.
Leukocitų, kurių kiekis mažesnis kaip 3,9 × 10⁹ / l, sumažėjimas vadinamas leukopenija. Tačiau kai kuriems žmonėms nustatytas fiksuotas leukocitų skaičius yra 3,5 × 10⁹ / l. Manoma, kad tokie žmonės išlaiko šių ląstelių rezervą 50 kartų daugiau nei kraujyje. Po ilgų raumenų darbo, po infekcijos ir virusų (vidurių šiltinės, gripo ir tymų), po analgetikų, sulfonamidų ir kitų vaistų, yra funkcinė leukopenija.
Leukocitų formulė
Visų tipų leukocitai yra leukocitų formulė. Jame galite nustatyti tam tikras patologijas. Formulės normos skiriasi atsižvelgiant į asmens amžių ir laikotarpį. Nėštumo metu arba po gimdymo moterys akivaizdžiai matosi.
Šių ląstelių tipų santykiui apskaičiuoti naudojami įvairūs metodai, tačiau jie visi susiję su tuo, kad sunkesnės ląstelės (pvz., Bazofilai) yra arčiau tepalo krašto, o limfocitai, kaip ir šviesos ląstelės, lieka viduryje.
- Filipchenko metodas. Taikant šį metodą, apskaičiavimas atliekamas išilgai tiesiosios sienos tiesia linija iš vieno galo į kitą. Insultas yra psichiškai suskirstytas į tris dalis.
- Schilling metodas. Leukocitai skaičiuojami keturiose tepimo vietose.
Gauti duomenys įrašomi į lentelę. Atskirai kiekvienos rūšies baltųjų kraujo kūnelių skaičius apskaičiuojamas pagal formules. Pažymėti tie elementai, kurie buvo peržiūrėti. Rezultatas išlaikomas iki momento, kol visų suskaičiuotų ląstelių suma yra 100.
Leukocitų skaičiavimo šlapime metodai
Šlapime apskaičiuojamas leukocitų skaičius ląstelėje Goryaeva Nechiporenko. Ši analizė reikalinga stebint inkstų ligą. Periodinis šlapimo tyrimas padeda stebėti gydymo teisingumą ir paskirtos terapijos veiksmingumą.
Šlapimo surinkimas
Tyrime yra tik pirmasis ryto šlapimas šlapinimosi viduryje. Svarbu, kad pacientas laikytųsi pagrindinių biomaterijos surinkimo taisyklių. Specialus papildomas mokymas, reikalingas tyrimui, nėra būtinas.
Skaičiavimo metodas
10 ml šviežiai surinkto šlapimo centrifuguojama tris minutes 2,5 tūkst. Apsisukimų per minutę. Prieš tai būtina užtikrinti, kad šlapimas, kad būtų išvengta dalinio ląstelių skaidymo, turi silpnai rūgštinę reakciją.
Naudojant pipetę su siauru, nubrėžtu galu, nuimkite viršutinį sluoksnį. Atsižvelgiant į nuosėdų tūrį, in vitro paliekama nuo 0,5 ml šlapimo iki 1 ml.
Nuosėdos atsargiai sumaišomos su supernatantu. Goryaev skaičiavimo kamerą pripildo gautas tirpalas pagal panašų principą, kuris naudojamas apskaičiuojant kraujo PV. Fotoaparatas paliekamas 3–5 minutes.
Baltos kraujo ląstelės turi būti skaičiuojamos dideliuose kvadratuose per visą tinklelį su 7x okuliaru ir 40x objektyvu.
Gautas skaičius naudojamas formulėje:
X = (a / 0,9) × (1000 / V)
X - leukocitų skaičius 1 ml šlapimo.
a - apskaičiuotas kiekis, padalytas iš kameros tūrio 1 μl šlapimo nuosėdų.
v - šiam tyrimui skirtas šlapimo kiekis.
1000 - nuosėdų kiekis.
Tai svarbu! Leukocitų norma: 1 ml šlapimo yra ne daugiau kaip 2 × 10³ baltųjų kraujo kūnelių.
Leukocitų kiekis kraujyje
Laboratorijos darbuotojai, norėdami aptikti leukocitų kiekį kraujyje, dažniausiai naudoja Goryaev kamerą. Leukocitų skaičiavimas Goryaev kameroje yra ne toks tikslus metodas, kaip leukocitų nustatymas naudojant elektroninius prietaisus. Klaidos dydis yra ± 7%.
Kaip atliekamas skaičiavimas
- Į mėgintuvėlį įpilkite 0,4 mililitro praskiedimo skysčio, taip pat 0,02 ml kapiliarinio kraujo. Paruoštas veisimas laikomas lygiu 1:20.
- Kaip skiediklis paprastai naudojamas 3 arba 5% acto rūgšties tirpalas. Jis yra iš anksto tonuotas su metileno mėlyna, kuri pagal reakcijos spalvą lemia leukocitų branduolius.
- Prieš užpildant kamerą, Goryaev vamzdis kuo labiau suplakti. Fotoaparato užpildymas yra toks pat kaip ir raudonųjų kraujo kūnelių skaičiavimui.
Skaičiavimo funkcijos
Pagal leukocitų, gerokai mažesnių už raudonųjų kraujo kūnelių skaičių, dėl šios priežasties skaičiavimas atliekamas 100 didelių kvadratų. 100 kvadratų buvo apskaičiuotas leukocitų skaičius.
Mažo kvadratinio kvadratinio milimetro tūrio ir 20 kartų didesnio kraujo skiedimo tūris leukocitų skaičius apskaičiuojamas taip: 4000x20, o paskui padalintas iš 1600. Pasirodo, 1/2 x a.
Norint gauti baltųjų kraujo kūnelių kiekį 1 µl, apskaičiuotas skaičius turėtų būti padalintas iš 2 ir pridėti dar du nulius.
Leukocitų nukrypimas nuo lygio rodo leukocitozę ir leukopeniją, todėl reikia nedelsiant atlikti išsamų tyrimą, nes yra didelė tuberkuliozės, pneumonijos, sepsio, vidurių šiltinės, radiacijos ligos tikimybė.